研究課題/領域番号 |
22K06466
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分46020:神経形態学関連
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研究機関 | 同志社大学 |
研究代表者 |
舟本 聡 同志社大学, 生命医科学部, 准教授 (10345043)
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研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2024年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
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キーワード | アルツハイマー病 / アミロイドβ / 大脳皮質 / 小脳 / リンパ節 / クリアランス / 神経変性疾患 |
研究開始時の研究の概要 |
Aβは、アルツハイマー病(AD)の原因物質として知られ、AD脳の病理的特徴の一つ老人斑の主要な構成成分である。老人斑は、大脳皮質に多く認められるが、小脳では少ない。先行研究により、実際には大脳と小脳でAβ産生量に大きな差がないことが分かっている。小脳がADの特徴を呈さないことは、小脳にはADに抗する未知の機構が存在することを示唆する。本研究では、この機構の解明に取り組む。具体的には大脳と小脳に蛍光標識Aβの定位注入を通して、Aβの排出機序の解明やAβ凝集体形成の比較検討を行い、Aβなどの構造異常タンパク質による神経変性疾患に対抗するための洞察を得ることを目的としている。
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研究実績の概要 |
加齢によるAb42排出の影響を調べるために、2ヶ月齢と15ヶ月齢マウスの大脳皮質と小脳にHilyte Fluor-555標識Ab42を定位注入し、スライス標本での観察を行った。その結果、これらのマウス間で、大脳皮質と小脳に注入した蛍光標識Ab42分布域の差は認めらず、小脳についてはいずれの月齢のマウスでもAb42の拡散と排出が顕著だった。しかし、高齢マウスの検体数が十分ではないので、引き続き検討を重ねる予定である。 これまで、脳領域のAbの拡散や排出の観察はAb42に限定していたが、これまで得られた知見がAb特有の拡散や排出の違いか否かを検討するために、Ab42の対照として、そのアミノ酸配列をランダムにしたAb42(FAM標識スクランブルAb42)についても検討した。その結果、大脳皮質に注入した場合よりも、小脳に注入した方がわずかにFAM標識スクランブルAb42の拡散が速い傾向が見られたものの、大脳皮質と小脳の双方でFAM標識スクランブルAb42注入後2時間で拡散のピークを迎え、その後は同程度に拡散域が減弱していた。この観察結果は、小脳でAb42の拡散と排出が盛んなのは、アミノ酸組成よりもアミノ酸配列に依存することを示唆している。 次にAb拡散や排出について、Ab分子種の違いについて検討した。これには、Hilyte Fluor-555標識Ab40を大脳皮質と小脳に定位注入して、Ab42での知見と比較した。その結果、Hilyte Fluor-555標識Ab40の場合でも、小脳では拡散が大脳皮質の5倍ほど速く、3日目には顕著に減弱していた。ただし、Hilyte Fluor-555標識Ab40の場合は、Hilyte Fluor-555標識Ab42を注入した場合よりも拡散や排出の程度は顕著ではなかった。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
事前の準備が整っており、実験スキルが安定していたことが理由としてあげられる。
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今後の研究の推進方策 |
高齢マウスでのAb42の拡散や排出を再度検討する。合成Abを注入すると注入箇所から漏れ出たAbを追跡している可能性も否定できないため、今後はアデノ随伴ウイルスで中枢神経特異的にAb42を産生させて、その拡散や排出について評価する予定である。
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