| 研究課題/領域番号 |
22K06561
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分47020:薬系分析および物理化学関連
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
黒田 直敬 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(薬学系), 教授 (50234612)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2023年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2022年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
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| キーワード | 分子インプリントポリマー / プラスチック抗体 / 薬毒物検査 / 化学発光 / キノン |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では，抗体や酵素といったタンパク質に代わり，分子認識能とシグナル発生能力を併せ持つ機能性ポリマー（プラスチック抗体）を作製し，免疫測定法への導入を目指す。
このための手段として，従来よりも精密な分子認識が可能な分子インプリントポリマー（MIP）の作製と，安定なシグナル発生を可能とする化学発光性ポリマーの作製とを組み合わせることで，従来のタンパク質からなる酵素標識抗体の欠点を克服する新たな免疫測定法のツールの開発を目指す。
開発した機能性プラスチック抗体を市販の酵素免疫測定キットに適用し，性能評価を行う。
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| 研究実績の概要 |
抗体の分子認識能を利用した酵素免疫測定法は、操作が簡便、迅速である。また、抗体への酵素標識等により高感度検出が可能であるため、薬毒物検査や臨床検査などに用いられている。しかし、抗体の作製には高度な技術や複雑な操作が必要であること。動物を用いて作製するため、極端な pH や高温条件での安定性は低く、取り扱いが難しいといった問題点がある。本研究では、抗体や酵素といったタンパク質に代わり、分子認識能とシグナル発生能力を併せ持つ機能性ポリマー(プラスチック抗体)を作製し、免疫測定法への導入を目指す。 このための手段として、従来よりも精密な分子認識が可能な分子インプリントポリマー (MIP) の作製と、安定なシグナル発生を可能とする化学発光性ポリマーの作製とを組み合わせることで、従来のタンパク質からなる酵素標識抗体の欠点を克服する新たな免疫測定法のツールの開発を目指す。
本年度は、化学発光性ポリマー作製のための原料としてキノン部位を有する機能性モノマーの合成を行なった。キノンは DTT といった還元剤と溶存酸素の存在下で活性酸素を生じ、これが化学発光試薬であるルミノールと反応して化学発光が生じる。N-(3-アミノプロピル)メタクリルアミド塩酸塩 (APMA) と1,2-ナフトキノン-4-スルホン酸カリウム (NQS) を反応させ、キノン部位を有する化合物 APMA-NQ を合成した。次に、合成甘味料のアスパルテームを鋳型、APMA-NQ をモノマーとして MIP の作製を行った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
プラスチック抗体の原料であるキノン部位を有するモノマーの合成と、これを重合させてポリマーが作成できることは確認できた。しかしながら、安定したポリマーの作製法の確立に時間を要し、作製したポリマーの鋳型分子に対する分子認識能を評価するまでには至らなかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は、ゲルろ過法や限外ろ過法といった手段により、作製した MIP のアスパルテームに対する分子認識能の評価を行う予定である。また、MIP の合成条件の最適化や化学発光応答性の調査を行う予定である。
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