研究課題/領域番号 |
22K06640
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分47040:薬理学関連
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研究機関 | 大阪医科薬科大学 |
研究代表者 |
横江 俊一 大阪医科薬科大学, 医学部, 助教 (40454756)
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研究分担者 |
朝日 通雄 大阪医科薬科大学, 医学部, 教授 (10397614)
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研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
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キーワード | 心不全 / ユビキチン / SARAF |
研究開始時の研究の概要 |
心不全では、細胞質内カルシウム(Ca2+)濃度の慢性的な上昇が心機能の更なる低下を引き起こしていることも病態悪化の一因と考えられているが、申請者らは、心不全モデルマウスにおいて、Ca2+流入の抑制性制御分子であるSARAFの発現が大きく低下していることを見出した。さらに、SARAFの分解を抑制している分子であるALG-2の発現も低下していることを見出した。そこで、これらの分子の発現変化が、細胞質内Ca2+濃度上昇による心不全病態悪化の一因になっていると考え、SARAFおよびALG-2によるCa2+流入制御機構を解明し、心不全病態との関連を明らかにすることを目的とする。
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研究実績の概要 |
心不全では、細胞質内カルシウム(Ca2+)濃度の慢性的な上昇が心機能のさらなる低下を引き起こしていることも病態悪化の一因と考えられているが、申請者らは、心不全モデルマウスにおいて、Ca2+流入の抑制性制御分子であるSARAF、およびSARAFの分解を抑制している分子であるALG-2の発現が低下している事を見出したため、これら分子と心不全病態の関連を明らかにしていく。 2022年度は、まずSARAF, ALG-2の不全心筋における発現変化を病態の重篤度に応じて詳細に調べたところ、心不全モデルマウスの病態の重篤度が増すほど、それに反比例してSARAF, ALG-2のタンパク発現量は低下していた。さらに、SARAF, ALG-2のmRNA量を計測したところ、mRNA量には変化を認めなかった。従って、心不全病態下ではSARAF, ALG-2の合成系には影響が無く、分解系が影響を受けている事が示唆された。次に、心不全病態下におけるSARAFの減少に、ユビキチン化-タンパク質分解系が関与しているかどうかを明らかにするために、SARAFのユビキチン化を免疫沈降法により検討したところ、心不全モデルマウスの心臓では、野生型マウスの心臓と比較して、SARAFのポリユビキチン化が亢進していた。また近年、ALG-2がユビキチン化を制御することによりSARAFの安定性を司っている事が報告されたため、ラット心臓由来H9c2細胞株を用いてALG-2をノックダウンさせ、免疫沈降法によりSARAFのユビキチン化を検討したところ、コントロールのH9c2細胞と比較してSARAFのポリユビキチン化が亢進していた。 以上より、心不全病態下ではALG-2の発現量が減少していることにより、SARAFのポリユビキチン化および分解が亢進している事が示唆された。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初予定していた通り、重篤度の異なる心不全モデルマウス心臓におけるSARAFならびにALG-2の発現量を明らかにする事ができた。また、ALG-2がSARAFのユビキチン化および分解を担っている事も観察できた。
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今後の研究の推進方策 |
2023年度以降は、心不全モデルマウス心臓にアデノ随伴ウイルスベクター(AAV)を利用してSARAF遺伝子を補充する事で、心不全の病態が進行・悪化するのを抑制できるか検討する。また、同様の方法でALG-2遺伝子を補充する事により、心不全の病態が進行・悪化するのを抑制できるか検討する事で、SARAF/ALG-2を標的とした治療戦略が可能かどうか検証していく。
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