| 研究課題/領域番号 |
22K07113
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分49070:免疫学関連
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
和田 はるか 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 准教授 (70392181)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2023年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2022年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
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| キーワード | T前駆細胞 / 樹状細胞 / 制御性T細胞 / T細胞選択 / T細胞分化 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
申請者は、T前駆細胞由来樹状細胞（ptDC）は独特な分化経路を経て生成することから、末梢循環に由来するcirDCとは異なり何らかの特有の機能・存在意義を有しているのではないかと着想した。
本研究の学術的な問いは「ptDCはTregの生成を介し自己免疫寛容の構築に寄与するか」である。これを明らかにするため、本研究では以下の項目について研究を行う。
１．“ptDCが介在するTregの生成”という現象が存在するかを解析する
２．ptDCが介在し生成したTregは自己寛容の誘導に資するかを解析する
３．ptDCによるTreg生成やT細胞の負の選択における分子機構を解析する
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| 研究実績の概要 |
胸腺はT細胞が分化成熟する場である。胸腺組織はT前駆細胞だけでなく、胸腺上皮細胞（TEC）や樹状細胞（DC）等も存在し、それらはT細胞の分化成熟に関与する。T前駆細胞は、胸腺内で正の選択（自己細胞に適度に反応できる細胞が選ばれる）と負の選択（自己細胞に過剰に反応する細胞が死滅する）を経て自己に寛容で適切に異物に反応しうるT細胞のみが選択され末梢に移出される。
胸腺における免疫寛容構築の機序として、T細胞の負の選択、制御性T細胞の生成が挙げられる。申請者らはこれまでにT前駆細胞由来樹状細胞（ptDC）は負の選択に寄与していることを明らかにした。本研究ではptDCが制御性T細胞の生成を誘導し、免疫寛容構築に寄与するかを解析したい。
申請者は、ptDCは独特な分化経路を経て生成することから、cirDCとは異なり何らかの特有の機能・存在意義を有しているのではないかと着想した。ptDCの特徴を明らかにする目的でsingle cell RNA sequence解析を実施した。ptDCを循環血に由来するDC（cirDC）同定するため、以下のマウスモデルを考案・作製した。B6マウス（CD45.2を発現、H-2b）をレシピエントとし、hCD3e Tgマウス(T前駆細胞を欠損、CD45.2を発現、H-2k)とCD45.1-B6マウス（CD45.1を発現するコンジェニックマウス、H-2b。骨髄移植の影響を考慮するため、レシピエントとは異なるマーカーをもつB6を利用）の骨髄を混合して移植した。尚、この三者の血液細胞は、CD45.1/CD45.2、H-2b/H-2kの発現で区別可能である。骨髄移植後、定常状態となったところで、レシピエント胸腺から胸腺内DCを回収し、Single cell RNA sequence解析を実施した。
この解析により、ptDCを同定し、現在ptDCの生物学的特徴を解析している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
計画通りに進行しているため。
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| 今後の研究の推進方策 |
ptDCの生物学的特徴を解析する。
作製した血液キメラマウスモデル系およびIn vitro実験系にて、Tregの新規生成についてフローサイトメトリーで解析する。
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