| 研究課題/領域番号 |
22K07151
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分50010:腫瘍生物学関連
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
梶原 健太郎 大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (30581102)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2024年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | がん / 増殖因子受容体 / 脂質ラフト / CDCP1 / シグナル伝達 / 脂質ドメイン / 創薬 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
がんは極めて複雑な疾患であり、その治療は困難を極める。これまでに多様なシグナル伝達の活性化ががん化を促進することが明らかにされ、様々な分子標的薬が開発されてきた。しかし、がんの制圧には至っておらず、新たな創薬アプローチが求められている。申請者は、CDCP1は高浸潤性のがん細胞で高発現であること、多様な受容体タンパク質と相互作用を介してシグナル伝達のハブとして機能することを明らかにした。さらに、ハブ形成にはCDCP1の翻訳後修飾が重要であることを見いだした。本申請では、CDCP1の翻訳後修飾ががん化シグナルに与える影響を明らかにし、それをターゲットにした新たながん抑制戦略の立案を目指す。
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| 研究実績の概要 |
がん細胞では様々な増殖因子レセプターが変異とともに過剰発現しており、細胞内シグナル伝達が活性化しやすい状況になっている。さらに一部のレセプターが集積することによって、多様なシグナル伝達の活性化が起こることが知られている。我々は様々な増殖因子レセプターと相互作用するタンパク質CDCP1を同定した。CDCP1は脂質ドメインに移行する特性があり、過剰発現すると様々なレセプターが集積し、シグナル活性化の亢進が起こることを明らかにした。すなわち、CDCP1は増殖因子レセプターのハブとして機能している可能性が考えられる。今後は、このCDCP1をターゲットにした創薬の基礎研究を展開する。2022年度は以下の研究を実施した。
【研究A】構造情報をベースにしたCDCP1による増殖因子レセプターの機能制御の解析：CDCP1の構造変化前後のタンパク質を精製して、結晶構造解析を実施した。得られた構造情報から、構造変化の仕組みの一端を明らかにした。さらに、増殖因子レセプターとの相互作用に重要なアミノ酸の候補を見出すことができた。
【研究B】CDCP1の空間的な制御の理解に向けた研究：タンパク質の脂質ドメイン移行には、脂肪酸修飾が重要な要件である。脂肪酸修飾を触媒するZDHHCタンパク質は多数存在しており、これまでにCDCP1の脂質修飾を担う責任ZDHHCを同定するためのアッセイ系の構築を行った。
【研究C】相互作用の阻害方法の開発に向けた基礎研究：CDCP1は細胞外領域を介して複数の増殖因子レセプターと相互作用する。これはCDCP1の細胞外領域を制御することで、レセプターとの相互作用、ひいてはその機能を調整できる可能性を示唆している。そこで、CDCP1の細胞外領域を制御することを目的として、結合タンパク質の調整に取り組んだ。これまでにCDCP1に結合することが想定されるタンパク質を複数種類作製した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
【研究A】CDCP1の構造変化によって増殖因子レセプターとの相互作用が大きく変化する。これが本研究の最大のポイントのひとつであるが、おおよその変化のメカニズムを構造レベルで理解することができたため。さらに、増殖因子レセプターとの相互作用に重要なアミノ酸候補を見出すことができたため。
【研究B】CDCP1の脂肪酸修飾を担うZDHHCタンパク質のアッセイ系の基礎を構築することができたため。
【研究C】当初の予定通りに、CDCP1の細胞外領域と相互作用するタンパク質を複数種類作製することができたため。
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| 今後の研究の推進方策 |
【研究A】切断型CDCP1の構造変化の詳細を理解するために、引き続き結晶構造解析を実施する。さらに、前年度までに見出した増殖因子レセプターとの相互作用に重要なアミノ酸候補に変異を導入するなどして、CDCP1と増殖因子レセプターの相互作用を定性的、定量的に解析する。
【研究B】前年度までに構築したCDCP1の脂肪酸修飾のアッセイ系を利用して、責任ZDHHCタンパク質の探索を実施する。責任酵素候補を見出すことができた場合には、その機能解析を実施する。
【研究C】前年度までに作製したCDCP1の細胞外領域と相互作用するタンパク質の評価を、CDCP1と増殖因子レセプターが高発現しているがん細胞を利用して実施する。必要に応じて、相互作用タンパク質の改変にも着手する。
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