| 研究課題/領域番号 |
22K07581
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分52030:精神神経科学関連
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| 研究機関 | 愛媛大学 |
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研究代表者 |
堀内 史枝 愛媛大学, 児童精神医学講座, 教授 (50363247)
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| 研究分担者 |
吉野 祐太 愛媛大学, 医学部附属病院, 助教 (10646243)
河邉 憲太郎 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (90457375)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2024年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2023年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2022年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
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| キーワード | 自閉スペクトラム症 / 診断マーカー / miR-15b-5p / 早期診断 / 頬粘膜 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
自閉スペクトラム症は、社会性の障害を中核症状とする神経発達症であるが、未だ診断に有用な生物学的指標は存在しない。成人期ASD者を対象に、血漿中の免疫系における遺伝子発現の変化を確認した。今後、血漿でみられた変化が頬粘膜サンプルでも同様の変化明らかにし、未就学児についても検証する。ひいては、小児ASD独自の変化として検討する。ひいては、早期診断に役立つスクリーニング手法としての有用性を検証する。
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| 研究実績の概要 |
自閉症スペクトラム障害（ASD）は、遺伝率が高いことが知られている神経発達症である。ASDの診断は、臨床症状の異質性が高いため困難である。マイクロRNA（miRNA）はASDの診断用バイオマーカーとなる可能性があり、いくつかの研究でmiRNAとASDの病態の関係が示されている。我々は、ASDの診断バイオマーカーを探索するため、末梢血中の10種類のmiRNAと標的遺伝子のmRNA発現量を調査した。qPCRを用いて、SYBR green法およびプローブ法を用いて、それぞれmiRNAおよびmRNAの発現を測定した。miRNAの標的遺伝子の同定には、インシリコ予測を使用した。HEK293細胞を用いたin vitro実験により、miR-15b-5pが予測された標的遺伝子（TGFBR3およびMYBL1）を修飾するかどうかを調査した。その結果、miR-15b-5pの発現は、発見コホートでは増加傾向を示し（p = 0.052）、複製コホートでは有意に増加した（p = 0.021）。インシリコ解析により、miR-15b-5pは細胞発生とWntシグナルに関連していることが明らかになった。TGFBR3およびMYBLの発現量の減少傾向は、これまでのRNA-seqデータと同様であった。miR-15b-5pはin vitroの実験でTGFBR3の発現をポジティブに制御していた。miR-15b-5pの発現量の増加は、ASD被験者の有用な診断マーカーとなる可能性があり、TGFBR3のmRNA発現を調節する可能性がある。これらの知見は、ASDの病態の理解において新たな視点を示すものである。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
抹消血で確認できた現象を、頬粘膜で実験したが、不純物が多く納得のいく結果は得られなかった。そこで、頬粘膜ではなく、末梢血を用いたバイオマーカー研究に切り替えた。
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| 今後の研究の推進方策 |
我々は自閉スペクトラム症者にアレルギー反応が多いことに着目し、機能的異常の有無を明らかにすることを目的とした。抹消血よりPBMC（Peripheral Blood Mononuclear Cells：単核細胞）を採取し、フローサイトメトリーにかけて単核細胞、特にNK cellの分布に差が出ないか調査する予定である。ASD群とControl群とでdefective NK cellの実際の機能に違いはないかを確認する目的である。また、フローサイトメトリーでdefective NK cellだけを抽出して、遺伝子情報を確認することで機能に差がないか調査を行う予定である。
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