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免疫系細胞とヒトiPSニューロン共培養系によるASDの病態解析

研究課題

研究課題/領域番号 22K07586
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分52030:精神神経科学関連
研究機関奈良県立医科大学

研究代表者

鳥塚 通弘  奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (20588529)

研究分担者 山室 和彦  奈良県立医科大学, 医学部, 学内講師 (60526721)
研究期間 (年度) 2022-04-01 – 2025-03-31
研究課題ステータス 交付 (2023年度)
配分額 *注記
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2023年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
キーワード自閉スペクトラム症 / マクロファージ / 炎症性サイトカイン / iPS細胞 / T細胞 / ヒトiPS細胞 / 炎症
研究開始時の研究の概要

ASDの病因・病態は未解明であるが、炎症反応の亢進と免疫系細胞の病態への関与が注目されている。申請者らのグループではASDで機能不全が疑われるマクロファージに着目して解析し、炎症性サイトカインであるTNF-αの発現上昇を見出した。さらに申請者は、マクロファージをヒトiPS細胞由来ニューロンと共培養する実験系で、ASD者のマクロファージは健常者のそれよりもニューロンに悪影響が大きいことを見出しているが、生体内ではこれら炎症反応やマクロファージ/マイクログリアの活性にCD4陽性T細胞の関与が注目されており、細胞培養系でこれら細胞の相互作用とその分子病態を明らかにし、治療薬になりうる薬剤を検索する。

研究実績の概要

健常者2名由来のiPS細胞株から分化誘導した興奮性ニューロンと、末梢血単核球から誘導したマクロファージの共培養系を用いた解析について、昨年度から定型発達者および自閉スペクトラム症患者、各群5名計10名から検体を得て解析を行ってきた。マクロファージのうち、GM-CSF誘導(いわゆるM1)マクロファージにおける炎症性サイトカインの発現と、同細胞がiPS細胞由来興奮性ニューロンの樹状突起を退縮させる効果について、自閉スペクトラム症群で有意に高いことを確認した。原因となる炎症性サイトカインについては、既報やqRT-PCRの結果からTNF-αとIL-1αが可能性が高いと考えた。これを確かめるべく、ニューロンへのリコンビナント蛋白質の添加実験や、共培養系への中和交代の投与実験を行い、この2種のサイトカインが主要因であることを確認した。ヒトiPS細胞から分化誘導した興奮性ニューロンにこれらサイトカインの受容体が発現していることも確認できた。これら結果については論文としてまとめ、成果としてMolecular Autism誌に投稿し、掲載された。
このように、自閉スペクトラム症におけるマクロファージ機能の変化について、もう一方の極性となるM-CSF誘導(いわゆるM2)型ではどうか、についても確かめるための実験を行っている。M-CSF誘導型は、栄養因子の放出や、貪食に関わることが知られている。マクロファージが脳内に入るわけではないと思われるが、精神疾患との関連を考える上で、上記iPS細胞から分化誘導したヒトニューロンを用いて、シナプス形成に与える影響を確認している。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

自閉スペクトラム症におけるマクロファージ機能の異常を見出す方向での研究は成果を得た。上流の分子や細胞の影響を検討する上でも、十分な細胞表現型の抽出は必須であるが、そこに資源を投入したため、他の血球系細胞の分離培養系の確立などは遅れた。

今後の研究の推進方策

マクロファージの解析は急ぐが、各群20名を目標にする。分離培養系の確立も順次進めていく。

報告書

(2件)
  • 2023 実施状況報告書
  • 2022 実施状況報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて 2024 2022

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (3件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] Granulocyte macrophage colony-stimulating factor-induced macrophages of individuals with autism spectrum disorder adversely affect neuronal dendrites through the secretion of pro-inflammatory cytokines2024

    • 著者名/発表者名
      Takada Ryohei、Toritsuka Michihiro、Yamauchi Takahira、Ishida Rio、Kayashima Yoshinori、Nishi Yuki、Ishikawa Mitsuru、Yamamuro Kazuhiko、Ikehara Minobu、Komori Takashi、Noriyama Yuki、Kamikawa Kohei、Saito Yasuhiko、Okano Hideyuki、Makinodan Manabu
    • 雑誌名

      Molecular Autism

      巻: 15 号: 1 ページ: 10-10

    • DOI

      10.1186/s13229-024-00589-2

    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 自閉スペクトラム症患者由来マクロファージにおける貪食能の評価2024

    • 著者名/発表者名
      西佑記、高田涼平、鳥塚通弘、石田理緒、萱島善徳、神川浩平、竹田奬、石川充、山内崇平、岡野栄之、牧之段学
    • 学会等名
      第45回日本生物学的精神医学会年会
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
  • [学会発表] ヒト細胞リソースを用いた精神疾患研究2022

    • 著者名/発表者名
      鳥塚通弘
    • 学会等名
      BPCNPNPPP4学会合同年会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] Cellular analysis of Autism Spectrum Disorder using co culture system of hiPSC derived neurons and macrophage s from patients2022

    • 著者名/発表者名
      Ryohei Takada 1 , Michihiro Toritsuka 1 Takahira Yamauchi 1 , Yoshinori Kayashima 1 , Rio Ishida 1 Yuki Nish i 1 Hiroaki Fukui 1 , Mitsuru Ishikawa 2 , Hideyuki Okano 2 , and Manabu Makinodan 1
    • 学会等名
      ISN-APSN meeting
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 国際学会

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公開日: 2022-04-19   更新日: 2024-12-25  

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