| 研究課題/領域番号 |
22K07755
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分52040:放射線科学関連
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| 研究機関 | 金沢医科大学 |
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研究代表者 |
渡邉 直人 金沢医科大学, 医学部, 教授 (40210926)
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| 研究分担者 |
岩淵 邦芳 金沢医科大学, 医学部, 教授 (10232696)
道合 万里子 富山大学, 学術研究部医学系, 講師 (40515673)
稲木 杏吏 金沢大学, 附属病院, 特任准教授 (40645131)
奥田 光一 弘前大学, 保健学研究科, 准教授 (60639938)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | DNA損傷 / 放射線性組織障害 / リンパ球 / γ-H2AX / 放射線組織障害 / ペプチド受容体放射性核種 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
ソマトスタチン受容体陽性の神経内分泌腫瘍に対するペプチド受容体放射性核種を用いた放射線内部照射治療の重大な副作用としてリンパ球の減少がある。治療によりリンパ球自体に直接どの程度の放射性組織障害性があるか詳細は充分には解明されていない。また、リンパ球減少に関連してリンパ球自体に起きうるアポトーシスの詳細は明らかではない。従って、リンパ球に対する染色体異常の検出及びDNA損傷部位に集積する蛋白質を用いた放射線組織障害の検討を行い、生物学的なリンパ球への照射量の推定が可能と考えられる。さらに、アポトーシス細胞のDNA断片をTUNEL法にて評価することで、リンパ球減少を早期に推定可能となる。
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| 研究実績の概要 |
ソマトスタチン受容体陽性の神経内分泌腫瘍に対するペプチド受容体放射性核種を用いた放射線内部照射治療では、様々な副作用が報告されてきた。特にリンパ球に関しては、血中数の一過性の減少を認めた報告は多い。ところが、治療に伴う生体内のリンパ球自体への影響である放射性組織障害に関する検討は限られており、特にリンパ球減少に着目した検討は見られない。ソマトスタチン受容体陽性の神経内分泌腫瘍に対するペプチド受容体放射性核種を用いた放射線内部照射治療について、血液の内で最も放射線感受性が高いと考えられているリンパ球に対して、DNA損傷としてどの程度の放射性組織障害が出現するのか、DNA損傷部位に集積することが知られているγ-H2AXを用いて基礎的に検討しようと考えた。同蛋白質に対する抗体で細胞の免疫染色を行うと、DNA損傷部位が核内の点として染色され、光学顕微鏡でDNA損傷の個数を数えることができる。これを用いて、治療前後の末梢血リンパ球に発生するDNA損傷数を定量する。基礎的検討として、正常者より血液中のリンパ球層を分離しリンパ球を得る。分離したリンパ球を3回PBSを用いて洗浄し、RPMI medium上で調整する。スライドグラス上に固定したリンパ球に、γ-H2AXに対する抗体で細胞の免疫染色を行い、DNA損傷部位が核内の点として染色され、蛍光顕微鏡にて解析、DNA損傷の個数を測定し検討する。正常者（６名）のリンパ球を分離してIn vitroでＣＴ装置（１２０kVp）により、Ｘ線外部照射する実験で、分離リンパ球にそれぞれ １０ｍGy, ２０ｍＧｙ，1Gy,を外部照射し、結果として外部照射してできるDNA損傷数と照射量との関係が傾向として直線関係として求められた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
基礎的検討にて、正常者のリンパ球をＸ線外部照射する実験で、結果として外部照射してできるDNA損傷数と照射量との関係が求められたことより、DNA損傷部位に集積することが知られているγ-H2AXを用いて基礎的にDNA損傷としてどの程度の放射性組織障害するかの検討が基本的に確立可能となった。しかし、ソマトスタチン受容体陽性の神経内分泌腫瘍に対するペプチド受容体放射性核種を用いた放射線内部照射治療について、当院では症例が得られていないため、臨床的評価には至っていないが、症例が得られ次第、評価することができる段階に至ったと言える。リンパ球に対して、放射線被ばくによりリンパ球に誘導された染色体異常を効率的に検出することが可能なPNA-FISH法により、染色体異常として二動原体染色体・環状染色体を定量化することには、依然として可能な段階には至っていない。
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| 今後の研究の推進方策 |
ソマトスタチン受容体陽性の神経内分泌腫瘍に対するペプチド受容体放射性核種を用いた放射線内部照射治療について、当院では症例が得られていないが、治療計画されることで、臨床的検討を進める予定である。既に、基礎的検討で確立された方法にて、追加して正常者に対して外部照射してできるDNA損傷数と照射量との関係をさらに解明する計画である。
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