| 研究課題/領域番号 |
22K07817
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分52050:胎児医学および小児成育学関連
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| 研究機関 | 富山大学 |
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研究代表者 |
守田 雅志 富山大学, 学術研究部薬学・和漢系, 准教授 (20191033)
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| 研究分担者 |
宗 孝紀 富山大学, 学術研究部薬学・和漢系, 教授 (60294964)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2024年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | 副腎白質ジストロフィー / ペルオキシソーム / 極長鎖脂肪酸 / CD4陽性T細胞 / ABCD1 / コレステロール代謝 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究計画は、副腎白質ジストロフィーの発症機構の解明を目的とする。本疾患は、ペルオキシソーム膜タンパク質ABCD1の機能欠損による極長鎖脂肪酸の異常蓄積が神経症状発症の原因と考えられている。しかし最近の知見から、発症の直接の原因は極長鎖脂肪酸蓄積ではなくコレステロール代謝障害による免疫応答の破綻がその本質である可能性が考えられる。本研究計画では、Tリンパ球のABCD1機能欠損による細胞内コレステロール代謝の障害が炎症応答の亢進を引き起こし、最終的に神経症状を発症するという機序を検証し、将来的に発症機構に基づいた発症抑制薬の開発に貢献する。
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| 研究実績の概要 |
本研究計画は副腎白質ジストロフィーの発症機構解明を目的としている。本疾患はペルオキシソーム膜ABCD1タンパク質の機能欠損を原因とする難治性の炎症性脱髄疾患で、炭素数22以上の極長鎖脂肪酸の異常蓄積が発症の原因と考えられているが、詳しい機序はわかっていない。本年度は昨年度に引き続き、コレステロール代謝障害による免疫応答の破綻が発症の原因であるという作業仮説に基づいて解析を行った。
Abcd1欠損マウスの脾臓から精製したナイーブCD4陽性T細胞をTh1分化誘導条件下で培養した結果、Abcd1欠損細胞でIFN-γの産生量が野生型に比べ高く、分化誘導後期になるとIL-10産生量が低い値を示した。分化誘導後期では転写因子Blimp-1をコードするPrdm1遺伝子の発現量がAbcd1欠損CD4陽性T細胞で顕著に低下し、また同時にLXRの活性化が認められた。Abcd1欠損CD4陽性T細胞のIL-10産生の減少とPrdm1遺伝子の発現減少はLXRアンタゴニスト処理により回復した。このことからAbcd1欠損細胞ではBlimp-1の発現がLXR活性化により抑制されていると考えられた。一方、25-hydroxycholesterolの生合成に関与するCh25h遺伝子の発現がAbcd1欠損細胞で有意に増加していた。以上のことからAbcd1欠損によるこれらサイトカイン産生の変動は25-hydroxycholesterolの増加に伴うLXR活性化によってBlimp-1の発現が抑制されていることに起因している可能性が考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
研究計画1年目ではAbcd1欠損CD4陽性T細胞のTh1エフェクター細胞への極性化が亢進していることを示し、2年目はAbcd1欠損によるコレステロール代謝異常がTh1細胞への極性化亢進の原因になっていることを、酸化ステロールの増加とT-betの発現を抑制する転写抑制因子Blimp-1との関連性に着目して解析する計画を立てた。しかし、Abcd1欠損CD4陽性T細胞のTh1分化誘導下でのIFN-g産生増加やIL-10産生減少を測定するための培養条件等を見直しを行った。そのためやや予定より遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
Abcd1欠損CD4陽性T細胞のTh1応答の亢進の機序について引き続きコレステロール代謝異常、特に25-hydroxycholesterolとの関連性について解析を行う。Abcd1欠損Th1細胞ではCh25h遺伝子の発現増加を確認しており、この遺伝子がコードする酵素による25-hydroxycholesterolの産生増加がIL-10産生減少に関与しているかについて解析を行う。GC-MS/MSによる25-hydroxycholesterolの定量やLXR活性化に伴うBlimp-1発現抑制についてイムノブロット法により解析を行う予定である。
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