| 研究課題/領域番号 |
22K07895
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分52050:胎児医学および小児成育学関連
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
戸澤 雄紀 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (30804950)
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| 研究分担者 |
吉田 英樹 京都工芸繊維大学, 応用生物学系, 准教授 (30570600)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
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| キーワード | 脊髄性筋萎縮症 / 神経筋接合部異常 / SMN / Lrp4 / BMP活性 / SMN非依存的治療 / 神経筋接合部 / BMPシグナル |
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| 研究開始時の研究の概要 |
脊髄性筋萎縮症（SMA）は、survival motor neuron1（SMN1）遺伝子のホモ欠失による脊髄運動神経細胞の変性・消失から筋萎縮と進行性筋力低下をきたす下位運動ニューロン病である。近年、SMAでは神経筋接合部の形成不全が末梢運動神経の変性に先立って起こっていることが報告されている。本研究は、このSMAの神経筋接合部形成不全を改善させ、運動神経を再支配させる治療ターゲットとしてBMPシグナルに着目し、そのregulatorであるLrp4がSMAの病態を改善させるSMN非依存的治療のターゲットになる可能性についてSMAモデルショウジョウバエを用いて検討する。
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| 研究実績の概要 |
本研究は、現行のSMN依存的な治療のみでは不十分な効果を補うために、新たにSMN非依存的な治療介入のターゲット分子としてBMPシグナルのregulatorであるLrp4に着目し、Lrp4の発現変動によるSMAにおける神経筋接合部異常や運動神経変性の治療効果について検討することを目的としている。今年度はSMAモデルショウジョウバエがSmnの機能喪失や発現量低下によって実際にどの程度の運動機能や生存率の低下、神経筋接合部の異常、BMP活性の低下（リン酸化Madの発現量の低下）が起こっているのか評価をするために、米国Indiana大学 Bloomington Drosophila Stock Centerと京都工芸繊維大学 Drosophila Stock Centerからloss of function変異を有するSMAショウジョウバエ（Smn73Ao, Smnf01109, Smnf05960）とSmn KD系統を複数入手した。最初にKD系統の幼虫のlocomotion assayで運動能の評価のために神経特異的にKDするelav-GAL4を使用したが、幼虫の段階ではコントールに比べて有意な運動機能の低下を認めず、現在成虫の運動機能（climbling assay)や異なるGAL4ドライバー（発生早期から神経特異的にKDさせるPros-GAL4,ユビキタスにKDさせる actin-GAL4）を用いて運動機能の評価を行なっている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
4月から研究開始予定であったが、研究に着手する人員の確保ができず研究開始時期が遅くなった。
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| 今後の研究の推進方策 |
神経特異的Smn KDによる幼虫や成虫の運動機能の低下やactin-GAL4を用いたKDの幼虫を用いたKD効率（RT-PCR)の評価ができれば、３齢幼虫の6, 7番の筋シナプスにおける神経筋接合部異常（シナプスボタンの数やシナプス長の評価）やBMP活性（幼虫期の腹側神経節でリン酸化Madの発現量）を評価する予定である。またSmn KDによるLrp4の発現変動の評価を行い、Lrp４強制発現による表現型やBMP活性の回復の評価を行う予定である。
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