肝線維化治療標的同定とそれに基づく新規抗肝線維化治療法開発

• 研究課題/領域番号: 22K08046
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分53010:消化器内科学関連
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 須田 剛生 北海道大学, 医学研究院, 講師 (20447460)
• 研究分担者: 坂本 直哉 北海道大学, 医学研究院, 教授 (10334418)
• 研究期間 (年度): 2022-04-01 – 2025-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2023年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2024年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
• キーワード: 肝線維化 / miRNA

研究開始時の研究の概要

肝線維化増悪、改善との関与を明らかにしてきたmiRNA、肝線維化進行の原因となるSASP化した老化細胞の維持に必須遺伝子に対するsiRNA を用いた排除, 線維化進展に伴っておこる不正angiogenesis の正常化による肝線維化改善効果を、肝特異的にmiRNA,siRNA を輸送可能である肝標的型MEND、抗体製剤を用いてpreclinical動物モデルで検証し、現在unmet medical needs である肝線維化に対する薬剤開発の基盤形成を目指し、臨床応用を目指す

研究実績の概要

研究代表者が肝線維化増悪、改善との関与を明らかにしてきたmiRNA , 肝線維化進行の原因となるSenescence-associated secretory phenotyp (SASP)化した老化細胞の維持に必須遺伝子に対するsiRNAを用いた排除,　線維化進展に伴っておこる不正angiogenesis の正常化による肝線維化改善効果を、肝特異的にmiRNA,siRNAを輸送可能である肝標的型MEND、抗体製剤を用いてpre-clinical 動物モデルで検証し、現在unmet medical needs である肝線維化に対する薬剤開発の基盤形成を目指し検討を行うものである。更に、また、NORTE study Groupの臨床研究より収集、蓄積した臨床情報と詳細に紐づけされた肝生検、血清検体を用いて肝線維化と関連する新規因子の同定を目指し、肝線維化に対する薬剤開発の基盤整備を目指す研究となる。今年度は、肝星細胞指向性のMENDを使用して、miR-Aを四塩化炭素肝線維化モデルマウスに投与し検討を行った。通常の肝細胞指向性のMENDに比して、強い肝線維化抑制効果を確認するとともに、培養ヒト肝星細胞を用いたin vitro の検討においても強い抗線維化作用を発揮しうることを明らかにした。更に、肝脂肪化線維化モデルマウス(STAMマウス)による検証実験を開始した。また、臨床検体の収集も進め肝生検にて診断されたMASLD肝線維化症例の肝組織、血清の収集を行い、今後血清中エクソソーム内miRNAを用いたmiRNA array, 血清サンプルのサイトカインアレイ, 肝生検検体を用いたRNA-sequencing、miRNA array を用いて網羅的な解析を行う基盤を整えた。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

動物モデルを用いた抗線維化治療を行えている為。

今後の研究の推進方策

NASH・HBV線維化進展・非進展例の臨床検体を用いた肝線維化促進・改善と関連する因子の同定：申請者らが中心となり、肝疾患の臨床研究・臨床検体収集を行う北海道大学関連病院からなる肝疾患臨床研究グループNORTE Study Groupにおいて、詳細な臨床情報と紐づいた臨床検体を用いて、etiology 特異的な肝線維化進展、改善と関連するmiRNA, サイトカイン、遺伝子を血清中エクソソーム内miRNAを用いたmiRNA array, 血清サンプルのサイトカインアレイ, 肝生検検体を用いたRNA-sequencing、miRNA array を用いて網羅的な解析を行い新規に同定する。同定し得た、肝線維化改善と関連するmiRNA,サイトカインによる線維化改善効果を上記のin vitro, in vivo モデルにより検討する。
肝線維化モデルマウスにおいて、siRNA-MEND を用いたSASP化老化細胞除去と肝線維化改善効果の検討：これまでの報告にて、肝老化細胞特異的に発現し、老化細胞の細胞死を抑制する因子（BRD4, HSP90,FOXO4およびGLS-1）を制御する事によりSASPした細胞を細胞死に誘導し、肝線維化が改善しうる可能性が報告されている。我々はこれらBRD4が肝線維化モデル化マウスに発現が上昇している事を確認した。BRD4, HSP90,FOXO4およびGLS-1は、SASP化した老化細胞以外での発現は低値でこれら遺伝子抑制は正常細胞への影響は小さい事が想定される。そこで、既にmiR-A MENDにて確立している肝特異的なRNA輸送システムを用いBRD4, HSP90,FOXO4およびGLS-1に対するsiRNAをsiRNA-MENDを用いて肝線維化モデルマウス（四塩化炭素モデル、NASHモデル）の肝に輸送しSASP細胞除去による肝線維化改善を検討する

研究成果

• [雑誌論文] Coexistence of muscle atrophy and high subcutaneous adipose tissue radiodensity predicts poor prognosis in hepatocellular carcinoma (2023)
  • 著者名/発表者名: Ohara Masatsugu、Suda Goki、Kohya Risako、Sasaki Takashi、Yoda Tomoka、Yoshida Sonoe、Fu Qingjie、Yang Zijian、Hosoda Shunichi、Maehara Osamu、Ohnishi Shunsuke、Tokuchi Yoshimasa、Kitagataya Takashi、Kawagishi Naoki、Nakai Masato、Sho Takuya、Natsuizaka Mitsuteru、Ogawa Koji、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Frontiers in Nutrition 巻: 10 ページ: 1-10
  • DOI: 10.3389/fnut.2023.1272728
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Posttreatment liver function, but not baseline liver function stratifies patient survival after direct-acting antiviral treatment in decompensated cirrhosis with hepatitis C virus (2023)
  • 著者名/発表者名: Tahata Yuki、Hikita Hayato、Suda Goki et al.,
  • 雑誌名: Journal of Gastroenterology 巻: 58 号: 12 ページ: 1211-1221
  • DOI: 10.1007/s00535-023-02039-x
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Sequential therapies after atezolizumab plus bevacizumab or lenvatinib first-line treatments in hepatocellular carcinoma patients (2023)
  • 著者名/発表者名: Persano Mara、Rimini Margherita、Tada Toshifumi、Suda Goki、Shimose Shigeo、Kudo Masatoshi、Cheon Jaekyung、Masi Gianluca、Yoo Changhoon、Lonardi Sara、Tovoli Francesco、Kumada Takashi、Sakamoto Naoya、Tamburini Emiliano、Cabibbo Giuseppe、Foschi Francesco Giuseppe、Scartozzi Mario、Casadei-Gardini Andrea
  • 雑誌名: European Journal of Cancer 巻: 189 ページ: 112933-112933
  • DOI: 10.1016/j.ejca.2023.05.021
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Recent prevalence and characteristics of patients with hepatitis delta virus in Hokkaido, Japan (2023)
  • 著者名/発表者名: Sasaki Takashi、Kawagishi Naoki、et.al.,
  • 雑誌名: Hepatology Research 巻: 53 号: 10 ページ: 960-967
  • DOI: 10.1111/hepr.13936
  • 査読あり
• [雑誌論文] Survival outcomes from atezolizumab plus bevacizumab versus Lenvatinib in Child Pugh B unresectable hepatocellular carcinoma patients (2023)
  • 著者名/発表者名: Rimini M, Persano M, Tada T, Suda G, Shimose S, Kudo M, Cheon J, Finkelmeier F, Lim HY, Presa J, Salani F, Lonardi S, Piscaglia F, Kumada T, Sakamoto N, Iwamoto H, Aoki T, Chon HJ, Himmelsbach V, Schirripa M, Montes M, Vivaldi C, Solda C, Hiraoka A, Sho T, Niizeki T, Nishida N, et al.
  • 雑誌名: Journal of Cancer Research and Clinical Oncology 巻: ー 号: 10 ページ: 7565-7577
  • DOI: 10.1007/s00432-023-04678-2
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Hepatitis C virus eradication by direct‐acting antivirals causes a simultaneous increase in the prevalence of fatty liver and hyper low‐density lipoprotein cholesterolemia without an increase in body weight (2023)
  • 著者名/発表者名: Tokuchi Yoshimasa、Sho Takuya et al.,
  • 雑誌名: Hepatology Research 巻: in press 号: 7 ページ: 595-606
  • DOI: 10.1111/hepr.13899
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum Angiopoietin-2 Predicts the Occurrence and Recurrence of Hepatocellular Carcinoma after Direct-Acting Antiviral Therapy for Hepatitis C (2023)
  • 著者名/発表者名: Kawagishi Naoki、Suda Goki、Yamamoto Yoshiya、Baba Masaru、Furuya Ken、Maehara Osamu、Ohnishi Shunsuke、Yoshida Sonoe、Fu Qingjie、Yang Zijian、Hosoda Shunichi、Tokuchi Yoshimasa、Kitagataya Takashi、Ohara Masatsugu、Suzuki Kazuharu、Nakai Masato、Sho Takuya、Natsuizaka Mitsuteru、Ogawa Koji、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Viruses 巻: 15 号: 1 ページ: 181-181
  • DOI: 10.3390/v15010181
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Prophylactic tenofovir alafenamide for hepatitis B virus reactivation and reactivation‐related hepatitis (2023)
  • 著者名/発表者名: Suda Goki、et al.,
  • 雑誌名: Journal of Medical Virology 巻: 95 号: 2
  • DOI: 10.1002/jmv.28452
  • 査読あり
• [雑誌論文] Atezolizumab plus bevacizumab versus lenvatinib for unresectable hepatocellular carcinoma: a large real-life worldwide population. (2022)
  • 著者名/発表者名: Casadei-Gardini A, Rimini M, Tada T, Suda G, Shimose S, Kudo M, Cheon J, Finkelmeier F, Lim HY, Rimassa L, Presa J, Masi G, Yoo C, Lonardi S, Tovoli F, Kumada T, Sakamoto N, Iwamoto H, Aoki T, Chon HJ, Himmelsbach V, Pressiani T, Montes M, Vivaldi C, Solda C, Piscaglia F, Hiraoka A, Nishida N, et al.
  • 雑誌名: European journal of cancer 巻: 180 ページ: 9-20
  • DOI: 10.1016/j.ejca.2022.11.017
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Serum IL-1β predicts de novo hepatitis B virus reactivation during direct-acting antiviral therapy for hepatitis C, not during anti-cancer/immunosuppressive therapy (2022)
  • 著者名/発表者名: Kawagishi Naoki、Suda Goki et al.,
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 12 号: 1
  • DOI: 10.1038/s41598-022-21315-z
  • 査読あり / オープンアクセス