| 研究課題/領域番号 |
22K08112
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 基金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 審査区分 |
小区分53020:循環器内科学関連
|
|---|
| 研究機関 | 順天堂大学 |
|---|
研究代表者 |
田中 君枝 順天堂大学, 医学部, 准教授 (30508065)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
|
| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2023年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
|
|---|
| キーワード | 動脈硬化 / 血管外膜 / 血管外膜微小血管 / 糖尿病性微小血管傷害 / 脂質異常症モデルマウス / 脂質異常症 / 糖尿病 / 機械的血管傷害モデル / 糖尿病性微小血管障害 / 動脈硬化病変 / マウスモデル |
|---|
| 研究開始時の研究の概要 |
血管外膜には、血管内腔から遠い外膜側を栄養する微小血管が存在する。動脈硬化病変では、増殖して血管壁に侵入し、炎症細胞や炎症を増強する因子を病変内に供給し、病変を悪化させると考えられている。糖尿病では網膜症などの微小血管障害が生じるが、微小血管の一種である血管外膜微小血管への影響は明らかでない。本研究では、糖尿病・脂質異常症合併モデルマウスを用いて、糖尿病が血管外膜微小血管に及ぼす影響を明らかにする。
|
| 研究実績の概要 |
動脈硬化病変や機械的血管傷害後に形成される新生内膜を持つ動脈の外膜では、微小血管の増生が生じることが知られている。また、糖尿病では、糖尿病性網膜症などの微小血管傷害が生じる。この研究では、野生型マウスおよび脂質異常症マウスを用い、糖尿病モデルマウス、糖尿病・脂質異常症合併モデルマウスを作成し、正常対照群、脂質異常症単独群、糖尿病単独群、糖尿病・脂質異常症合併群間で、自然発症動脈硬化病変および、機械的血管傷害手技により形成される新生内膜増殖病変における血管外膜微小血管形成の差異を観察することにより、糖尿病が体の他の部位の微小血管に及ぼす糖尿病性微小血管障害と同様に、血管外膜微小血管形成にも影響を及ぼすか、さらに、血管病変形成自体も影響を受けるかを検討する。C57BL/6(野生型)マウスおよび脂質異常症モデルマウス（ApoE欠損マウス）にストレプトゾトシン（膵臓のベータ細胞に毒性を持つ膵・消化管神経内分泌腫瘍の治療薬であり、動物実験用試薬として糖尿病モデル作成に用いられる）を投与し、糖尿病モデルマウスを作成した。野生型マウスに、既存の論文で2型糖尿病モデルマウス作成に最もよく用いられるストレプトゾトシン投与量を投与し、定期的に尾静脈から採血して血糖測定器で血糖を測定したが、想定する血糖上昇が認められなかった。次に、既存論文に報告されている別の量を試したが、こちらも想定する血糖上昇を得られず、投与量の検討が必要となった。検討の結果、ストレプトゾトシン投与4週間以降で、対照群に比べ血糖の上昇を認めるマウスを得て、投与後10週までの高血糖持続を確認した。また、長期飼育した対照群マウスから血管を採取して組織標本作成を行った。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
本研究を開始した2022年度途中まで新型コロナウイルス感染が拡大傾向にあり、感染した場合や濃厚接触者となった場合自宅待機となり、実験マウスに薬剤や特殊飼料を計画どおり投与できない可能性が懸念され、動物実験の開始時期が遅れた。ストレプトゾトシン腹腔内投与による糖尿病モデルマウス作成は、多くの論文で使用されている手技であるため、既存の論文の投与量を用いて実験を開始したが、想定する糖尿病モデルマウスが得られなかったため、投与量の検討が必要となった。そのため研究の進捗が当初予定より遅れている。
|
| 今後の研究の推進方策 |
2023年度に検討したストレプトゾトシン投与量を用い、野生型マウスおよび脂質異常症モデルマウスを用いた糖尿病モデルマウス作成を引き続き実施する。糖尿病モデル作成後経時的に、正常状態、脂質異常症単独、糖尿病単独および糖尿病・脂質異常症合併状態での自然発症動脈硬化病変の血管外膜微小血管形成を観察する。高齢（52週令程度）までの経時的な血糖測定器による血糖測定および血管サンプルの採取を行い、組織標本を作製する。また、同モデルマウスを用いて、機械的血管傷害により形成される血管病変の血管外膜微小血管を観察するため、機械的血管傷害作成手技を行い、血管サンプルを採取して組織標本作成を行う。
|
