| 研究課題/領域番号 |
22K08358
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分53040:腎臓内科学関連
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
安達 政隆 熊本大学, 病院, 准教授 (90398206)
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| 研究分担者 |
向山 政志 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 教授 (40270558)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
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| キーワード | セリンプロテアーゼ / 水利尿 / 水チャネル / バゾプレッシン / セリンプロテアーゼ阻害薬 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
SDラットにおいてセリンプロテアーゼ阻害薬メシル酸カモスタット(CM)を投与し、尿量や体重の変化、血液・尿生化学検査を施行し、尿濃縮に関連する血中および尿中各種パラメーターを調べ、CMの水利尿作用について検討する。SDラットにおいてCM投与による腎皮質集合尿細管での水チャネル(AQP)およびセリンプロテアーゼ(SP)の各種mRNA発現量を定量的に評価し、尿および尿exosome中のSP蛋白発現量について検討する。さらにトランスクリプトーム解析、プロテオーム解析を行い、尿濃縮に関与するSPの同定のみならず、新規と既知の転写産物ならびに蛋白を同定し、SPが関与する尿濃縮メカニズムについて検討する。
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| 研究実績の概要 |
Sprague-Dawley (SD)ラットにおける1-デアミノ-8-D-アルギニンバソプレッシン（DDAVP）投与下でのメシル酸カモスタット(CM)による腎組織および尿エクソソーム中の水チャネルAQP1～4の各種mRNAや蛋白発現および腎皮質集合尿細管のAQP2局在の変化について下記の通り検討した。
6週齢雄性SDラットを (1)コントロール群(n=4)と(2)DDAVP群（浸透圧ミニポンプを使用して20ng/hrの投与量で皮下注）(n=4)および(3)CM（2ペレット）+ DDAVP群 (n=4)の3群に分け、5日目に24時間蓄尿・採尿した後、血液と腎臓のサンプルを回収し、解析したところ、CMによる多尿と多飲はDDAVP投与により消失した。腎臓でのAQP2発現はDDAVP投与の2群で増加した。さらに、CMによる尿中エクソソームAQP2の減少は、DDAVPによりコントロール群と同程度まで回復した。このことから、CMはバソプレシンによるAQP2の活性化を障害しており、この作用はDDAVP負荷によりキャンセルされると考えられた。
現在、SDラットにおけるCM投与量の違いによる腎組織および尿エクソソーム中のAQP1～4の各種mRNAや蛋白発現および腎皮質集合尿細管のAQP2局在の変化について、6週齢雄性SDラットを (1)コントロール (n=4)、(2)CM 1 (1ペレット/ラット、30 mg/kg/日、n=4)、(3)CM 2 (2ペレット/ラット、60mg/kg/日、n=4)および(3)CM3 (3ペレット/ラット、90 mg/kg/日、n=4)の4群に分け、 0、1、3、5日目に蓄尿・採尿し、血液と腎臓のサンプルを得るために7日目にラットを屠殺し、検討している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
2023年度の研究計画通りに実験を遂行でき、結果についても解析できている。
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| 今後の研究の推進方策 |
現在の研究計画に基づいて実験ならびに結果解析を遂行する。
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