| 研究課題/領域番号 |
22K08384
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分53050:皮膚科学関連
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| 研究機関 | 大分大学 |
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研究代表者 |
寺林 健 大分大学, 医学部, 准教授 (40452429)
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| 研究分担者 |
橋本 悟 大分大学, 理工学部, 客員研究員 (60352150)
花田 克浩 大分大学, 医学部, 講師 (90581009)
石崎 敏理 大分大学, 医学部, 教授 (70293876)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2024年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | 慢性炎症性皮膚疾患 / 皮膚恒常性 / アクチン細胞骨格 / ROCK / 細胞接着 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究の目標はアトピー性皮膚炎に対する新規治療薬開発基盤構築にある。本研究課題においてはケラチノサイト恒常性維持機構を新規創薬基盤構築の候補として設定し、上述の学術的問いを検証するため、次のの3点を明らかにすることを目的とする。
①in vitro 培養系を用いたROCKによる接着依存シグナルの制御機構の解明
②in vivoにおけるROCK依存的接着依存シグナルの構成因子の同定
③in vivoにおけるROCK依存的接着依存シグナルが標的とする転写因子の同定
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| 研究実績の概要 |
アトピー性皮膚炎の発症・増悪化の要因の１つとなっているのが皮膚組織恒常性の喪失(バリア機能異常)である。角化細胞が形成するバリアは病原生物やアレルゲン、紫外線や機械的刺激などといった多くの外的刺激から生体を防御し、皮膚組織の恒常性を維持している。このことから、ケラチノサイトの細胞恒常性維持に関与するシグナル伝達の解明はその破綻が惹起するアトピー性皮膚炎の理解に大きく貢献するものである。これまでの先行研究において、申請者はセリン・スレオニンキナーゼROCKの喪失がマウスケラチノサイトの分化異常を誘導することを見出している。本研究課題では、ROCKによるケラチノサイト分化制御機構の解明を通じて、アトピー性皮膚炎に対する新規治療薬の開発基盤構築を目的とする。
今年度はリン酸化ペプチドプロファイリングによって同定されていた小胞体膜制御因子やタンパク質翻訳制御因子に対して解析を行った。これらの因子に関してはROCKは直接的にリン酸を行っておらず、それぞれの因子に対する既知の責任キナーゼの活性をROCKが制御していることが明らかになった。小胞体膜制御因子に関しては、リン酸化部位変異体の過剰発現によるものではあるが、リン酸化の喪失により小胞体への局在が減少し小胞体の形状が変化すること、さらにER-phagyが亢進することを見出している。
本年度得られた結果はROCKのER-phagyへの関与を示唆しており、アクチン細胞骨格を介した細胞間接着制御だけでなく、ROCKは様々な細胞内小器官の制御を通じてケラチノサイト恒常性を維持していると考えれる。
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| 現在までの達成度 |
現在までの達成度
3: やや遅れている
理由
本年度解析を進めた小胞体膜制御因子については、ROCKが制御するリン酸化部位に対する特異的抗体が市販されていなかったため、ROCKによるリン酸化制御の意義について迅速に解析を進めることが難しかった。特異的リン酸化抗体の作製を行ったものの、十分な抗体価を有する抗体を得られず研究計画に遅延が生じた。今年度で研究を終了する予定だったが、ケラチノサイトの恒常性維持機構を理解するうえで重要な知見が得られる可能性が残されてるため、次年度も継続して研究を進める予定である。
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| 今後の研究の推進方策 |
小胞体膜制御因子に対する特異的リン酸化抗体の再作製を進めている。この抗体を用いてケラチノサイト恒常性維持における小胞体膜制御因子のリン酸化の意義について明らかにしていきたい。また、ROCKがどのようにして小胞体膜制御因子に対するキナーゼの活性を制御しているかについても明らかにすることで、アトピー性皮膚炎をはじめとした炎症性皮膚疾患に対する治療戦略の構築について検討する予定である。
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