治癒を目指したCML幹細胞の特性解析

• 研究課題/領域番号: 22K08490
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分54010:血液および腫瘍内科学関連
• 研究機関: 近畿大学
• 研究代表者: 松村 到 近畿大学, 医学部, 教授 (00294083)
• 研究分担者: 田中 宏和 近畿大学, 医学部, 教授 (40360846) ; 口分田 貴裕 近畿大学, 医学部, 講師 (70580603) ; 森田 泰慶 近畿大学, 医学部, 准教授 (80411594)
• 研究期間 (年度): 2022-04-01 – 2025-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2023年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2024年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円); 2023年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2022年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: 慢性骨髄性白血病 / 微小残存病変 / 腫瘍免疫

研究開始時の研究の概要

慢性期の慢性骨髄性白血病(CML)の幹細胞はチロシンキナーゼ阻害薬（TKI）に抵抗性であり、深い寛解例における治療中止の妨げとなる。一方、TKI中止後にRQ-PCR法でBCR-ABL (B/A)が検出されない無再発例においても、DNA PCR法では検出され、これらの症例ではB/A DNAが未分化なCML細胞ではなくB, Tリンパ球に残存していると報告されているが、その由来や臨床的意義については明らかではない。本研究では、TKI投与中あるいは中止後に検出される微小残存B/A mRNAやDNAの由来を解析し、分子病態を明らかにする。また、CML幹細胞が残存している場合には、その特性を明らかにする。

研究実績の概要

本研究では、チロシンキナーゼ（TKI）投与中あるいは中止後の慢性骨髄性白血病(CML)症例に検出される微小残存BCR-ABL mRNAやDNAの由来を解析することで、より適切なモニタリングや治療方針の決定のための分子病態を明らかにする。また、CML幹細胞が残存している場合には、その特性を明らかにし、新たな治療法の開発につなげることを目的としている。
昨年度は申請者らが同定したCML幹細胞集団（CD34+38-120a+225+細胞, LSC)および正常造血幹細胞集団(CD34+38-120a-225-, HSC)における抗腫瘍免疫に関わる免疫チェックポイント分子の発現を網羅的に比較した結果、CD274 (PDL1)の他, CD155 (TIGIT), CD270 (TNFSFR14), GAL9等の抗腫瘍免疫の抑制性分子の発現が、HSCと比較してLSCにおいて有意に高いことを見出した。本年度は、同一症例から純化した細胞傷害性T細胞（CTL）における上記抑制分子と相互作用のある分子の発現解析、並びにこれら分子の発現の生物学的意義について検討を行なった。初発CML症例の骨髄中のCTLでは、一部の抑制性分子と相互作用のある分子の発現が、健常人と比較して有意に高いことを見出した。さらに、LSC同様に初発時よりもTKI投与中に、よりそれら分子の発現を強く認めた。また、CML症例の骨髄より同時に得たLSCとCTLをIL2存在下で共培養した場合のCTLから産生されるサイトカインを網羅的に解析した。その結果、免疫チェックポイント分子に対する中和抗体を培地に添加することでIFNγをはじめとする種々サイトカインの産生抑制が解除された。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本年度は、生体内に残存するCML幹細胞の抗腫瘍免疫回避機構について、CML幹細胞集団に発現する免疫チェックポイント分子の生物学的意義について解析を行なった。その結果、LSCだけでなく、CTLに発現する免疫チェックポイント分子は、TKI投与により発現が上昇しており、TKI投与中の生体内でのLSC維持に強く関わっている可能性が示唆された。さらに一部の分子では、中和抗体によりCTLに対するサイトカイン産生における抑制効果が解除されることから、TKIと併用することでLSCを生体内で駆逐できる可能性が示唆された。
我々の研究を通して、抗腫瘍免疫を標的としたCMLに対する治療戦略として、TKIと複数の免疫チェックポイント分子に対する阻害薬を併用することの有用性、さらに免疫チェックポイント分子の発現制御機構の解明の重要性が示唆されたことから、ほぼ当初の目標通りに研究を遂行できていると考えられる。

今後の研究の推進方策

現在、TKI投与後残存しているLSCを用いてトランスクリプトーム解析を実施しており、HSCと比較することでその特性につき解析する。さらに令和6年度は、TKI投与中あるいは中止後のCML症例に検出される微小残存BCR-ABL mRNAやDNAがCML幹細胞に由来するものか、寿命の長いBリンパ球やTリンパ球に発現するものかを明らかにする。また、CML幹細胞におけるCD120a/NF-κB経路の役割、免疫チェックポイント分子の発現制御機構、IDO1の発現変化についての解析も行い、抗腫瘍免疫を介したCML幹細胞を駆逐するための新規治療法の開発を目指す。

研究成果

• [雑誌論文] Real-world data of MDS and CMML in Japan: results of JALSG clinical observational study-11 (JALSG-CS-11) (2023)
  • 著者名/発表者名: Usuki Kensuke、Ohtake Shigeki、Honda Sumihisa、Kojima Kensuke、Kiyoi Hitoshi、et al
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 119 号: 2 ページ: 130-145
  • DOI: 10.1007/s12185-023-03686-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of cytogenetic abnormalities in symptomatic multiple myeloma; a Japanese real-world analysis from Kansai Myeloma Forum (2023)
  • 著者名/発表者名: NakayaA,ShibayamaH,UoshimaN,YamamuraR,YoshiokaS,ImadaK,ShimuraY,HottaM,MatsuiT,KosugiS,HanamotoH,UchiyamaH,YoshiharaS,FuchidaSI,OndaY,TanakaY,OhtaK,MatsudaM,KandaJ,YokoA,KiyotaM,KawataE,TakahashiR,FukushimaK,TanakaH,YagiH,TakakuwaT,HosenN,ItoT,ShimazakiC,Takaori-KondoA,KurodaJ,MatsumuraI,HinoM.
  • 雑誌名: Leukemia Research Reports 巻: 20 ページ: 100395-100395
  • DOI: 10.1016/j.lrr.2023.100395
  • 査読あり
• [雑誌論文] Real-world data of AML in Japan: results of JALSG clinical observational study-11 (JALSG-CS-11) (2023)
  • 著者名/発表者名: Usuki Kensuke、Ohtake Shigeki、Honda Sumihisa、Kojima Kensuke、Miyazaki Yasushi、et al
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 119 号: 1 ページ: 24-38
  • DOI: 10.1007/s12185-023-03677-w
  • 査読あり
• [雑誌論文] High-risk Combinations of Additional Chromosomal Abnormalities in Philadelphia Chromosome-positive Acute Lymphoblastic Leukemia: JALSG Ph+ALL TKI-SCT Study (2023)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa N, Ishiyama K, Usuki K, Takada S, Tomikawa T, Handa H, Katsuoka Y, Hirano D, Sezaki N, Sumi M, Fujisawa S, Taniguchi Y, Mugitani A, Yoshimura T, Ohtsuka E, Takase K, Suehiro Y, Ota S, Kajiguchi T, Maeda T, Yamamoto M, Ohtake S, Katsumi A, Kiyoi H, Matsumura I, Miyazaki Y.
  • 雑誌名: HemaSphere 巻: 7 号: 6 ページ: e899-e899
  • DOI: 10.1097/hs9.0000000000000899
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Nelarabine, intensive L-asparaginase, and protracted intrathecal therapy for newly diagnosed T-cell acute lymphoblastic leukaemia in children and young adults (ALL-T11): a nationwide, multicenter, phase 2 trial including randomisation in the very high-risk group (2023)
  • 著者名/発表者名: Sato Atsushi、Hatta Yoshihiro、Imai Chihaya、Oshima Koichi、Okamoto Yasuhiro、Deguchi Takao、Hashii Yoshiko、Fukushima Takashi、Hori Toshinori、Kiyokawa Nobutaka、Kato Motohiro、Saito Shoji、Anami Kenichi、Sakamoto Tatsuhiro、Kosaka Yoshiyuki、Suenobu Souichi、et al.
  • 雑誌名: The Lancet Haematology 巻: 10 号: 6 ページ: e419-e432
  • DOI: 10.1016/s2352-3026(23)00072-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] EBF1-JAK2 inhibits the PAX5 function through physical interaction with PAX5 and kinase activity. (2023)
  • 著者名/発表者名: Kojima Y, Kawashima F, Yasuda T, et al.
  • 雑誌名: Int J Hematol. 巻: in press 号: 1 ページ: 65-74
  • DOI: 10.1007/s12185-023-03585-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term effectiveness and safety of high dose chemotherapy followed by autologous stem cell transplantation in daily practice in patients with diffuse large B-cell lymphoma (2023)
  • 著者名/発表者名: Haeno Takahiro、Rai Shinya、Miyake Yoshiaki、Inoue Maiko、Fujimoto Ko、Fujii Aki、Iwata Yoshio、Minamoto Shuji、Taniguchi Takahide、Kakutani Hiroaki、Inoue Hiroaki、Kumode Takahiro、Serizawa Kentaro、Taniguchi Yasuhiro、Hirase Chikara、Morita Yasuyoshi、Tanaka Hirokazu、Tatsumi Yoichi、Ashida Takashi、Matsumura Itaru
  • 雑誌名: Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｈｅｍａｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ 巻: 63 号: 2 ページ: 99-107
  • DOI: 10.3960/jslrt.23001
  • ISSN: 1346-4280, 1880-9952
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chlorpromazine cooperatively induces apoptosis with tyrosine kinase inhibitors in EGFR-mutated lung cancer cell lines and restores the sensitivity to gefitinib in T790M-harboring resistant cells (2022)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara Ryosuke、Taniguchi Yasuhiro、Rai Shinya、Iwata Yoshio、Fujii Aki、Fujimoto Ko、Kumode Takahiro、Serizawa Kentaro、Morita Yasuyoshi、Espinoza J. Luis、Tanaka Hirokazu、Hanamoto Hitoshi、Matsumura Itaru
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 626 ページ: 156-166
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2022.08.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bosutinib in Japanese patients with newly diagnosed chronic-phase chronic myeloid leukemia: final 3-year follow-up results of a phase 2 study (2022)
  • 著者名/発表者名: Ono Takaaki、Hino Masayuki、Matsumura Itaru、Fujisawa Shin、Ishizawa Kenichi、Sakaida Emiko、Sekiguchi Naohiro、Ono Chiho、Aizawa Mana、Tanetsugu Yusuke、Koide Yuichiro、Takahashi Naoto
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 116 号: 6 ページ: 871-882
  • DOI: 10.1007/s12185-022-03435-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Decision Analysis for Unrelated Bone Marrow Transplantation or Immediate Cord Blood Transplantation for Patients with Philadelphia Chromosome-Negative Acute Lymphoblastic Leukemia in First Complete Remission (2022)
  • 著者名/発表者名: Kako S, Hayakawa F, Miyamura K, Tanaka J, Imai K, Kanda J, Morishima S, Uchida N, Doki N, Ikegame K, Ozawa Y, Takada S, Usui N, Ohtake S, Kiyoi H, Matsumura I, Miyazaki Y, Ichinohe T, Fukuda T, Atsuta Y, Kanda Y.
  • 雑誌名: Transplantation and Cellular Therapy 巻: 28 号: 3 ページ: 161.e1-161.e10
  • DOI: 10.1016/j.jtct.2021.11.021
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical outcomes of second‐generation tyrosine kinase inhibitors versus imatinib in older patients with CML (2022)
  • 著者名/発表者名: Ono Takaaki、Takahashi Naoto、Kizaki Masahiro、Kawaguchi Tatsuya、Suzuki Ritsuro、Yamamoto Kazuhito、Ohnishi Kazunori、Naoe Tomoki、Matsumura Itaru
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 114 号: 3 ページ: 995-1006
  • DOI: 10.1111/cas.15642
  • 査読あり
• [雑誌論文] Two novel high-risk adult B-cell acute lymphoblastic leukemia subtypes with high expression of CDX2and IDH1/2 mutations (2022)
  • 著者名/発表者名: Yasuda Takahiko、Ogawa Seishi, et al.
  • 雑誌名: Blood 巻: 139 号: 12 ページ: 1850-1862
  • DOI: 10.1182/blood.2021011921
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] CD34+ myeloma cells with self-renewal activities are therapy-resistant and persist as MRD in cell cycle quiescence. (2022)
  • 著者名/発表者名: Serizawa K; Tanaka H; Ueda T; Fukui A; Kakutani H; Taniguchi T; Inoue H; Kumode T; Taniguchi Y; Rai S; Hirase C; Morita Y; Espinoza JL; Tatsumi Y; Ashida T; Matsumura I
  • 雑誌名: Int J Hematol. 巻: 115 号: 3 ページ: 336-349
  • DOI: 10.1007/s12185-021-03261-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] C-type lectin-like receptor 2 specifies a functionally distinct subpopulation within phenotypically defined hematopoietic stem cell population that contribute to emergent megakaryopoiesis (2022)
  • 著者名/発表者名: Kumode Takahiro、Tanaka Hirokazu、Esipinoza Jorge Luis、Rai Shinya、Taniguchi Yasuhiro、Fujiwara Ryosuke、Sano Keigo、Serizawa Kentaro、Iwata Yoshio、Morita Yasuyoshi、Matsumura Itaru
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 115 号: 3 ページ: 310-321
  • DOI: 10.1007/s12185-021-03220-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional inhibition of MEF2 by C/EBP is a possible mechanism of leukemia development by <i>CEBP‐IGH</i> fusion gene (2022)
  • 著者名/発表者名: Odaira Koya、Yasuda Takahiko、Okada Kentaro、Shimooka Takuya、Kojima Yukino、Noura Mina、Tamura Shogo、Kurahashi Shingo、Iwamoto Eisuke、Sanada Masashi、Matsumura Itaru、Miyazaki Yasushi、Kojima Tetsuhito、Kiyoi Hitoshi、Tsuzuki Shinobu、Hayakawa Fumihiko
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 114 号: 3 ページ: 781-792
  • DOI: 10.1111/cas.15641
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] PV、ETの治療と血栓、出血イベント発症との関連性の検討；JSH-MPN-R18の二次分析 (2023)
  • 著者名/発表者名: 大矢 瑛子、永春 圭規,、杉本 由香、大石 晃嗣、俵 功、伊藤 量基、後藤 明彦、中前 美佳、木村 文彦、 小池 通明、桐戸 敬太、和田 秀穂、臼杵 憲祐、田中 孝幸、森 毅彦、脇田 知志、齋藤 俊樹、 嘉田 晃子、齋藤 明子、下田 和哉、黒川 敏郎、枝廣 陽子、橋本 由徳、清井 仁、赤司 浩一、 松村 到、竹中 克斗、小松 則夫
  • 学会等名: 第85回日本血液学会学術集会
• [学会発表] JSH-MPN-R18データを用いた血栓症リスク因子の検索 (2023)
  • 著者名/発表者名: 永春 圭規、大矢 瑛子、杉本 由香、大石 晃嗣、俵 功、伊藤 量基、後藤 明彦、中前 美佳、木村 文彦、小池 道明、桐戸 敬太、和田 秀穂、臼杵 憲祐、田中 孝幸、森 毅彦、脇田 知志、齋藤 俊樹、嘉田 晃子 、齋藤 明子、下田 和哉、黒川 敏郎、冨田 章裕、枝廣 陽子、橋本 由徳、清井 仁、赤司 浩一、松村 到、竹中 克斗、小松 則夫
  • 学会等名: 第85回日本血液学会学術集会
• [学会発表] 日本のAYA世代の真性多血症と本態性血小板血症の臨床的特徴；JSH-MPN-R18の二次分析研究 (2023)
  • 著者名/発表者名: 永春 圭規、大矢 瑛子、大石 晃嗣、俵 功、伊藤 量基、後藤 明彦、中前 美佳、木村 文彦、小池 道明、桐戸 敬太、和田 秀穂、臼杵 憲祐、田中 孝幸、森 毅彦、脇田 知志、齋藤 俊樹、嘉田 晃子 、齋藤 明子、下田 和哉、黒川 敏郎、冨田 章裕、枝廣 陽子、橋本 由徳、清井 仁、赤司 浩一、松村 到、竹中 克斗、小松 則夫
  • 学会等名: 第85回日本血液学会学術集会
• [学会発表] ネララビン併用化学療法による治療成績改善と重篤な神経障害：JALSG T-ALL213-O (2023)
  • 著者名/発表者名: 早川 文彦、森 直樹、今井 俊陽、横山 泰久、勝岡 優奈、齋藤 健、村山 徹、山崎 悦子、佐藤 信也、熱田 由子、石川 裕一、八田 善弘、清井 仁、松村 到、宮崎 泰司
  • 学会等名: 第85回日本血液学会学術集会
• [学会発表] ALL-T11/T-ALL-211-U研究のAYA世代症例における血液内科と小児血液科登録例の予後 (2023)
  • 著者名/発表者名: 八田 善弘、佐藤 篤、嘉田 晃子、齋藤 明子、早川 文彦、山崎 悦子、村山 徹、森 直樹、齋藤 健、坂本 竜弘 、清水 義文、諫田 淳也、大西 康、飯塚 和秀、淺田 騰、西山 誉大、田中 正嗣、吉村 卓朗 、岡本 康裕、今井 千速、大嶋 宏一、康 勝好、真部 淳、堀部 敬三、清井 仁、松村 到、宮崎 泰司
  • 学会等名: 第85回日本血液学会学術集会
• [学会発表] ダラツムマブ治療後にエロツズマブの効果は低下する：関西骨髄腫フォーラムデータベースによる後方視的解析 (2023)
  • 著者名/発表者名: 中村 直和、有馬靖佳、高桑輝人、吉岡聡、今田和典、福島健太郎、堀田雅章、淵田真一、 諫田淳也、魚嶋伸彦、志村勇司、田中宏和、太田健介、小杉智、八木秀男、吉原哲、山村亮介、足立陽子、花本仁、柴山浩彦、保仙直毅、伊藤量基、島崎千尋、高折晃史、黒田純也、松村到、日野雅之
  • 学会等名: 第85回日本血液学会学術集会
• [学会発表] TFRバイオマーカーとしてのTregの変化 (2023)
  • 著者名/発表者名: 藤岡 優樹、高橋 直人、小野 孝明、南 陽介、松村 到
  • 学会等名: 第85回日本血液学会学術集会
• [学会発表] 非重症再生不良性貧血に対するシクロスポリン療法の有用性に関する検討 (2023)
  • 著者名/発表者名: 山口 博樹、石山 謙、山崎 雅英、丸山 裕之、細野 奈穂子、臼杵 憲祐、谷本 一樹、杉浦 弘幸、淺田 騰、吉村 健一、小川 誠司、金倉 譲、松村 到、赤司 浩一、中尾 眞二
  • 学会等名: 第85回日本血液学会学術集会
• [学会発表] 日本における血液疾患患者を対象とするCOVID-19罹患状況、予後に関する横断研究 (2023)
  • 著者名/発表者名: 皆方 大佑、内田 智之、仲野 彩、高瀬 謙、塚田 和佳、小杉 浩史、河田 英里、中根 孝彦、高橋 寛行、遠藤 知之、西脇 聡史、藤原 英晃、齋藤 明子、齋藤 俊樹、赤司 浩一、松村 到、三谷 絹子
  • 学会等名: 第85回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Immune analyses of each TKI discontinuation trials leads the differences of immune induction ability (2022)
  • 著者名/発表者名: 高橋 直人、西川 博嘉、大竹 茂樹、熱田 由子、南 陽介、入山 規良、清井 仁、宮崎 泰司、松村 到
  • 学会等名: 第84日本血液学会学術集会
• [学会発表] The clinical outcomes and usefulness of new regimens predicted by simplified frailty scale in RRMM (2022)
  • 著者名/発表者名: 田中 宏和、三宅 義昭、波江野 高大、井上 舞子、藤本 昂、藤井 晶、角谷 宏明、源 周治、口分田 貴裕、谷口 康博、森田 泰慶、辰巳 陽一、芦田 隆司、松村 到
  • 学会等名: 第84日本血液学会学術集会