| 研究課題/領域番号 |
22K08582
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分54030:感染症内科学関連
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
中田 浩智 熊本大学, 病院, 准教授 (40628492)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2024年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2022年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
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| キーワード | HIV / HIV薬 / ケモカイン受容体 / 多量体形成 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
HIVのコレセプターであるケモカイン受容体について、その多量体形成に重要な部位を同定し、ケモカイン受容体の多量体形成がHIVの感染性に与える影響を調べる。最終的にはケモカイン受容体の多量体形成を介してHIV感染を阻害する薬剤の開発を行う。
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| 研究実績の概要 |
CXCR4に多量体形成に影響を与える可能性がある部位を同定し、それらの部位にアミノ酸変異を単独～複数導入し、変異CXCR4発現プラスミドの作成を行った。それらの変異CXCR4により多量体形成がどのように変化するかをCXCR4に蛍光色素を結合させることでFluorescence Resonance Energy Transfer (FRET)で評価したり、CXCR4にHISタグなどを結合させウエスタン・ブロッテイング法を用いて評価するなどしている。また、野生株及び変異CXCR4に対して、すでにケモカイン受容体への影響が報告されているCXCL-12などのケモカインやAMD-3100などの低分子化合物を作用させ、多量体形成やケモカイン受容体のシグナル伝達にどのように影響するかについても評価している。
同時にこれらの変異CXCR4のHIV感染性についても変異CXCR4を発現させた細胞へのHIVを用いた直接的な感染実験の他、CD4-CXCR4発現させた標的細胞に対し、gp120・TATなどを発現させたエフェクター細胞を反応させるfusion assayなどの手法を用いて評価を行っている。上述の結果と合わせて、ケモカイン受容体の多量体形成がHIV感染に阻害的に働く可能性を見出しているが、更なる検証が必要である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
COVID感染の流行により、COVID感染に対する診療及び研究での対応が必要になり、本課題への時間的な制約があったことに加え、技術的にFRETやWBの実験での難航により本研究の進展が遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
変異CXCR4を用いた多量体形成への影響およびHIV感染性への影響を繰り返し検証するとともに、多量体形成への影響により、HIV感染にも強く影響を与える部位を同定していく。コンピューターモデリングにより、これらの部位に結合を化合物のスクリーングを行い、新規作用機序を有数抗HIV薬の開発を進めていく。
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