膵がんメチオームマーカーとしてのNNMT代謝物の有効性

• 研究課題/領域番号: 22K08773
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分55020:消化器外科学関連
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 千々松 良太 岡山大学, 大学病院, 客員研究員 (60803210)
• 研究分担者: 堤 康一郎 岡山大学, 大学病院, 助教 (40610910) ; 石井 秀始 大阪大学, 大学院医学系研究科, 特任教授(常勤) (10280736)
• 研究期間 (年度): 2022-04-01 – 2025-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2024年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2024年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
• キーワード: 膵癌 / NNMT / acinar-ductal metaplasia / メチル基転移 / エピジェネティクス / 膵腺房 / ADM / メチル化 / シングルセル解析 / 膵がん / 間質

研究開始時の研究の概要

多くの癌種では正常細胞と異なったメチル化修飾状態を持ち、癌の代謝/成長を支持している。メチル化修飾を受ける標的としてはDNA/RNAなどの核酸、ヒストンなどのタンパク質、ポリアミンなど多岐にわたる。ニコチンアミドはNicotinamide N-methyltransferase (NNMT)により不可逆的なメチル化修飾を受け、生成された1-methylnicotinamide (1-MNA)を細胞外に排出することで細胞内のメチル基レベルを調節している。本研究ではNNMTの治療標的としての可能性およびNNMT代謝物のバイオマーカーとしての有用性を明らかにする。

研究実績の概要

本研究は、膵がん進展および腫瘍微小環境におけるエピジェネティック制御機構としてNNMTの役割解明を目的としている。解析には免疫組織化学染色、qPCR、免疫蛍光染色、ex vivo ADM誘導モデル、細胞株を用いた過剰発現／阻害実験といった多様な手法を組み合わせた。NNMTは申請者が報告した膵癌シングルセルRNA-seqアトラス解析から探索した分子で、腫瘍細胞、CAF、腫瘍血管内皮細胞で高発現が確認されていた。
本年度は、ヒト膵癌病理標本100例を対象に免疫組織化学染色を実施し、CAFでは一様にNNMT高発現を認めた一方、腫瘍細胞では症例間・症例内で発現頻度に大きなばらつきを観察し、acinar-ductal metaplasia（ADM）領域でNNMT陽性細胞の増加を示した。さらに、マウス初代腺房細胞およびヒト由来ADMモデルでqPCRおよび免疫蛍光染色によりNNMT発現がDay 4で顕著に上昇することを立証し、ex vivo培養ADMモデルにおけるNNMT阻害剤処理でADM形成が抑制傾向を示した。
また、266-6およびPSC細胞株でのNNMT過剰発現や阻害剤処理がヒストンH3のメチル化状態を変動させることを示し、エピジェネティック制御への寄与を実証した。これらの成果は、ADMに伴うエピジェネティックリモデリングとメチル基動態へのNNMT関与を強く示唆し、NNMTを標的とした診断・治療戦略構築の基盤データとなった。さらに、本研究で確立した手法と知見は、ChIP-seqやATAC-seqを用いた詳細なエピゲノム解析およびLC-MS/MSを利用した血漿・尿中NNMT代謝物のバイオマーカー評価へと発展させるための基盤を構築した。

研究成果

• [雑誌論文] Single-cell and spatial characterization of plasmablast-like lymphoma cells in primary central nervous system lymphoma (2025)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi Hiroki、Chijimatsu Ryota、Naoi Yusuke、Otani Yoshihiro、Mizuta Ryo、Fujii Kentaro、Ishida Joji、Murakami Hiroyuki、Ujiie Hideki、Ikeuchi Kazuhiro、Urata Tomohiro、Seike Keisuke、Fujiwara Hideaki、Asada Noboru、Fujii Nobuharu、Matsuoka Ken-ichi、Sato Yasuharu、Maeda Yoshinobu、Ennishi Daisuke
  • 雑誌名: Blood Neoplasia 巻: 2 号: 1 ページ: 100058-100058
  • DOI: 10.1016/j.bneo.2024.100058
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] CD34hi subset of synovial fibroblasts contributes to fibrotic phenotype of human knee osteoarthritis (2025)
  • 著者名/発表者名: Miyahara J、Omata Y、Chijimatsu R、Okada H、Ishikura H、Higuchi J、Tachibana N、Nagata K、Tani S、Kono K、Kawaguchi K、Yamagami R、Inui H、Taketomi S、Iwanaga Y、Terashima A、Yano F、Seki M、Suzuki Y、Baron R、Tanaka S、Saito T
  • 雑誌名: JCI Insight 巻: 10 号: 2
  • DOI: 10.1172/jci.insight.183690
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Transcriptome analysis of the cytokine storm-related genes among the subtypes of idiopathic multicentric Castleman disease (2024)
  • 著者名/発表者名: Nishikori Asami、Nishimura Midori Filiz、Tomida Shuta、Chijimatsu Ryota、Ueta Himawari、Lai You Cheng、Kawahara Yuri、Takeda Yudai、Ochi Sayaka、Haratake Tomoka、Ennishi Daisuke、Nakamura Naoya、Momose Shuji、Sato Yasuharu
  • 雑誌名: Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｈｅｍａｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ 巻: 64 号: 4 ページ: 297-306
  • DOI: 10.3960/jslrt.24061
  • ISSN: 1346-4280, 1880-9952
  • 年月日: 2024-10-28
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Baricitinib ameliorates inflammatory and neuropathic pain in collagen antibody-induced arthritis mice by modulating the IL-6/JAK/STAT3 pathway and CSF-1 expression in dorsal root ganglion neurons (2024)
  • 著者名/発表者名: Makabe Kenta、Okada Hiroyuki、Tachibana Naohiro、Ishikura Hisatoshi、Ito Norihito、Tanaka Masaru、Chijimatsu Ryota、Terashima Asuka、Yano Fumiko、Asaka Meiko、Yanagihara Dai、Taketomi Shuji、Matsumoto Takumi、Tanaka Sakae、Omata Yasunori、Saito Taku
  • 雑誌名: Arthritis Research & Therapy 巻: 26 号: 1 ページ: 121-121
  • DOI: 10.1186/s13075-024-03354-1
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Disulfiram ameliorates bone loss in ovariectomized mice by suppressing osteoclastogenesis (2024)
  • 著者名/発表者名: Fukui Tatsuyuki、Terashima Asuka、Omata Yasunori、Chijimatsu Ryota、Okamoto Kazuo、Tsukasaki Masayuki、Fukuda Yukiko、Hayata Tadayoshi、Saitoh Akiyoshi、Toda Etsuko、Takayanagi Hiroshi、Tanaka Sakae、Terashima Yuya、Saito Taku
  • 雑誌名: Journal of Bone and Mineral Metabolism 巻: 43 号: 2 ページ: 61-73
  • DOI: 10.1007/s00774-024-01555-x
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Aging and cell expansion enhance microRNA diversity in small extracellular vesicles produced from human adipose-derived stem cells (2024)
  • 著者名/発表者名: Tsubaki Toshiya、Chijimatsu Ryota、Takeda Taiga、Abe Maki、Ochiya Takahiro、Tsuji Shinsaku、Inoue Keita、Matsuzaki Tokio、Iwanaga Yasuhide、Omata Yasunori、Tanaka Sakae、Saito Taku
  • 雑誌名: Cytotechnology 巻: 77 号: 1 ページ: 15-15
  • DOI: 10.1007/s10616-024-00675-6
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] MicroRNA-34a-5p: A pivotal therapeutic target in gallbladder cancer (2024)
  • 著者名/発表者名: Oda Takashi、Tsutsumi Koichiro、Obata Taisuke、Ueta Eijiro、Kikuchi Tatsuya、Ako Soichiro、Fujii Yuki、Yamazaki Tatsuhiro、Uchida Daisuke、Matsumoto Kazuyuki、Horiguchi Shigeru、Kato Hironari、Okada Hiroyuki、Chijimatsu Ryota、Otsuka Motoyuki
  • 雑誌名: Molecular Therapy: Oncology 巻: 32 号: 1 ページ: 200765-200765
  • DOI: 10.1016/j.omton.2024.200765
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Therapeutic Potential of Bromodomain and Extra-Terminal Domain Inhibitors for Synovial Sarcoma Cells (2024)
  • 著者名/発表者名: Kotani Yuki、Imura Yoshinori、Nakai Sho、Chijimatsu Ryota、Takami Haruna、Inoue Akitomo、Mae Hirokazu、Takenaka Satoshi、Outani Hidetatsu、Okada Seiji
  • 雑誌名: Cancers 巻: 16 号: 6 ページ: 1125-1125
  • DOI: 10.3390/cancers16061125
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Repair of osteochondral defects: efficacy of a tissue-engineered hybrid implant containing both human MSC and human iPSC-cartilaginous particles (2023)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa Shinichi、Ando Wataru、Shimomura Kazunori、Hart David A.、Hanai Hiroto、Jacob George、Chijimatsu Ryota、Yarimitu Seido、Fujie Hiromichi、Okada Seiji、Tsumaki Noriyuki、Nakamura Norimasa
  • 雑誌名: npj Regenerative Medicine 巻: 8 号: 1 ページ: 59-59
  • DOI: 10.1038/s41536-023-00335-x
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Distribution and clinical impact of molecular subtypes with dark zone signature of DLBCL in a Japanese real-world study (2023)
  • 著者名/発表者名: Urata Tomohiro、Naoi Yusuke、Chijimatsu Ryota、Maeda Yoshinobu、Scott David W.、Ennishi Daisuke
  • 雑誌名: Blood Advances 巻: 7 号: 24 ページ: 7459-7470
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2023010402
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Targeting the Clear Cell Sarcoma Oncogenic Driver Fusion Gene EWSR1::ATF1 by HDAC Inhibition (2023)
  • 著者名/発表者名: Mae Hirokazu、Outani Hidetatsu、Imura Yoshinori、Chijimatsu Ryota、Inoue Akitomo、Kotani Yuki、Yasuda Naohiro、Nakai Sho、Nakai Takaaki、Takenaka Satoshi、Okada Seiji
  • 雑誌名: Cancer Research Communications 巻: 3 号: 7 ページ: 1152-1165
  • DOI: 10.1158/2767-9764.crc-22-0518
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Efficacy of Autologous Skeletal Myoblast Cell Sheet Transplantation for Liver Regeneration in Liver Failure (2023)
  • 著者名/発表者名: Toya Keisuke、Tomimaru Yoshito、Kobayashi Shogo、Harada Akima、Sasaki Kazuki、Iwagami Yoshifumi、Yamada Daisaku、Noda Takehiro、Takahashi Hidenori、Kado Takeshi、Imamura Hiroki、Takaichi Shohei、Chijimatsu Ryota、Asaoka Tadafumi、Tanemura Masahiro、Miyagawa Shigeru、Doki Yuichiro、Eguchi Hidetoshi
  • 雑誌名: Transplantation 巻: 107 号: 8 ページ: e190-e200
  • DOI: 10.1097/tp.0000000000004567
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stem cell-based modeling and single-cell multiomics reveal gene-regulatory mechanisms underlying human skeletal development (2023)
  • 著者名/発表者名: Tani Shoichiro, Okada Hiroyuki, Onodera Shoko, Chijimatsu Ryota, Seki Masahide, Suzuki Yutaka, Xin Xiaonan, Rowe David W., Saito Taku, Tanaka Sakae, Chung Ung-il, Ohba Shinsuke, Hojo Hironori
  • 雑誌名: Cell Reports 巻: 42 号: 4 ページ: 112276-112276
  • DOI: 10.1016/j.celrep.2023.112276
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Cancer-specific tissue-resident memory T-cells express ZNF683 in colorectal cancer (2023)
  • 著者名/発表者名: Kitakaze Masatoshi、Uemura Mamoru、Hara Tomoaki、Chijimatsu Ryota、Motooka Daisuke、Hirai Toshiro、Konno Masamitsu、Okuzaki Daisuke、Sekido Yuki、Hata Tsuyoshi、Ogino Takayuki、Takahashi Hidekazu、Miyoshi Norikatsu、Ofusa Ken、Mizushima Tsunekazu、Eguchi Hidetoshi、Doki Yuichiro、Ishii Hideshi
  • 雑誌名: British Journal of Cancer 巻: - 号: 10 ページ: 1828-1837
  • DOI: 10.1038/s41416-023-02202-4
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Runx2 and Runx3 differentially regulate articular chondrocytes during surgically induced osteoarthritis development (2022)
  • 著者名/発表者名: Nagata K, Hojo H, Chang SH, Okada H, Chijimatsu R, Omata Y, Mori D, Makii Y, Kawata M, Kaneko T, Iwanaga Y, Nakamoto H, Maenohara Y, Tachibana N, Ishikura H, Higuchi J, Taniguchi Y, Ohba S, Chung Ul, Tanaka S, Saito T
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 13 号: 1 ページ: 6187-6204
  • DOI: 10.1038/s41467-022-33744-5
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] RSPO2 defines a distinct undifferentiated progenitor in the tendon/ligament and suppresses ectopic ossification (2022)
  • 著者名/発表者名: Tachibana N、Chijimatsu R、Okada H、Oichi T、Taniguchi Y、Maenohara Y、Miyahara J、Ishikura H、Iwanaga Y、Arino Y、Nagata K、Nakamoto H、Kato S、Doi T、Matsubayashi Y、Oshima Y、Terashima A、Omata Y、Yano F、Maeda S、Ikegawa S、Seki M、Suzuki Y、Tanaka S、Saito T
  • 雑誌名: Science Advances 巻: 8 号: 33 ページ: 2138-2154
  • DOI: 10.1126/sciadv.abn2138
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] N(6)-methyladenosine methylation-regulated polo-like kinase 1 cell cycle homeostasis as a potential target of radiotherapy in pancreatic adenocarcinoma (2022)
  • 著者名/発表者名: Tatekawa Shotaro、Tamari Keisuke、Chijimatsu Ryota、Konno Masamitsu、Motooka Daisuke、Mitsufuji Suguru、Akita Hirofumi、Kobayashi Shogo、Murakumo Yoshiki、Doki Yuichiro、Eguchi Hidetoshi、Ishii Hideshi、Ogawa Kazuhiko
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 12 号: 1 ページ: 11074-11074
  • DOI: 10.1038/s41598-022-15196-5
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Establishment of a reference single-cell RNA sequencing dataset for human pancreatic adenocarcinoma (2022)
  • 著者名/発表者名: Chijimatsu R、Kobayashi S、Takeda Y、Kitakaze M、Tatekawa S、Tachibana N、Saito T、Ennishi D、Tomida S、Sasaki K、Yamada D、Tomimaru Y、Takahashi H、Doki Y、Eguchi H
  • 雑誌名: iScience 巻: 25 号: 8 ページ: 104659-104659
  • DOI: 10.1016/j.isci.2022.104659
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Development of hydroxyapatite-coated nonwovens for efficient isolation of somatic stem cells from adipose tissues (2022)
  • 著者名/発表者名: Chijimatsu Ryota、Takeda Taiga、Tsuji Shinsaku、Sasaki Kohei、Kato Koichi、Kojima Rie、Michihata Noriko、Tsubaki Toshiya、Matui Aya、Watanabe Miharu、Tanaka Sakae、Saito Taku
  • 雑誌名: Regenerative Therapy 巻: 21 ページ: 52-61
  • DOI: 10.1016/j.reth.2022.05.009
  • 査読あり / オープンアクセス