| 研究課題/領域番号 |
22K08959
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分55030:心臓血管外科学関連
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
上野 耕司 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (30736070)
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| 研究分担者 |
石井 治之 山口大学, 大学院創成科学研究科, 准教授 (80565820)
溝口 高弘 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (90844796)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | 細胞外小胞 / 血管新生 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
エクソソームなどのナノサイズ物質を治療薬として使用する研究開発が行われているが、将来の臨床応用を考えた時の課題は、治療薬となるナノサイズ物質を高い純度で製造することである。本研究では純度の高いナノサイズ治療薬の製造法を確立することで、将来のナノサイズ治療薬の臨床応用の基盤となることを目指している。
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| 研究実績の概要 |
293T細胞を浮遊培養で培養し、その培養液からエクソソームの分画を限外濾過により、濃縮する実験を行った。
膜分画が100Kで、素材がPESおよびHydroasartでの培養液の濃縮の違いを検討した。293T細胞の浮遊培養により得た培養液1000mLを500mLずつに分けて、PESおよびHydroasartでの限外濾過の比較実験を行い、濃縮を行った。培養液500mLを約25mLに濃縮するのに、PESでは約155分の時間を要したが、Hydrosartでは約67分の時間を要した。濃縮前および濃縮後の培養液中のエクソソームの濃度をCD9/CD63 ELISA Kitで測定したところ、濃縮前の培養液中のエクソソーム濃度は1349pg/mLであった。濃縮後の培養液中のエクソソーム濃度は、100KのHydrosartで濃縮した場合は19327pg/mL、100KのPESで濃縮した場合は15487pg/mLであった。
PESの10Kおよび50Kでも同様の実験を実施したが、100Kによる限外濾過の方が、エクソソームの単離が良い結果であった、
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
実験室レベルのサイズの限外濾過装置で、培養液を濃縮しても、エクソソームが効率的に濃縮されている結果を得ることが出来たため。
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| 今後の研究の推進方策 |
限外濾過により濃縮したエクソソームの機能を確認する必要があると考えている。
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