| 研究課題/領域番号 |
22K09316
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56020:整形外科学関連
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| 研究機関 | 順天堂大学 |
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研究代表者 |
高木 辰哉 順天堂大学, 医学部, 先任准教授 (70317436)
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| 研究分担者 |
窪田 大介 順天堂大学, 医学部, 准教授 (70638197)
長谷川 延彦 順天堂大学, 医学部, 非常勤助教 (70909192)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2023年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
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| キーワード | 骨転移 / miRNA / cell free RNA / リキッドバイオプシー / cell free DNA / バイオマーカー |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では、低侵襲、かつ高感度に骨転移を診断することのできるバイオマーカーの開発を模索する。そこでがん患者のCirculating Tumor Cells（CTC）、血漿中のcell-free RNA、cell-free DNA (cfDNA)、micro RNA (miRNA)に注目して、骨転移患者の血液検体で発現解析を行う。加えて、血液中の骨転移関連遺伝子解析フローの構築、同定した骨転移診断マーカーの機能解析、骨転移関連遺伝子解析の臨床的有用性評価を進め、革新的な骨転移診断技術の開発とその臨床応用を目指す。
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| 研究実績の概要 |
本研究は、「血液で骨転移由来分子を早期かつ高感度に発見する」ということをテーマに、これまでの画像評価、血中の骨代謝マーカー以上の精度で骨転移を診断し、早期に適切な治療を行い、患者の全がん的な予後改善を目的としている。現在の骨転移診断は、レントゲンやCT,MRIなどの画像診断を中心に行われている。しかし、画像診断では変性疾患や感染性疾患との鑑別が困難なことがあり、初期の骨転移の検出にも限界がある。さらに骨転移の診断が確定できない場合、 原発巣の治療方針にも大きく影響する。また、血液検査所見で骨転移の診断に特異的な項目がない点や、そもそも骨転移の診断およびマネージメントに長けた医師が限られていることも臨床的な問題もある。そこで、なるべく身体侵襲の少ない方法で、骨転移を「早期」に「確実」に診断することのできるバイオマーカー の開発に着目して研究を開始した。昨年度は、骨転移を伴う8症例(尿路上皮がん、乳がん、上咽頭がん、膵臓がん、乳がん、子宮肉腫、胃がん、エナメル上皮がん)の原発巣、骨転移巣、骨転移発覚時の血液検体の収集を行い、骨転移関連マーカーの評価を行う準備を行った。そして本年度は、まずは骨転移４検体を対象にmiRNAアレイによる遺伝子発現解析を行った。現在までにすべての骨転移検体で共通して発現異常を認めるmiRNAを８０種類同定した。今後はこれらの症例の原発巣、骨転移巣、正常部、血漿中のcell free DNA(cfDNA)の遺伝子変異解析、コビー数解析を行っており、骨転移関連マーカーの探索、cfDNAとの一致率を検証を進めていく。その結果をうけて、RNAをもちいた発現解析やmiRNA解析を検討し、様々な方向から骨転移マーカーの探索と血液検体との比較解析を行っていく。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
初年度は骨転移、原発巣、血液検体の揃った症例を8症例収集し、骨転移マーカー解析の基盤を整えた。本年度は骨転移の臨床検体よりRNAを抽出し、RNAの質を確認した後に、マイクロアレイを用いてmiRNAの発現を網羅的に調査した。すべての検体で発現が上昇していたmiRNAについて、マイクロRNAのデータベースや文献情報を参考にして、標的遺伝子の探索を進めている。予想していたよりも多くの候補が見つかったことにより、データ解析に予定よりも多くの時間を要し、研究にやや遅れを生じている。今後は、引き続き、原発巣、骨転移巣、正常部、血漿中のcell free DNA(cfDNA)の遺伝子変異解析、コビー数解析についても継続していく。
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| 今後の研究の推進方策 |
昨年度は、骨転移マーカー探索のパイロットスタディとなる症例を収集した。そして本年度は骨転移の臨床検体よりRNAを抽出し、RNAの質を確認した後に、マイクロアレイを用いてmiRNAの発現を網羅的に調査した。すべての検体で発現が上昇していたmiRNAについて、マイクロRNAのデータベースや文献情報を参考にして、標的遺伝子の探索を進めている。想定よりも多くの候補遺伝子を発見しているため、さらに追加の骨転移検体を用いて発現検証を行い候補遺伝子の絞り込みを進めていく予定である。また、miRNA以外の遺伝子についてもDNA、RNAレベルでの解析も行い、予想される骨転移関連因子候補を中心に、治療タイミングに応じた血液検体の収集を行い解析し、臨床的有用性を検討していく予定である。
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