| 研究課題/領域番号 |
22K09362
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 基金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 審査区分 |
小区分56020:整形外科学関連
|
|---|
| 研究機関 | 大阪公立大学 |
|---|
研究代表者 |
高橋 真治 大阪公立大学, 大学院医学研究科, 病院講師 (80735605)
|
|---|
| 研究分担者 |
岡野 匡志 大阪公立大学, 大学院医学研究科, 病院講師 (50754826)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,380千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 780千円)
2024年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
|
|---|
| キーワード | 骨粗鬆症 / 椎体骨折 / スフェロイド / 脂肪肝細胞 |
|---|
| 研究開始時の研究の概要 |
難治性骨折の治療として幹細胞を利用した
再生医療に関する研究が行われているが、OVFへの応用の報告は少ない。また、椎体圧潰部
を整復して椎体高を保つには細胞のみではなくScaffoldも必要になる。そこで、ハイドロキ
シアパタイト（HA）をScaffoldとして、自己複製能と多分化能を有し、低侵襲に獲得できる
脂肪由来幹細胞(ADSC)を移植する手法を考案した。さらに本研究では豊富な細胞容量と増殖能を有するADSCスフェロイドを使用することによりその効果を高めることが期待できる。本研究目的は、ラットのOVFモデルにてHAを用いてADSCスフェロイドを移植する骨折の再生療法を確立することである。
|
| 研究実績の概要 |
本研究の目的は、ラットの卵巣摘出(OVX)モデルの椎体前方欠損に対してβ-TCPをscaffoldにしてADSCスフェロイドを移植して骨折の再生療法を確立することである。
まずはin vivo, in vitroにおいて必要なADCS骨分化、ADSC骨分化後のスフェロイド化、ラットのOVXモデル、腰椎前方欠損モデルの手技を確立させた。その後、in vitroにおいて、骨分化スフェロイド、未分化スフェロイド、骨分化single cell、未分化single cellにおいてのapoptosis assayを評価した。スフェロイド化や骨分化を行った方がapoptosisを起こしにくい結果となった。また、遺伝子発現をRT-PCR法にて測定し、マイクロCT法で上記の４群を比較評価している。まだ単回の評価であるが組織修復を表すVEGFは未分化スフェロイドで大きく、骨形成を表すALPは骨分化スフェロイドで大きい傾向となっており、複数回の評価を行っていく予定である。
In vivoにおいては、プレ実験を行っている。ラットOVXモデルに腰椎椎体前方欠損させたモデルに骨分化スフェロイドとβ-TCPを移植した骨分化スフェロイド群と、β-TCPのみを移植したコントロール群を、術後４週の段階で犠牲死させマイクロCTとMasson trichrome染色による組織評価を行っている。まだ数が少ない段階であるが、Controlと比較して骨分化スフェロイドで骨再生が高い事を示唆する結果となっている。in vivoの本実験においては骨分化スフェロイド群、未分化スフェロイド群、コントロール群の３群により、ADSCスフェロイドとβ-TCPの複合体がOVXラットの腰椎椎体前方欠損に移植し骨再生に有効であるか検証を行っていく予定としている。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
概ね順調に進んでいる
|
| 今後の研究の推進方策 |
次年度はサンプル数を増やし、ＣＴ、病理で評価して結果をまとめていく。
|
