| 研究課題/領域番号 |
22K09442
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56030:泌尿器科学関連
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
高橋 さゆり 東京大学, 医科学研究所, 特任講師 (40313217)
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| 研究分担者 |
堤 武也 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (00726739)
四柳 宏 東京大学, 医科学研究所, 教授 (30251234)
高田 伊知郎 日本大学, 医学部, 研究員 (50361655)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2023年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2022年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | 前立腺癌 / 免疫療法 / CAR-T細胞 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
前立腺癌はホルモン治療が奏効するが、数年で去勢抵抗性前立腺癌という状態になることもあり予後不良である。申請者の研究成果から前立腺癌の増悪のメカニズムとして免疫環境が癌増殖に関与すると考え着目した。これまでにCD4+T細胞からTh17細胞への分化に必須の核内受容体RORγの転写共役因子として新規ESS2蛋白を同定し前立腺癌における作用を明らかにした。そこで患者検体を用いて免疫環境を解明を試みるとともにESS2を強制発現させたChimeric antigen receptor (CAR)-T細胞の樹立を試み新薬の開発に結び付けることを目的とする。
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| 研究実績の概要 |
去勢抵抗前立腺癌CRPCの臨床では、第二世代ホルモン治療薬が登場するまで免疫抑制剤であるプレドニゾロンが使用され有効であることが知られている。われわれの先行研究からWnt5aがIL6、TGFβ2、INFγ、TNF、EGF、IGF2等の炎症性サイトカインの分泌を促進し、これらのサイトカインが前立腺癌細胞を増殖させることを証明した。 前立腺癌患者において免疫環境がどのように変化しているのか調べることから着手した。同意書を取得した、われわれの施設で摘出した前立腺検体を凍結保存し、そのサンプルよりT細胞の分離を試みた。条件検討を繰りかえし少ない検体量から最大限T細胞を抽出する方法を確立することができた。RT－qPCRにより分離したT細胞の性質を解析しているところである。
ESS2遺伝子のノックアウトまたは強制発現がCAR-T細胞の維持に強く関わる可能性が示唆されたたためESS2ノックアウトマウス由来のCAR-T細胞、ESS2野生型または変異型を強制発現させたCAR-T細胞の樹立を試み、前立腺癌モデルマウスでの効果検討および解析を行う予定である。２０２２年は先行するESS2遺伝子の前立腺癌における役割についての研究のリバイス対応に時間を費やした。CAR-T細胞としてESS2ノックアウト由来のT細胞、コントロールT細胞、ESS2変異遺伝子導入T細胞にヒト由来PSCAを発現させた細胞樹立を試みる予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
サンプルを得るにはボリュームの大きい前立腺癌に限定する必要があり、症例の蓄積が予定通りに進まなかった。またT細胞の抽出が技術を要したこと、実験室で新規に立ち上げた系であったため物品の準備や整備に時間を要した。
またこの研究に先行した研究の論文のリバイス対応にかなり時間を割かれたのも予定通りに進まなかった要因である。
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| 今後の研究の推進方策 |
症例を蓄積し凍結サンプル数を増やすとともに、順次、T細胞の分離を進めn数を増やす予定である。今後γδT細胞(TRDV2遺伝子)、T細胞全体(CD3E遺伝子)のプライマーを合成し、RT－qPCRを行い免疫環境の解析を行う。
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