| 研究課題/領域番号 |
22K09444
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56030:泌尿器科学関連
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| 研究機関 | 三重大学 |
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研究代表者 |
石井 健一朗 三重大学, 医学系研究科, リサーチアソシエイト (90397513)
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| 研究分担者 |
井口 和弘 岐阜薬科大学, 薬学部, 教授 (10295545)
中川 泰久 岐阜医療科学大学, 保健科学部, 准教授 (40726949)
渡邉 昌俊 三重大学, 医学系研究科, 教授 (90273383)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | 前立腺がん / アンドロゲン感受性 / サブクローン / アンドロゲン受容体関連遺伝子 / 一塩基変異 / 去勢抵抗性前立腺がん / 病理組織学的検査法 / 中立進化 / アンドロゲン受容体依存性 / パッセンジャー遺伝子変異 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
進行性前立腺がんに対するホルモン療法を開始する前に、ホルモン療法が効きにくい患者を見分けることができれば、去勢抵抗性前立腺がんへと進展（再燃）する患者数を確実に減らせる。腫瘍内不均一性に富む前立腺がんでは、がん細胞の増殖において有利でもなく不利でもない中立進化により生じた無数のサブクローンの中にホルモン療法抵抗性のクローンが存在し、再燃の起点となる可能性が高い。本研究課題では、前立腺がん細胞にアンドロゲン受容体依存性の差異を生み出す中立的な変異を同定し、関連する鍵分子の発現・局在を視覚化することができれば、ホルモン療法への反応性や再燃のし易さを評価できると考えている。
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| 研究実績の概要 |
前年度に同定した、アンドロゲン低感受性クローンF10に特異的な一塩基変異（SNV）を有するアンドロゲン受容体（AR）関連遺伝子４つについて、アンドロゲン感受性ヒト前立腺がんLNCaP細胞から樹立した、アンドロゲン感受性が異なる３つのサブクローンE9, F10, G4におけるmRNA発現量を比較検討した。TaqMan probeを用いたリアルタイムPCR解析の結果、SNVを有するAR関連遺伝子４つのうち２つは、アンドロゲン感受性が高いLNCaP細胞とG4細胞に比較して、F10細胞と、SNVが認められなかったE9細胞というアンドロゲン低感受性クローンにおいてmRNA発現量が低いことを確認した。さらに、SNVを有する個々の遺伝子と強く関連する遺伝子のmRNA発現量も比較検討した結果、SNVを有する遺伝子と同じ発現パターン、すなわちF10細胞だけでなくE9細胞でもmRNA発現量が低いことを確認した。
以上の結果より、F10細胞でのみSNVが認められたAR関連遺伝子だけの影響で前立腺がん細胞のアンドロゲン感受性が規定されているのではない、と推察された。また、SNVはF10細胞でのみ認められたものの、当該遺伝子のmRNA発現量はE9細胞でも低いことから、SNVの有無はAR関連遺伝子mRNA発現量に影響していない可能性が示唆された。そのため、次年度は２つのAR関連遺伝子と、それぞれに強く関連する遺伝子の発現調節がmiRNAに制御されていると仮定し、AR関連遺伝子と、その関連遺伝子の発現への関与が報告されているmiRNA発現量を比較検討する予定である。これらの検討を終えることで、前立腺がん細胞のアンドロゲン感受性を規定するmiRNAを同定し、針生検組織での発現・局在を視覚化することで、病理診断時にホルモン療法が効きにくく、再燃し易い患者を予測可能な病理組織学的検査法の開発を目指す。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初からの研究計画であったエクソーム解析から一塩基変異を有するアンドロゲン受容体関連遺伝子を抽出し、３つのサブクローンにおけるmRNA発現量を比較検討した。アンドロゲン低感受性の２つのサブクローンに共通してmRNA発現量が低い遺伝子２つを選択し、それぞれの遺伝子と強く関連する遺伝子のmRNA発現量も検討した結果、一塩基変異を有する遺伝子と同じ発現パターンであることまで確認できた。
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| 今後の研究の推進方策 |
最終年度は、一塩基変異を有するアンドロゲン受容体関連遺伝子と、それに強く関連する遺伝子のmRNA発現を制御する因子としてmiRNAの役割に着目した研究を計画している。これらの検討により、前立腺がん細胞のアンドロゲン感受性を規定するmiRNAを同定し、針生検組織での発現・局在を視覚化することで、病理診断時にホルモン療法が効きにくく、再燃し易い患者を予測可能な病理組織学的検査法の開発を目指す。
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