| 研究課題/領域番号 |
22K09507
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56030:泌尿器科学関連
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
鑪野 秀一 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 准教授 (30624655)
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| 研究分担者 |
坂口 大 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 助教 (70779008)
榎田 英樹 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (80347103)
吉野 裕史 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 講師 (90642611)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2024年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2023年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2022年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
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| キーワード | エクソソーム / 腎細胞癌 / マイクロRNA / microRNA-1 / MYO15A / 腎癌 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
進行性腎細胞癌の治療戦略は免疫チェックポイント阻害薬（ICI）の出現により大きく変化した。しかしながら従来の血管新生阻害剤に代表される分子標的治療薬は一次治療においても ICI との併用が高い奏効率を示すことが示され、進行性腎細胞癌の中心的役割を担っている。このような背景から治療抵抗性腎細胞癌における分子標的治療薬に対する薬剤耐性獲得は克服すべき喫緊の課題となっている。本研究はエクソソーム解析を起点として治療抵抗性腎細胞癌における分子標的治療薬への耐性獲得機序を明らかにし、新規治療戦略や治療効果予測マーカーを探索するための基礎データを収集する提案である。
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| 研究実績の概要 |
今年度は、エクソソームmiR-1の機能と、エクソソームがRCCの腫瘍メーカーを構成する可能性について検討した。まず、細胞ライセートやヒト血清からエクソソームをスピンカラム法で採取する方法を確立した。次に、Nanosightナノ粒子トラッキング解析とエクソソームマーカーCD63を用いたウェスタンブロット解析を用いてエクソソームを評価した。PKH26で標識したエクソソームがレシピエント細胞と融合することを確認した。さらに、miR-1トランスフェクション細胞由来のエクソソームで処理したRCC細胞では、miR-1の発現が上昇した。機能解析により、エキソソームmiR-1は、対照治療と比較して細胞の増殖、遊走、浸潤を有意に阻害することが示された。RCCのTCGAデータベースを用いた解析では、臨床RCC検体ではmiR-1発現が正常腎臓検体と比較して有意にダウンレギュレーションされており、miR-1発現が低い患者は高発現の患者と比較して全生存期間が短いことが示された。さらに、RNA配列解析により、いくつかの遺伝子の発現レベルがエクソソームmiR-1への曝露によって変化していることが示された。TCGAデータベースを用いた解析により、MYO15Aの高発現はRCCの転帰不良と関連していることが示された。さらに、臨床患者の血清由来のエクソソームのRT-qPCR解析では、RCC患者ではMYO15Aが健常対照と比較して有意にアップレギュレーションされていることが示された。この研究は、エクソソームmiR-1による治療がRCCの治療に有効なアプローチであるとともにエキソソームMYO15AはRCCの診断腫瘍マーカーとなる可能性が示唆された。さらに附随研究としてスニチニブ耐性腎細胞癌細胞株においてsecretogranin II がHIF１を介した標的遺伝子となり得ることを見出した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
エクソソーム内マイクロRNAの有用性を示す論文を作成できた。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後、さらにエクソソーム内の他のマイクロRNAに着目して、研究を進めていきたい。
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