| 研究課題/領域番号 |
22K09833
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56060:眼科学関連
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
佐藤 茂 大阪大学, 大学院医学系研究科, 准教授 (70738525)
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| 研究分担者 |
不二門 尚 大阪大学, 大学院生命機能研究科, 特任教授 (50243233)
辻川 元一 大阪大学, 大学院医学系研究科, 教授 (70419472)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | 遺伝性網膜変性症 / 全エクソーム解析 / 網膜色素変性症 / 黄斑ジストロフィー / 新規原因遺伝子 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
これまで我々が行ってきた全エクソーム解析にて既知遺伝子内に候補となる変異を全く認めない症例が数多く存在することが明らかとなった。また世界的にもIRDsには未知の原因遺伝子が存在していることは確実視されており、病態の解明に向けその全貌を明らかにすることが研究の焦点となっている。以上のことから本研究では遺伝性網膜変性症の未知の原因遺伝子群を網羅的に明らかにし、重要な網膜変性の分子機序を系統的に明らかにしていく
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| 研究実績の概要 |
遺伝性網膜変性症患者に対する全エクソーム解析の結果を活用して、新規遺伝性網膜変性症の原因遺伝子候補を絞り込んだ。絞り込んだ遺伝子群についてin situ hybridizationにてマウス網膜発現を調べ、解析の順位付けを行った。順位の高いものから免疫染色を行い、視細胞で発現がみられるものについて、先端モデル動物作成支援プラットフォームの支援を受けて、ノックアウトマウスの作成を行った。ノックアウトマウスは現在５系統のgermline transmissionが確認できている。並行して、ノックアウトゼブラフィッシュの作成も行い現在３系統が樹立できている。順次、形態学的解析及び網膜電位図による電気生理学的解析にてそれらの表現型を解析しているところである。更に、英国ロンドン大学の眼科研究所との共同研究にて、今回抽出した遺伝子変異をもつ遺伝性網膜変性症患者がいないかの検索も開始している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
IRDs患者に対するWESのデータを基にしたスクリーニングで絞り込まれた候補遺伝子群について、順位付けを行い、これまでに６系統のKOマウスと３系統のKOゼブラフィッシュラインを確立できている。現在、表現型解析を進めているところである。同時に、英国ロンドン大学の眼研究所と共同研究にて、これらの候補遺伝子の変異を持つ患者の探索を開始している。以上より、計画は順調に進んでいると考えている。
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| 今後の研究の推進方策 |
引き続き、形態学的解析を進め、光学顕微鏡的にははっきりとした形態学的差異を示さないノックアウトマウスについては、電子顕微鏡的解析も進めていく。一部は開始済である。
また、電気生理学的解析についても継続し、差異が出たノックアウトマウスについては視運動性眼振も計測する予定である。視運動性眼振測定装置は組みあがっており、データの取得に向けた微調整をしているところであり、来年度にはデータの取得ができると考えている。
また、人で検出された変異を導入したゼブラフィッシュも作成を開始している。ロンドン大学との共同研究も継続する。以上により、今回対象とした新規遺伝性網膜変性症の原因遺伝子候補の変異が、実際に網膜変性をしめすことにより、新規原因遺伝子の同定を目指す。
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