| 研究課題/領域番号 |
22K09959
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分57030:保存治療系歯学関連
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
兼平 正史 東北大学, 歯学研究科, 非常勤講師 (30177539)
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| 研究分担者 |
八幡 祥生 東北大学, 歯学研究科, 准教授 (30549944)
齋藤 正寛 東北大学, 歯学研究科, 教授 (40215562)
角田 洋一 東北大学, 大学病院, 助教 (50509205)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | 炎症性腸疾患 / 唾液 / プロテオーム解析 / 診断機器 / プロテーム解析 / 唾液バイオマーカー / SOMAscan |
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| 研究開始時の研究の概要 |
クローン病や潰瘍性大腸炎に代表される炎症性腸疾患は、腸の粘膜に持続性の炎症が起こる難治性疾患であり、近年患者数は増加している。本患者では治療が奏功し寛解の状態になってから再び悪化するケースが多々あり、重症化を防ぐためには継続的に管理し疾患の再燃を早期に把握する遠隔診断補助装置の開発が必要である。これまで我々は東北大学病院消化器内科との共同研究により、唾液中には同疾患に特徴的な炎症性サイトカインが増加する事を明らかにした。この研究成果をふまえ唾液中から疾患活動度を予測するバイオマーカーを革新的技術であるSOMAscanを用いて検出し、体外診断用医薬品の製造に繋がる基盤技術の開発を目指している。
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| 研究実績の概要 |
人生100年時代を迎える本邦において、基礎疾患を有する国民の健康寿命を延ばす事が大きな課題となっている。クローン病や潰瘍性大腸炎に代表される炎症性腸疾患(IBD)は、大腸および小腸の粘膜に持続性の炎症が起こる難治性疾患であるが、本邦での患者数は増加の一途をたどっている。
クレブシエラ菌は健常者の口腔内にも存在するが、抗生物質の多用などにより腸内細菌叢が乱れると腸管内に定着し、潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患を引き起こす可能性が示唆され、IBDの原因として口腔常在菌により免疫細胞が過剰に活性化される事が近年明らかにされた。さらに、口腔内で抗原提示を受けたリンパ球が腸に移動すると腸炎を悪化させ、歯周病が腸炎の悪化に関係している事も報告されている。IBD患者は治療が奏功して寛解の状態になっても再燃するケースが多々あり、重症化を防ぐためには疾患活動状態を継続的に管理して、再燃を早期に予測する遠隔診断補助装置の開発が求められている。これまで研究代表者は東北大学消化器内科とIBD患者の唾液サンプルを用いてプロテオーム解析を行い、同患者に特異的に検出される上位20のタンパク質を対象に、定量PCRによるスクリーニングを行うための新たなシステム構築を行った。最初に唾液サンプル中に含まれる細胞のRNAを抽出し、次にPCRによる定量化を行なった結果、IBDを含む重度歯周病患者のサンプルでは健常者と比較してRNAが分解傾向にあることが判明した。この現象はRNA分解阻止薬を添加しても改善しないことから、唾液を採取した時点で分解していることが判明した。そこで次年度では、分解されたRNAでも検出可能な炎症性腸疾患において特異的に検出される唾液バイオマーカーをスクリーニングする事を予定している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本課題で必要なクローン病患者の唾液サンプル採取に関しては、「炎症性腸疾患患者の経時的疾患活動性を反映する唾液バイオマーカー検索のための探索的研究」として本学消化器内科と共同で重篤な炎症性腸疾患患者の唾液サンプルを採取しデータベース化している。本年度では、この唾液データベースを用いたSOMAscanによるプロテオーム解析の結果から抽出された炎症性腸疾患で特異的なタンパク質のスクリーニングも予定通り実施する事ができた。これらの試料群からは、炎症性腸疾患に特異的なマーカーのスクリーニングシステムの構築を行っており、引き続き次年度に唾液を用いたPCRスクリーニングを行うことを予定しており、スクリーニングシステムは変更しているが目的は同じであるため、ほぼ計画どおりと考えられる。
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| 今後の研究の推進方策 |
前年度に立ち上げた唾液サンプルからRNAを抽出するシステムを用いて、プロテオーム解析で得られたバイオマーカーの候補分子に関しPCR法を用いた解析を実施する。具体的にはこれから内視鏡検査を予定している３０名の炎症性腸疾患患者の中で、東北大学病院に入院中で症状の悪化傾向を示している患者から集めた唾液ライブラリーから、これまで得られたバイオマーカーの候補分子の特異的primerを用いて炎症性腸疾患患者の唾液サンプルの定量PCR解析を行い、同患者で特異的に発現しているマーカーの同定を試みる。これらの結果から得られたマーカーの定量値と、炎症性腸疾患患者の寛解期、再燃期との相関性を見分けるため、同患者の検査項目（血中アルブミン濃度、CRP、CDAI）について比較検討を行う。得られた結果を詳細に解析する事により炎症性腸疾患患者の疾患活動度を検証できる唾液バイオマーカーを確定し、その有用性を評価する事を目標とする。
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