| 研究課題/領域番号 |
22K10620
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 基金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 審査区分 |
小区分58040:法医学関連
|
|---|
| 研究機関 | 帝京大学 |
|---|
研究代表者 |
西尾 忠 帝京大学, 医学部, 准教授 (80401892)
|
|---|
| 研究分担者 |
野上 誠 帝京大学, 医学部, 教授 (20218291)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
|
| 配分額 *注記 |
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2024年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
|
|---|
| キーワード | 法医中毒学 / 中毒マーカー / 揮発性有毒物質 / LC-MS |
|---|
| 研究開始時の研究の概要 |
法医中毒分野において, 揮発性有毒物質の直接検出は, それらの環境中及び体内からの速やかな消失のため困難であることが多い. このため, 正確な中毒診断には信頼性の高い新規マーカーの開発が必要である. 本研究では, 揮発性有毒物質の中でも特に塩素及びシアンに焦点を当て, 体内吸収後に生じる特異的代謝物 (メインマーカー)の精密分析と, 物質曝露により大きく濃度変動をきたす代謝物 (補助マーカー) の探索同定を行い, 両マーカー併用による新規性及び実用性の高い中毒診断法を開発する.
|
| 研究実績の概要 |
本年度は、乾燥濾紙血を用いたシアン中毒検査法の開発及びシアン中毒新規マーカーの検出及び定量法の開発を行った。
(1)乾燥濾紙血を用いた検査法の開発; 前年度、シアン代謝物の一つであるATCA(2-アミノチアゾリン-4-カルボン酸)の誘導体化LC-MSによる定量法を開発した。今年度は、本法を臨床分野で汎用されている血液濾紙に応用して簡便な中毒検査法の開発を行った。径3mmのデスク2枚を検査試料として、有機溶剤による抽出操作を行い誘導体化LC-MSに付して分析した。この結果20ng/mL～1500ng/mLの範囲で検量線は良好な直線性を示し、各種バリデーション試験の結果も良好であった。次に喫煙群及び非喫煙群の血中ATCA濃度を測定した所、前者でATCA濃度の有意な上昇が見られ、本法の有用性を示すことができた。
(2)シアン中毒新規マーカーの定量法の開発; 実験動物を用いた先行研究で、シアン中毒の動物血液中からATOEA (2-アミノチアゾリン-4-オキソアミノエタン酸)が検出された報告はあるものの、ヒトではこれまで報告例は無かった。そこで、火災死亡のヒト死体血を用いてATOEAの検出、定量を試みた。ATCA定量法に基づいて分析した所、初めてヒト血液中からATOEAの検出が可能であった。さらに、ATCA及びATOEAの同時分析法の構築を行い、火災死亡群と内因死群で濃度比較を行ったところ、ATOEAの中毒マーカーとしての特異性が示唆される結果が得られた。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
シアン中毒の新規マーカーであるATOEAの分析法を開発し、初めてシアン中毒のヒト血液中からの検出及び定量に成功した。さらに血液濾紙を用いた簡便な中毒検査法の開発を行い実試料分析まで展開することができた。
|
| 今後の研究の推進方策 |
これまで主に血液試料を用いて塩素中毒及びシアン中毒の判定に有用と考えられるメインマーカーの分析法を開発してきたが、今後は各種組織に含有されるこれらマーカー濃度を測定し、体内分布を精査する。また,培養細胞を用いて中毒補助マーカー分子の探索を行う予定である。
|
