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細胞壁弛緩ペプチドと核酸運搬ナノミセルを利用した高効率な植物葉緑体への遺伝子導入

研究課題

研究課題/領域番号 22K14575
研究種目

若手研究

配分区分基金
審査区分 小区分28040:ナノバイオサイエンス関連
研究機関国立研究開発法人理化学研究所

研究代表者

宮本 昂明  国立研究開発法人理化学研究所, 環境資源科学研究センター, 研究員 (20804040)

研究期間 (年度) 2022-04-01 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2023年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2022年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
キーワード細胞壁 / DNA送達 / 双性型イオン液体 / 葉緑体移行ペプチド / ナノミセル / 活性酸素種 / 抗酸化ペプチド / 葉緑体ゲノム改変 / 遺伝子送達 / 植物細胞壁 / ストレス / 葉緑体改変 / 遺伝子導入 / 双性イオン型ペプチド / 葉緑体移行シグナル / 葉緑体
研究開始時の研究の概要

本研究では、葉緑体へ遺伝子を運ぶペプチド-DNA複合体(ナノミセル)と、細胞壁を弛緩させる双性イオン型ペプチドを組み合わせた、全く新しい葉緑体への遺伝子導入手法を開発する。これを達成するため、本研究計画では、 双性イオン型ペプチドがナノミセルの細胞壁透過効率と揚力亭への遺伝子導入効率与える影響を解明すると共に、実用植物種への遺伝子導入が可能であるかを検証する。

研究成果の概要

本研究では、セルロース可溶化剤(ZILとZIP)を用いた化学処理により、植物細胞壁の透過性を向上させるとともに、葉緑体への高効率なDNA導入を可能にする新手法を開発した。ZILは結晶性セルロース微繊維を部分的に溶解し、細胞壁の透過性を高めることで、ナノミセルによるDNA導入効率を改善した。また、ZIPはZILよりも低濃度で同様の効果を示した。さらに、葉緑体移行ペプチドと細胞膜透過ペプチドのROS消去能を発見した。両者を融合したキメラ型ペプチドにより、葉緑体内のROSを一時的に除去することに成功した。本研究成果は、葉緑体改変に資する有用な化学ツールを提供するものである。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究成果により、従来よりも高効率な葉緑体への遺伝子導入が可能となった。ZILとZIPを用いる化学処理手法は、プロトプラストや高価な装置を用いることなく、植物細胞壁の透過性を向上させる新たなコンセプトである。この技術は、葉緑体改変を軸とした植物の形質改良や有用物質生産などの応用研究に貢献できる。さらに本研究では、ある種の葉緑体移行ペプチドと細胞膜透過ペプチドに活性酸素(ROS)消去能があることを発見した。この知見は、植物の酸化ストレスを緩和させる新たな手法の開発につながる。以上の成果は、基礎植物科学のみならず、持続可能な農業や次世代バイオテクノロジーの実現にも貢献すると考えられる。

報告書

(3件)
  • 2023 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2022 実施状況報告書
  • 研究成果

    (15件)

すべて 2024 2023 2022

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件、 オープンアクセス 6件) 学会発表 (9件) (うち国際学会 2件、 招待講演 3件)

  • [雑誌論文] Phenylboronic Acid-Functionalized Micelles Dual-Targeting Boronic Acid Transporter and Polysaccharides for siRNA Delivery into Brown Algae2024

    • 著者名/発表者名
      Yoshinaga Naoto、Miyamoto Takaaki、Goto Mami、Tanaka Atsuko、Numata Keiji
    • 雑誌名

      JACS Au

      巻: 4 号: 4 ページ: 1385-1395

    • DOI

      10.1021/jacsau.3c00767

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Advancing Biomolecule Delivery in Plants: Harnessing Synthetic Nanocarriers to Overcome Multiscale Barriers for Cutting-Edge Plant Bioengineering2023

    • 著者名/発表者名
      Miyamoto Takaaki、Numata Keiji
    • 雑誌名

      Bulletin of the Chemical Society of Japan

      巻: 96 号: 9 ページ: 1026-1044

    • DOI

      10.1246/bcsj.20230147

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Organelle-targeted gene delivery in plants by nanomaterials2023

    • 著者名/発表者名
      Law Simon Sau Yin、Miyamoto Takaaki、Numata Keiji
    • 雑誌名

      Chemical Communications

      巻: 59 号: 47 ページ: 7166-7181

    • DOI

      10.1039/d3cc00962a

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Plant Mitochondrial-Targeted Gene Delivery by Peptide/DNA Micelles Quantitatively Surface-Modified with Mitochondrial Targeting and Membrane-Penetrating Peptides2023

    • 著者名/発表者名
      Abe Naoya、Fujita Seiya、Miyamoto Takaaki、Tsuchiya Kousuke、Numata Keiji
    • 雑誌名

      Biomacromolecules

      巻: 24 号: 8 ページ: 3657-3665

    • DOI

      10.1021/acs.biomac.3c00391

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Design of an Artificial Peptide Inspired by Transmembrane Mitochondrial Protein for Escorting Exogenous DNA into the Mitochondria to Restore their Functions by Simultaneous Multiple Gene Expression2023

    • 著者名/発表者名
      Yoshinaga Naoto、Miyamoto Takaaki、Odahara Masaki、Takeda‐Kamiya Noriko、Toyooka Kiminori、Nara Seia、Nishimura Haruna、Ling Feng、Su'etsugu Masayuki、Yoshida Minoru、Numata Keiji
    • 雑誌名

      Advanced Functional Materials

      巻: 34 号: 8 ページ: 2306070-2306070

    • DOI

      10.1002/adfm.202306070

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Relaxation of the Plant Cell Wall Barrier via Zwitterionic Liquid Pretreatment for Micelle‐Complex‐Mediated DNA Delivery to Specific Plant Organelles2022

    • 著者名/発表者名
      Miyamoto Takaaki、Tsuchiya Kousuke、Toyooka Kiminori、Goto Yumi、Tateishi Ayaka、Numata Keiji
    • 雑誌名

      Angewandte Chemie International Edition

      巻: 61 号: 32

    • DOI

      10.1002/anie.202204234

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] Peptide-mediated DNA delivery to target organelles in plants: Strategies to overcome plant cellular barriers2024

    • 著者名/発表者名
      Takaaki Miyamoto & Keiji Numata
    • 学会等名
      S-FISNA~NIH~&~NSF~
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Peptide-mediated intracellular cargo delivery for plant biomodification2023

    • 著者名/発表者名
      Takaaki Miyamoto & Keiji Numata
    • 学会等名
      第72回高分子年次大会、日台ジョイントセッション
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 植物の葉緑体で活性酸素種を消去するペプチドを利用した強光ストレス下での光合成機能の保護2023

    • 著者名/発表者名
      宮本昂明、沼田圭司
    • 学会等名
      第17回バイオ関連化学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] 植物の形質改変を目指した高機能ペプチド材料の開発とマテリアルDXの融合に向けた展開2023

    • 著者名/発表者名
      宮本昂明、沼田圭司
    • 学会等名
      DxMT 若手WORKSHOP OSAKA 2023
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Designed antioxidant peptides with cell permeability, chloroplast targeting and ROS scavenging capabilities for plant protection under abiotic stress conditions2023

    • 著者名/発表者名
      Takaaki Miyamoto, Keiji Numata.
    • 学会等名
      2023 Gordon Research Conference on Chloroplast Biotechnology
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ペプチド提示型ミセルと細胞壁の透過性を向上させる 双性型イオン液体を利用した植物葉緑体への核酸導入2022

    • 著者名/発表者名
      宮本昂明、沼田圭司
    • 学会等名
      第32回バイオ・高分子シンポジウム
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] 核酸を内包するペプチド提示ミセルと細胞壁を緩める双性型イオン液体を組み合わせた植物オルガネラへのDNA送達2022

    • 著者名/発表者名
      宮本昂明、沼田圭司
    • 学会等名
      第16回バイオ関連化学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] 植物細胞のバリアを克服するペプチドの設計と核酸・タンパク質デリバリーへの応用2022

    • 著者名/発表者名
      宮本昂明、沼田圭司
    • 学会等名
      第71回高分子討論会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ペプチドによる植物への核酸導入2022

    • 著者名/発表者名
      宮本昂明、沼田圭司
    • 学会等名
      FIBER核酸化学ユニバース13 (FIBER FUTURE COLLEGE91)
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 招待講演

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公開日: 2022-04-19   更新日: 2025-01-30  

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