| 研究課題/領域番号 |
22K15947
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分52050:胎児医学および小児成育学関連
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| 研究機関 | 大分大学 |
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研究代表者 |
井上 真紀 大分大学, 医学部, 講師 (20726913)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2024年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2023年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2022年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
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| キーワード | 乳児肝不全症候群1型 / LARS1 / 急性肝不全 / オートファジー / ゼブラフィッシュ |
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| 研究開始時の研究の概要 |
乳児肝不全症候群1型は乳児期に反復性の重症肝不全を来す致死的な疾患であり、感染などの発熱時に劇症化する。本研究では、その原因遺伝子であるLARS1がオートファジーに関与することに着目し、ヒトLARS1遺伝子点変異を導入したノックイン動物モデルを用いて各成長段階毎のオートファジーを評価し、乳児期に重症となる機序を解明する。また、発熱に関連する刺激を加えた肝組織をメタボローム解析を用いて解析し、発熱性疾患により劇症化する分子経路を明らかにすることで、乳児肝不全症候群1型の病態分子機構の全容解明を目指す。
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| 研究実績の概要 |
2022年度は、CRISPR/Cas9によるLARS1遺伝子変異ノックイン動物モデル（ゼブラフィッシュ、マウス）を樹立した。LARS1遺伝子変異ノックインゼブラフィッシュは、肝臓特異的蛍光タンパク質発現トランスジェニックフィッシュ（Tg(fabp10:mcherry)）と交配し、肝臓を成長段階に応じて観察した。肝臓の発生段階において、LARS1遺伝子変異ノックインゼブラフィッシュは肝臓の形態学的異常を呈しており、組織学的解析では同時期の肝臓に脂肪滴の蓄積を認めた。これはヒトLARS1遺伝子の病的バリアントにより発症する乳児肝不全症候群1型と同様の所見であった。また、LARS1遺伝子変異ノックインゼブラフィッシュのオートファジーについて評価したところ、オートファジーが亢進している所見が確認された。LARS1遺伝子変異ノックインマウスは、野生型に比べて発育障害を認めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
LARS1遺伝子変異ノックイン動物モデルが予定通り順調に樹立できたため、その後の実験をスムーズに実施できている。
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| 今後の研究の推進方策 |
LARS1遺伝子変異ノックインマウスの肝臓組織メタボローム解析を実施し、オートファジー亢進により肝不全・肝臓脂肪滴蓄積を生じる経路や分子を同定する。同定できた経路や分子については、LARS1遺伝子変異ノックインゼブラフィッシュに同定された分子の阻害薬等を用いて、表現型が回復するかどうかの実験を行う予定である。
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