研究課題/領域番号 |
22K16366
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研究種目 |
若手研究
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配分区分 | 基金 |
審査区分 |
小区分54020:膠原病およびアレルギー内科学関連
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研究機関 | 東邦大学 |
研究代表者 |
渡邉 萌理 東邦大学, 医学部, 助教 (10726300)
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研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2024年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2023年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
2022年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
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キーワード | 細胞老化 / senolytics / 間質性肺炎 / 関節リウマチ / Senolytics / SKGマウス |
研究開始時の研究の概要 |
関節リウマチ (RA) にしばしば併発する間質性肺炎 (RA-ILD) の病因は未だ明らかではない。近年、特発性間質性肺炎に細胞老化が関与することが示されたことから、RA-ILDにも同様の病態が関与する可能性がある。申請者らは、先行研究で、RA-ILDのモデルであるSKGマウスの肺線維化部位に老化細胞が集積することを発見した。この結果をもとに、本研究では、RA-ILDの発症機構を細胞老化の観点から解明する。Senolyticsの投与によるRA-ILDの治療を試みる点にも特徴がある。本研究によりRA-ILDの発症機構に新たな概念が生まれ、老化細胞を標的とした治療法の創出につながる可能性がある。
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研究実績の概要 |
p21免疫染色を行う事により、SKGマウスにおける間質性肺炎(SKG-ILD)の肺線維化部位には、zymosan投与4週後からp21を発現する細胞を認め、線維化の進行と共にp21陽性細胞が増加する事がわかった。RT-qPCRにおいてもp21をコードするCdkn1aの有意な上昇を認め、SKG-ILDの病態に細胞老化が関連する事が示唆された。 また、senolyticsとして当初検討していたbis-2-(5-phenyl-acetamido-1,3,4-thiadiazol-2-yl)ethyl sulfide (BPTES)を腹腔内投与し、BPTESがILDの発症を抑制する事ができるか検討を行った。しかし、BPTESを投与した群とコントロールとしてDMSOを投与した群を比較して、SKG-ILDの発現に有意な差を認めなかった。SenolyticsをDasatinibとQuercetinの混合(D+Q)を2週間に1回、3日間連続して内服する方法に変更し、コントロール群と比較したところ、D+Qを投与した群はRT-qPCRでp21をコードするCdkn1aと、I型コラーゲンをコードするCol1a1の発現が有意な低下を認め、老化細胞が除去されることにより、線維化が抑制されている可能性が示唆された。また、肺組織にMasson trichrome染色をを行い、Ashcroft法による肺線維化の評価を行った。D+Q群はコントロール群と比較して、有意差はつかなかったが線維化が抑制されている傾向にあった。また、D+Qの投与により、どのような免疫細胞が変化するかフローサイトメトリーで解析を行ったところ、CD45陽性細胞においてD+Q群はコントロール群より有意な低下をみせた。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
senolyticsをD+Qとしたことで、フローサイトメトリー解析においてBPTEを投与していた実験と比較して有意な老化細胞遺伝子の低下を認め、senolyticsの有効性を確かめる事が出来た。
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今後の研究の推進方策 |
今後p21がどのような細胞から出ているか、免疫染色やフローサイトメトリーで解析し、シングルセル解析まで予定する予定。
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