研究課題/領域番号 |
22K16683
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研究種目 |
若手研究
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配分区分 | 基金 |
審査区分 |
小区分56010:脳神経外科学関連
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研究機関 | 名古屋大学 |
研究代表者 |
金森 史哲 名古屋大学, 医学系研究科, 特任助教 (00905979)
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研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2024-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2023年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
2022年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
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キーワード | 小児もやもや病 / 尿中miRNA |
研究開始時の研究の概要 |
小児もやもや病患者は、「早期診断」および「適切な経過観察による病期進行の把握」に基づく治療計画が重要である。必要な検査として脳血管撮影やMRIが挙げられるが、安静保持が困難な小児患者では鎮静薬剤投与のために疼痛を伴う静脈確保が必要な事も多く、啼泣による脳血流低下のリスクを孕む。そのため、安全かつ簡便な小児もやもや病の診断と病期進行予測を可能とする手段の確立が求められている。本研究の目的は、「小児もやもや病の尿中miRNAを用いた診断モデルの確立と病期進行バイオマーカーの同定」である。
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研究実績の概要 |
本研究は、小児もやもや病の診断及び病気悪化予測を尿中miRNAを用いて可能にさせることを目的とする。小児もやもや病の尿検体を、名古屋大学医学部附属病院、名古屋第二赤十字病院、中京病院を受診した患者から、本人・保護者の書面による同意を得て収集した。またコントロールとなる正常検体については、ボランティアを募集した。その結果本年度は、もやもや病患者の尿検体を約40検体、対象の正常検体を20検体を収集する事ができた。 もやもや病患者の尿中のエクソソームの特徴をつかむため、miRCURY exosome kitを用いて尿1mlよりエクソソームを抽出し、ナノトラッキング解析でその存在を確認し、大きさと量を測定した。またmiRNAの抽は、6mlの尿検体からmiRNeasy kitを用いてRNAを抽出することで、次世代シーケンスに必要な量を確保できた。現在、QIAseq miRNA library kitを用いて、miRNAseqを行うライブラリーを10検体作成し、さらにバイオアナライザーで十分量のライブラリが得られてるいることも確認することができた。本結果から、miRNAseqのライブラリーが問題なく作成できる事がわかり、残り30検体も現在鋭意作成中である。今後シーケンス解析に20検体ずつ提出する予定である。 解析プロトコールの確立については、申請者が過去に行った、もやもや病髄液中miRNAseqのFASTQファイルを用いて、アライメント・発現量の定量化・差次的統計解析についてバイオインフォマティクスに必要なコマンドを確立した。今後、実際の尿中検体を用いて解析を行い、リスク因子を抽出する予定である。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
検体の収集、実験ともに順調に推移している。
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今後の研究の推進方策 |
順調に推移しており、夏前には全検体をシーケンス解析にかけることができると考えられる。 シーケンスの解析方法はすでに確立しており、その後問題なく解析、論文発表に持ち込めると考える。
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