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膨張試料顕微鏡法と全脳カルシウムイメージングの統合による神経回路動態の包括的解析

研究課題

研究課題/領域番号 22K19479
研究種目

挑戦的研究(萌芽)

配分区分基金
審査区分 中区分51:ブレインサイエンスおよびその関連分野
研究機関東京大学

研究代表者

能瀬 聡直  東京大学, 大学院新領域創成科学研究科, 教授 (30260037)

研究期間 (年度) 2022-06-30 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
2023年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
2022年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
キーワードショウジョウバエ / 膨張顕微鏡 / カルシウムイメージング / コネクトーム / 神経回路
研究開始時の研究の概要

本研究では、全脳カルシウムイメージングを行った標本そのものにおいて膨張試料顕微鏡法を用いコネクトミクス解析を可能とすることで、脳神経系全体の「神経活動」と「回路構造」に関する情報を統合しその作動機構をシステムレベルで解析することを目的とする。このためショウジョウバエ幼虫をモデルとした研究を行う。具体的には特異的に可視化した神経突起を教師データとした深層学習により、膨張試料顕微鏡画像において神経突起を自動追跡可能な検出器を構築する。これにより、効率良く全細胞の形態を再構築・同定し、カルシウムイメージングとコネクトミクスのデータを照会可能とする。

研究成果の概要

本研究では光学顕微鏡で比較的簡便に組織の微細構造を解析できる膨張試料顕微鏡法を用いて、神経細胞の「活動」に関する情報と「構造」に関する情報を統合することを目的とした。このため、幼虫中枢神経系に膨張試料顕微鏡法を適用し、100 nm程度の分解能を達成し、全神経細胞を染色したサンプルから単一の軸索・シナプスの構造を撮影することを可能とした。さらに、光変換カルシウムセンサーCaMPARI2と組み合わせることで、神経系の微細構造と活動強度を関連づけることが可能となった。以上の研究により、膨張試料顕微鏡法を用いて構造と神経活動を関連づける基盤を構築することができた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

神経回路を細胞レベルで解析することは、特に遺伝学的手法の開発が進んだモデル動物では重要な研究戦略であるが、神経細胞の数に比して良い遺伝子マーカーの数が少ないため、遺伝学的ラベリングができない細胞が生じ、それらはどうしても解析から漏れてしまう。本研究で開発した膨張試料顕微鏡法を用いた手法は、遺伝子マーカーの有無によらず神経細胞を効率良く同定することを可能とすることで、神経活動パターン解析の自由度を大きく高めるであろう。

報告書

(3件)
  • 2023 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2022 実施状況報告書
  • 研究成果

    (23件)

すべて 2024 2023 2022 その他

すべて 国際共同研究 (2件) 雑誌論文 (7件) (うち国際共著 3件、 査読あり 6件、 オープンアクセス 7件) 学会発表 (13件) (うち国際学会 8件、 招待講演 5件) 備考 (1件)

  • [国際共同研究] University of Cambridge/University of St Andrews(英国)

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [国際共同研究] University of Cambridge/University of St Andrews(英国)

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [雑誌論文] A vacuum-actuated soft robot inspired by Drosophila larvae to study kinetics of crawling behaviour2023

    • 著者名/発表者名
      Sun Xiyang、Nose Akinao、Kohsaka Hiroshi
    • 雑誌名

      PLOS ONE

      巻: 18 号: 4 ページ: 1-18

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0283316

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Synchronous multi-segmental activity between metachronal waves controls locomotion speed in Drosophila larvae2023

    • 著者名/発表者名
      Liu Yingtao、Hasegawa Eri、Nose Akinao、Zwart Maarten F、Kohsaka Hiroshi
    • 雑誌名

      eLife

      巻: 12

    • DOI

      10.7554/elife.83328

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Segment-specific axon guidance by Wnt/Fz signaling diversifies motor commands in Drosophila larvae2023

    • 著者名/発表者名
      Takagi Suguru、Takano Shiina、Hashimoto Yusaku、Morise Shu、Zeng Xiangsunze、Nose Akinao
    • 雑誌名

      bioRxiv

      巻: -

    • DOI

      10.1101/2023.09.05.555126

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • オープンアクセス
  • [雑誌論文] Electrophysiological Validation of Monosynaptic Connectivity between Premotor Interneurons and the aCC Motoneuron in the Drosophila Larval CNS2022

    • 著者名/発表者名
      Giachello Carlo N. G.、Hunter Iain、Pettini Tom、Coulson Bramwell、Knufer Athene、Cachero Sebastian、Winding Michael、Arzan Zarin Aref、Kohsaka Hiroshi、Fan Yuen Ngan、Nose Akinao、Landgraf Matthias、Baines Richard A.
    • 雑誌名

      The Journal of Neuroscience

      巻: 42 号: 35 ページ: 6724-6738

    • DOI

      10.1523/jneurosci.2463-21.2022

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] A neuromechanical model for Drosophila larval crawling based on physical measurements2022

    • 著者名/発表者名
      Sun Xiyang、Liu Yingtao、Liu Chang、Mayumi Koichi、Ito Kohzo、Nose Akinao、Kohsaka Hiroshi
    • 雑誌名

      BMC Biology

      巻: 20 号: 1 ページ: 130-130

    • DOI

      10.1186/s12915-022-01336-w

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Comparative analysis of high- and low-level deep learning approaches in microsatellite instability prediction2022

    • 著者名/発表者名
      Park Jeonghyuk、Chung Yul Ri、Nose Akinao
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 12 号: 1 ページ: 12218-12218

    • DOI

      10.1038/s41598-022-16283-3

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Extraction of bouton-like structures from neuropil calcium imaging data2022

    • 著者名/発表者名
      Fukumasu Kazushi、Nose Akinao、Kohsaka Hiroshi
    • 雑誌名

      Neural Networks

      巻: 156 ページ: 218-238

    • DOI

      10.1016/j.neunet.2022.09.033

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] Transient suppression of tonically active neurons gates motor output in Drosophila larval crawling2024

    • 著者名/発表者名
      Date Takahisa、Liu Yingtao、Yamaguchi Akihiro、Rui Wu、Paul McNulty、Marc Gershow、Maarten Zwart、Nose Akinao、Kohsaka Hiroshi
    • 学会等名
      Asia Pacific Drosophila Neurobiology Conference 3
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Identification of a novel interneuron that regulates forward wave propagation in Drosophila larvae2024

    • 著者名/発表者名
      Seki Takaki、Kohsaka Hiroshi、Nose Akinao
    • 学会等名
      Asia Pacific Drosophila Neurobiology Conference 3
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] A tonically active neuron implicated in the maintenance of muscle relaxation in Drosophila larvae2023

    • 著者名/発表者名
      Date Takahisa、Liu Yingtao、Nose Akinao、Kohsaka Hiroshi
    • 学会等名
      Neurobiology of Drosophila 2023
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Emergence of oscillatory motor activities in developing Drosophila embryos2023

    • 著者名/発表者名
      Zeng XiangSunZe、Komanome Yuko、Seki Takaki、Kazama Hokuto、Nose Akinao
    • 学会等名
      The 56th Annual Meeting of the Japanese Society of Developmental Biologists
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Two perpendicular stripe-wise structures in the neuropil involved in generation of Drosophila larval crawling behaviors2023

    • 著者名/発表者名
      Fukumasu Kazushi、Nose Akinao、Kohsaka Hiroshi
    • 学会等名
      第46 回日本神経科学大会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Revealing behavior-specific neuronal populations in Drosophila larvae with a photoconvertible calcium sensor2023

    • 著者名/発表者名
      Date Takahisa、Nose Akinao、Kohsaka Hiroshi
    • 学会等名
      第46 回日本神経科学大会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Mechanisms of neural circuit reorganization that enable coordinated movement2023

    • 著者名/発表者名
      Seki Takaki、Komanome Yuko、 Zeng XiangSunZe、Kohsaka Hiroshi、Nose Akinao
    • 学会等名
      第46 回日本神経科学大会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Spatiotemporal structure of synapse population activity in the motor circuits for crawling2023

    • 著者名/発表者名
      Fukumasu Kazushi、Nose Akinao、Kohsaka Hiroshi
    • 学会等名
      第75回日本細胞生物学会大会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Comprehensive characterization of behavior specific neurons in fruit fly larvae with a photoconvertible calcium sensor2023

    • 著者名/発表者名
      Takahisa Date, Akinao Nose, Hiroshi Kohsaka
    • 学会等名
      Adaptive Circuit Census (ACC) International Symposium 2023
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Molecular and cellular mechanisms underlying the emergence of spontaneous patterned activity crucial for motor development in Drosophila2022

    • 著者名/発表者名
      XiangSunZe Zeng, Yuko Komanome, Hokto Kazama, Akinao Nose
    • 学会等名
      NEURO2022
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Functional development of neural circuits that regulate animal behaviors2022

    • 著者名/発表者名
      Akinao Nose
    • 学会等名
      The Neurophysics of Locomotion
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Synchronous multi-segmental activity controls the speed of axial locomotion by modulating the interval between peristaltic waves in Drosophila larvae2022

    • 著者名/発表者名
      Yingtao Liu, Akinao Nose, Maarten Frans Zwart, Hiroshi Kohsaka
    • 学会等名
      SfN Neuroscience meeting 2022
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Synchronous multi-segmental activity between metachronal waves controls the crawling speed in fly larvae2022

    • 著者名/発表者名
      Yingtao Liu, Akinao Nose, Maarten F Zwart, Hiroshi Kohsaka
    • 学会等名
      第45 回日本分子生物学会年会(MBSJ2022)
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [備考] 能瀬研究室

    • URL

      http://bio.phys.s.u-tokyo.ac.jp/

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書 2022 実施状況報告書

URL: 

公開日: 2022-07-05   更新日: 2025-01-30  

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