| 研究課題/領域番号 |
22K19521
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| 研究種目 |
挑戦的研究(萌芽)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
中区分53:器官システム内科学およびその関連分野
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| 研究機関 | 信州大学 |
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研究代表者 |
柴 祐司 信州大学, 学術研究院医学系, 教授 (70613503)
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| 研究期間 (年度) |
2022-06-30 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
2023年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
2022年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
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| キーワード | iPS細胞 / 心不全 / 心筋再生 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究の目的は、自家iPS細胞を用いた心筋再生治療の開発である。自家iPS細胞を用いた心筋再生は、コストとレギュレーションの観点から実現の見通しが立っていない。
本研究では、霊長類慢性心筋梗塞モデルにおいて、自家iPS細胞由来心筋細胞を移植し、免疫抑制剤を使用せずに細胞が生着するか明らかとする。さらに、自家iPS細胞移植により心機能が改善することを証明する。
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| 研究実績の概要 |
本研究では、霊長類iPS細胞由来心筋細胞を心筋梗塞発症後3か月経過した慢性心筋梗塞モデルに自家移植し、他家移植に対する優位性を検証するとともに、免疫抑制剤を使用せずに細胞が長期生着するか確認した。
１）カニクイザルiPS細胞由来心筋細胞の作製とレシピエントカニクイザルの同定：エピゾーマルベクターを用いてOct3/4、Sox2、Klf4、L-Mycを遺伝子導入することによりiPS細胞を5系統作製した。さらに未分化iPS細胞に対して、アクチビンA、BMP４を加えることにより、レシピエト1頭当たり2×10^8個の心筋細胞を作製し、凍結保存した。レシピエント動物として、自家移植用の5個体とは別に10個体を用意した。
２）霊長類前臨床移植試験：全身麻酔下で開胸し、左冠動脈前下行枝中部で血流を遮断し、3時間後に再灌流することにより心筋梗塞モデル（ischemia/reperfusion injury）を作製した。心筋梗塞作製12週間後の慢性期に、自家移植（N=5）または他家移植（N=5）、vehicle移植（N=5）を行った。移植4週間後に心臓を摘出し、移植心筋の生着と拒絶反応の評価、腫瘍形成の有無について組織学的に評価した。自家移植動物では、グラフト心筋細胞の生着が確認できた。他家移植動物では、移植４週間後の時点で、グラフト心筋細胞に対する著明な免疫応答が確認された。
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