| 研究課題/領域番号 |
22K19531
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| 研究種目 |
挑戦的研究(萌芽)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
中区分53:器官システム内科学およびその関連分野
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| 研究機関 | 名古屋大学 (2023)
九州大学 (2022) |
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研究代表者 |
松本 有樹修 名古屋大学, 理学研究科, 教授 (60741519)
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| 研究期間 (年度) |
2022-06-30 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
2023年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
2022年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
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| キーワード | 横紋筋リボソーム / 拡張型心筋症 / Ribo-seq / リボソーム / 心臓 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
横紋筋には「構成型リボソーム」と「横紋筋リボソーム」の両方が存在する。これまでにわれわれは、横紋筋リボソームを欠損するマウスを作製し、心臓の収縮能の低下や翻訳の異常などが生じることを見出している。また、横紋筋リボソームを欠損すると、代償的に構成型リボソームが増加していたことから、観察された表現型はリボソーム複合体の数の減少によるものではなく、構成型リボソームと横紋筋リボソームの質的な違いに起因するものであると考えられる。そこで、本課題では「構成型リボソーム」と「横紋筋リボソーム」にどのような質的な違いがあるかを明らかにしていく。
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| 研究実績の概要 |
われわれは、横紋筋にRPL3を含む「構成型リボソーム」とRPL3Lを含む「横紋筋リボソーム」の両方が存在することを見出した。そこでRPL3L KOマウス（= 横紋筋リボソームを欠損）を作製したところ、心臓の収縮能の低下が認められた。また、RPL3とRPL3 Lは心臓では同程度発現しているが、RPL3L KOマウスではRPL3の発現が２倍程度に増加していたことから、観察された表現型はリボソーム複合 体の数の減少によるものではなく、「構成型リボソーム」と「横紋筋リボソーム」の質的な違いに起因するものであると考えられる。
Ribo-seqを行ったところ、RPL3L KOマウスの心臓では特にAlaやProコドンでの翻訳スピードの遅延が観察されたため、これらコドンでDisomeの形成が亢進している可能性が示唆された。そこでDisome-seqを行ったところ、実際にDisomeの形成亢進が確認された。プロテオーム解析を行うことにより、これらDisomeの形成亢進が確認されたタンパク質の発現量が低下していることを確認した。分子基盤を明らかにするために、クライオ電子顕微鏡による解析を行なっていたが、その解析が困難であったためにAlphaFoldによる予測を行った。RPL3とRPL3Lは共にリボソームにおけるpeptidyl transferase centerの近傍に位置しており、その領域のアミノ酸配列がRPL3とRPL3Lで異なっていたため、このアミノ酸の違いが翻訳スピードに影響していることが示唆された。以上の結果をNature Communications誌に論文として報告した。
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