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光濃縮による細胞内人工液液相分離ツール開拓への挑戦

研究課題

研究課題/領域番号 22K20512
研究種目

研究活動スタート支援

配分区分基金
審査区分 0403:人間医工学およびその関連分野
研究機関大阪公立大学

研究代表者

豊内 秀一  大阪公立大学, 研究推進機構, 特任講師 (40851382)

研究期間 (年度) 2022-08-31 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
2,860千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 660千円)
2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
キーワード光捕捉 / 光濃縮 / 液液相分離 / 細胞内液液相分離 / 光圧 / タンパク質 / 光ピンセット / 細胞
研究開始時の研究の概要

近年、液液相分離によって細胞内に形成される非膜オルガネラが様々な生体現象に関わっていることが示され大きな注目を集めている。本研究では光圧による局所的光濃縮を利用した人工液液相分離ツールの開発を目指した基礎的研究を行う。光濃縮による液液相分離現象を、分子集合体から非膜オルガネラへと発展する階層構造から理解し、階層間のつながりやその時間スケールを明らかにする。さらには本研究で得られた化学的知見を基軸とし、生化学反応制御および細胞操作を可能とする新しい光技術へ発展させる。

研究成果の概要

タンパク質溶液の気液界面にレーザーを集光照射すると、集光点近傍に過渡的かつ局所的な高濃度ドメインを形成できる。この時空間的に制御された光濃縮を利用し、細胞内液液相分離(LLPS)を人工的に誘起する新規ツールの開発を目指した基礎研究を行った。ニワトリ卵白リゾチーム(HEWL)をモデルタンパク質とし、光濃縮によってHEWLのLLPS誘起が可能か検証した結果、LLPS微小液滴の形成を確認する事に成功した。細胞内分子クラウディング環境を模倣するため、HEWLとウシ血清アルブミンの混合溶液を光濃縮すると、単一タンパク質溶液と比較して効率的に光濃縮誘起LLPS微小液滴が形成する事が明らかとなった。

研究成果の学術的意義や社会的意義

細胞内液液相分離(LLPS)によって形成される非膜オルガネラが様々な生体現象に関わっていることが示され大きな注目を集めている。一方で、LLPSを高い時空間分解能で確実に捉える人工LLPSツールが求められている。本研究で得られた成果は、光濃縮を高時空分解能を有する人工LLPSツールとして利用可能である事を示し、光濃縮誘起LLPSを通した生化学反応制御さらには細胞操作を可能とする新規光技術へ発展する事が期待できる。観測された光濃縮誘起LLPSは、光濃縮下に特異的なLLPSである事が示唆されており、光濃縮下での生体分子間相互作用の制御に繋がる新しい知見として、今後の研究発展が大いに期待できる。

報告書

(3件)
  • 2023 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2022 実施状況報告書
  • 研究成果

    (13件)

すべて 2024 2023 2022 その他

すべて 国際共同研究 (5件) 雑誌論文 (1件) (うち国際共著 1件、 査読あり 1件) 学会発表 (7件)

  • [国際共同研究] 台湾国立陽明交通大学(台湾)

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [国際共同研究] Katholieke Universiteit Leuven(ベルギー)

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [国際共同研究] 国立陽明交通大学(その他の国・地域 Taiwan)

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [国際共同研究] ルーバン大学(ベルギー)

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [国際共同研究] メルボルン大学(オーストラリア)

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [雑誌論文] Two-stage optical trapping and assembling of protein at air/solution interface2023

    • 著者名/発表者名
      Yi Po-Wei、Chiu Wei-Hsiang、Toyouchi Shuichi*、Bresoli-Obach Roger*、Hofkens Johan、Chatani Eri、Hosokawa Yoichiroh*、Sugiyama Teruki*、Masuhara Hiroshi*
    • 雑誌名

      Applied Physics Express

      巻: 16 号: 2 ページ: 025501-025501

    • DOI

      10.35848/1882-0786/acb3ab

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [学会発表] Optical Trapping and Single Droplet Formation of Lysozyme at Solution Surface2024

    • 著者名/発表者名
      Yi-Sian Chien
    • 学会等名
      The 71st JSAP Spring Meeting 2024
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] 異種粒子の光圧誘起集合化による 極微量DNA検出2023

    • 著者名/発表者名
      豊内 秀一
    • 学会等名
      新学術光圧ナノ物質操作・若手領域会議
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] 異種プローブの光濃縮による迅速・高感度なDNA定量分析法の開発2023

    • 著者名/発表者名
      豊内 秀一
    • 学会等名
      2023年第70回応用物理学会春季学術講演会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] Two-Stage Optical Trapping Mechanism of Protein at its Air/Solution Interface2023

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Masuhara
    • 学会等名
      2023年第70回応用物理学会春季学術講演会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] 非線形フォトクロミック反応を用いた 銀ナノワイヤープラズモニック導波路効果の可逆的制御2022

    • 著者名/発表者名
      豊内 秀一
    • 学会等名
      2022年光化学討論会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] Optically Reconfigurable Random Laser using Optically Evolved Assembling of Polystyrene Microparticles2022

    • 著者名/発表者名
      Shuichi Toyouchi
    • 学会等名
      2022年第83回応用物理学会秋季学術講演会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] Cooperative Optical Trapping Dynamics of Two Proteins at Solution Surface2022

    • 著者名/発表者名
      Wei-Hsiang Chiu
    • 学会等名
      2022年第83回応用物理学会秋季学術講演会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書

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公開日: 2022-09-01   更新日: 2025-01-30  

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