| 研究課題/領域番号 |
22K20805
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| 研究種目 |
研究活動スタート支援
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
0901:腫瘍学およびその関連分野
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| 研究機関 | 早稲田大学 |
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研究代表者 |
西田 奈央 早稲田大学, 高等研究所, 講師(任期付) (80737114)
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| 研究期間 (年度) |
2022-08-31 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
2,860千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 660千円)
2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | 細胞外小胞 / エクソソーム / がん微小環境 / 3D組織モデル / 乳がん / がん転移 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
がん組織はがん細胞・正常細胞・細胞外マトリックスが密に詰まった構造を持ち、その中でがん細胞は細胞外小胞(Extracellular vesicles, EVs)を受け渡し周囲の正常細胞をがん促進性に改変している。本研究はがん組織という構造の中で、がん細胞から正常細胞への細胞外小胞の受け渡しを定量的・時空間的に理解することを目標とする。ある細胞から分泌されたEVが到達する範囲と目的の細胞を特定するとともに、受け渡しに影響するEV表面の構造を特定する。さらに、細胞外小胞を介した相互作用が、がん組織という環境を形成・維持するための役割を解明する。
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| 研究実績の概要 |
本研究はがん組織という構造の中で、がん細胞から正常細胞への細胞外小胞の受け渡しを定量的・時空間的に理解することを目標としている。本年度は、前半は産休・育休を取得させていただいた。後半では、前年度に最適化した高感度な細胞外小胞ラベルを他の複数の高転移ながん細胞株にも導入して安定発現株を作製するとともに、脳組織スライスの体外培養維持方法の最適化を行い、乳がん細胞を脳組織上に播種することで、実験室での乳がん脳転移モデルを作製した。さらに、この乳がん脳転移モデル上で、がん細胞が細胞外小胞を周囲の環境に分泌する様子を、生きたまま経時的に観察することに成功した。この観察の実現のためには、培養条件や細胞外小胞のラベル方法のさらなる最適化などが必要であった。また、がん組織内で、がん由来の細胞外小胞を取り込んだ細胞の種類を特定するため、フローサイトメトリー実験を進めており、実験条件を最適化し、現在実施・解析中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
がん由来細胞外小胞を高感度にラベルし、検出するための条件検討を実施し、さらに組織スライスを活用した脳転移モデル上でのライブでの細胞外小胞の観察に成功したため。さらに、取り込み先の細胞種類の特定の実験を進められているため。
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| 今後の研究の推進方策 |
がん由来の細胞外小胞を取り込んだ細胞を特定するため、フローサイトメトリーでの解析を進め、組織スライス上でも染色、特定する。さらに、現在２光子顕微鏡で実施している経時観察についても、さらに肺転移モデルなど他のスライスでも観察を行うとともに、実際に組織スライス上での細胞外小胞の挙動を、軌道解析で解析したり、到達先の細胞の分布や距離などの解析を進める。悪性度が異なる乳がんや他のがん細胞でも同様な観察を行い、細胞外小胞の受け渡しの違いによるによるがんの悪性化を理解する。
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