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細胞外小胞が内包する分子の動態解明と新しい牛伝染性リンパ腫モニタリング技術の開発

研究課題

研究課題/領域番号 22KF0161
補助金の研究課題番号 22F22097 (2022)
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分基金 (2023)
補助金 (2022)
応募区分外国
審査区分 小区分42020:獣医学関連
研究機関岐阜大学

研究代表者

猪島 康雄  岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (20355184)

研究分担者 RAHMAN MD. MATIUR  岐阜大学, 応用生物科学部, 外国人特別研究員
研究期間 (年度) 2023-03-08 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
2023年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
2022年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
キーワード細胞外小胞 / 牛伝染性リンパ腫 / BLV / EBL / モニタリング
研究開始時の研究の概要

牛伝染性リンパ腫ウイルス(BLV)感染牛のうち、牛伝染性リンパ腫(EBL)を発症するのは、わずか1~5%であり、BLV感染量が増加しても発症しない感染牛がほとんどであり、発症の原因はいまだ不明である。
本研究では、生体の健康状態により、内包する核酸やタンパク質などの分子の種類と量がダイナミックに変化する50~150nmサイズの細胞外小胞(EV)に着目し、EVが内包する分子の動態を解明し、BLV感染からEBL発症までのモニタリング技術を開発する。

研究実績の概要

牛伝染性リンパ腫(EBL)は、牛伝染性リンパ腫ウイルス(BLV)感染を原因とするが、BLV感染牛のうちEBLを発症するのはわずか1~5%だけであり、いまだ発症要因は解明されていない。毎年発症頭数が増加しており、大きな経済的損失をもたらしている。
本研究では、牛の生乳中の細胞外小胞(EV)に着目した。EVは、あらゆる細胞から分泌され、宿主の生体環境を反映してEVが内包する分子の種類と量が変動することが知られており、ヒトではがん診断に活用されている。EBLは牛のB細胞性リンパ腫、血液のがんであることから、EV内の分子を網羅的に解析し、内包分子がリンパ腫発症までの過程でどのような動態を示すのか解明し、新しいEBLのモニタリング技術を確立することを目指す。
最終年度である本年度は、前年度に得た成果をもとに以下の研究を進めた。①大学附属の酪農場、民間の酪農場で採血し、BLV感染量をリアルタイムPCRで定量した。おおよそ月齢を合わせた牛を選択し、BLVに感染していない健康牛6頭、BLV低コピー感染牛(BLV感染前期)8頭、およびBLV高コピー感染牛(BLV感染後期)18頭、合わせて32頭から生乳を収集し、それら3群の検体として分けた。②生乳中のEVを分離・精製後、内包するmRNAを抽出し、前年度にEBL発症を反映する生乳中のバイオマーカー候補として同定したmRNAについて、3群の生乳EV内包量を定量し、ウイルス感染量に依存し内包量も変化するのか検討した。
その結果、予想に反し、生乳EV中の2種のバイオマーカー候補mRNA内包量は、健康牛と比べBLV低コピー感染牛で有意に増加するが、BLV高コピー感染牛では減少し健康牛と有意差が認められなかった。以上より、生乳EVが内包するEBL発症バイオマーカー候補としたmRNA量は、ウイルス感染量とは異なる動態を示すことが示唆された。

報告書

(2件)
  • 2023 実績報告書
  • 2022 実績報告書
  • 研究成果

    (24件)

すべて 2024 2023 2022 その他

すべて 雑誌論文 (9件) (うち国際共著 2件、 査読あり 9件、 オープンアクセス 7件) 学会発表 (12件) (うち国際学会 2件、 招待講演 1件) 備考 (3件)

  • [雑誌論文] 肉用牛における牛伝染性リンパ腫ウイルス感染と枝肉成績との関連2024

    • 著者名/発表者名
      松橋珠子、朝川昇、村瀬華梨、加藤大樹、松本和也、猪島康雄、白木琢磨
    • 雑誌名

      肉用牛研究会報

      巻: 116 ページ: 30-30

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Characterization of mRNA signature in milk small extracellular vesicles from cattle infected with bovine leukemia virus2023

    • 著者名/発表者名
      Rahman Md. Matiur、Ishikawa Hinata、Yamauchi Marika、Takashima Shigeo、Kamatari Yuji O.、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • 雑誌名

      Pathogens

      巻: 12 号: 10 ページ: 1239-1239

    • DOI

      10.3390/pathogens12101239

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Exploration of microRNA biomarkers in blood small extracellular vesicles for enzootic bovine leukosis2023

    • 著者名/発表者名
      Takada Akane、Kamatari Yuji O.、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • 雑誌名

      Microorganisms

      巻: 11 号: 9 ページ: 2173-2173

    • DOI

      10.3390/microorganisms11092173

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Identification of Suitable Internal Control miRNAs in Bovine Milk Small Extracellular Vesicles for Normalization in Quantitative Real-Time Polymerase Chain Reaction2023

    • 著者名/発表者名
      Rahman Md. Matiur、Nakanishi Ryoka、Tsukada Fumi、Takashima Shigeo、Wakihara Yoshiko、Kamatari Yuji O.、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • 雑誌名

      Membranes

      巻: 13 号: 2 ページ: 185-185

    • DOI

      10.3390/membranes13020185

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] 牛舎におけるウイルスを伝播するイエバエとサシバエ成虫対策2023

    • 著者名/発表者名
      清水薫、岡田彩加、猪島康雄
    • 雑誌名

      日本獣医師会雑誌

      巻: 76 号: 6 ページ: e149-e156

    • DOI

      10.12935/jvma.76.e149

    • ISSN
      0446-6454, 2186-0211
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 牛伝染性リンパ腫ウイルス感染を早期に検出する新規バイオマーカーの探索2023

    • 著者名/発表者名
      車取侑香、古谷眞椰、猪島康雄、松本和也、白木琢磨、松橋珠子
    • 雑誌名

      肉用牛研究会報

      巻: 114 ページ: 28-28

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Comparing microRNA in milk small extracellular vesicles among healthy cattle and cattle at high risk for bovine leukemia virus transmission2022

    • 著者名/発表者名
      Nakanishi Ryoka、Takashima Shigeo、Wakihara Yoshiko、Kamatari Yuji O.、Kitamura Yuko、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • 雑誌名

      Journal of Dairy Science

      巻: 105 号: 6 ページ: 5370-5380

    • DOI

      10.3168/jds.2021-20989

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Characterization of miRNAs in Milk Small Extracellular Vesicles from Enzootic Bovine Leukosis Cattle2022

    • 著者名/発表者名
      Tsukada Fumi、Takashima Shigeo、Wakihara Yoshiko、Kamatari Yuji O.、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • 雑誌名

      International Journal of Molecular Sciences

      巻: 23 号: 18 ページ: 10782-10782

    • DOI

      10.3390/ijms231810782

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Identification of Potential mRNA Biomarkers in Milk Small Extracellular Vesicles of Enzootic Bovine Leukosis Cattle2022

    • 著者名/発表者名
      Hiraoka Mami、Takashima Shigeo、Wakihara Yoshiko、Kamatari Yuji O.、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • 雑誌名

      Viruses

      巻: 14 号: 5 ページ: 1022-1022

    • DOI

      10.3390/v14051022

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 生乳中のEBLバイオマーカー分子の探索2023

    • 著者名/発表者名
      猪島康雄
    • 学会等名
      動物用ワクチンーバイオ医薬品研究会 2023年度シンポジウム
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Identification of suitable internal control mRNAs and miRNAs in bovine milk small extracellular vesicles for normalization in quantitative real-time polymerase chain reaction2023

    • 著者名/発表者名
      Md. Matiur Rahman, Ryoka Nakanishi, Fumi Tsukada, Shigeo Takashima, Yuji O. Kamatari, Kaori Shimizu, Ayaka Okada, Yasuo Inoshima
    • 学会等名
      International Society for Extracellular Vesicles 2023 Annual Meeting
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 肉用牛における牛伝染性リンパ腫ウイルス感染と枝肉成績との関連2023

    • 著者名/発表者名
      松橋珠子、朝川昇、村瀬華梨、加藤大樹、松本和也、猪島康雄、白木琢磨
    • 学会等名
      第60回(令和5年)肉用牛研究会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] 牛伝染性リンパ腫発症を反映する血液エクソソーム内包miRNAバイオマーカーの探索2022

    • 著者名/発表者名
      高田秋音、 松橋珠子、 岡田彩加、 猪島康雄
    • 学会等名
      令和4年度獣医学術中部地区学会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 牛伝染性リンパ腫ウイルス感染ステージによる生乳エクソソームに含まれるhsa-miR-424-5pの動態2022

    • 著者名/発表者名
      守安政太、 岡田彩加、 猪島康雄
    • 学会等名
      令和4年度獣医学術中部地区学会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 血液エクソソームにおける牛伝染性リンパ腫発症を反映するmiRNAバイオマーカーの探索2022

    • 著者名/発表者名
      高田秋音、 松橋珠子、 岡田彩加、 猪島康雄
    • 学会等名
      第165回日本獣医学会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 牛伝染性リンパ腫ウイルス感染牛のウイルスコピー数と生乳エクソソーム中のhsa-miR-424-5p内包量との相関2022

    • 著者名/発表者名
      守安政太、 岡田彩加、 猪島康雄
    • 学会等名
      第165回日本獣医学会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 生乳エクソソーム中miRNA量と牛伝染性リンパ腫ウイルス感染量との相関2022

    • 著者名/発表者名
      守安政太、髙田秋音、岡田彩加、猪島康雄
    • 学会等名
      第9回日本細胞外小胞学会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] リアルタイムPCRのノーマライゼーションに用いる牛乳エクソソーム中の内在性コントロールmiRNAsの同定2022

    • 著者名/発表者名
      エムディ マティウル ラハマン, 中西諒花, 塚田文, 清水薫, 岡田彩加, 猪島康雄
    • 学会等名
      第9回日本細胞外小胞学会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 牛伝染性リンパ腫ウイルス感染を早期に検出する新規バイオマーカー の探索2022

    • 著者名/発表者名
      車取侑香、古谷眞椰、猪島康雄、松本和也、白木琢磨、松橋珠子
    • 学会等名
      第59回肉用牛研究会和歌山大会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 牛伝染性リンパ腫発症を反映する血液エクソソーム内包miRNAバイオマーカーの探索2022

    • 著者名/発表者名
      高田秋音、 松橋珠子、 岡田彩加、 猪島康雄
    • 学会等名
      第40回日本獣医師会獣医学術学会年次大会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] Development of a monitoring method for high risk cattle of bovine leukemia virus transmission and onset of enzootic bovine leukosis using milk exosomes2022

    • 著者名/発表者名
      Md. Matiur Rahman, Shigeo Takashima, Yuji O. Kamatari, Kaori Shimizu, Ayaka Okada, Yasuo Inoshima
    • 学会等名
      第29回アジア獣医師会連合(FAVA)大会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会
  • [備考] 岐阜大学応用生物科学部共同獣医学科食品環境衛生学研究室 研究業績

    • URL

      https://www.abios.gifu-u.ac.jp/education-member/vetpage/inoshima/achievement.html

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [備考] 岐阜大学応用生物科学部附属家畜衛生地域連携教育研究センターGeFAH 研究業績

    • URL

      https://www.abios.gifu-u.ac.jp/gefah/achievement.html

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書 2022 実績報告書
  • [備考] 岐阜大学応用生物科学部食品環境衛生学研究室 研究業績

    • URL

      https://www.abios.gifu-u.ac.jp/education-member/vetpage/inoshima/achievement.html

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書

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公開日: 2022-04-28   更新日: 2024-12-25  

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