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液-液相分離による液滴と外部物質の相互作用に基づいた炭酸同化酵素の活性化

研究課題

研究課題/領域番号 22KJ0346
補助金の研究課題番号 21J00852 (2021-2022)
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分基金 (2023)
補助金 (2021-2022)
応募区分国内
審査区分 小区分28040:ナノバイオサイエンス関連
研究機関筑波大学

研究代表者

延山 知弘  筑波大学, 数理物質系, 特別研究員(PD)

研究期間 (年度) 2023-03-08 – 2024-03-31
研究課題ステータス 交付 (2023年度)
配分額 *注記
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2023年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2022年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2021年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
キーワード液液相分離 / 脂質ラフト / ナノバタフライ / 金ナノ粒子
研究開始時の研究の概要

継続課題のため、記入しない。

研究実績の概要

本研究は1)外部との相互作用による液滴性の制御2)脂質膜面上での相分離等の挙動の確認3)ナノテクノロジーによる液滴の生成消滅制御4)1)~3)を組み合わせた液滴内酵素活性化の技術確立による炭酸同化酵素の活性化という4つのモジュールへと切り分けることができる。このうち1)に関しては、独自開発した金ナノ粒子である金ナノバタフライ(GNB)を用いて、液滴の生成消滅を制御するテクノロジーを開発することに成功した。2)に関しては、脂質膜面上の相転移挙動を世界で初めて詳細に観察することに成功した。これらの成果は既にプレプリントとして公開されており、現在論文投稿作業やリバイス作業を行っている。3)については、変形によるギブスエネルギー変化を無視できるガラス表面を用いることにより、ガラス表面の官能基密度や表面状態が液滴や凝集体の相転移に与える影響を詳細に調べることに成功した。また、表面効果と、液滴内部に侵入できる小分子の効果を比較検討し、液滴を用いたデバイス作製における指針を得ることに成功した。3)についてはGNBの添加・液滴内への集積により酵素活性を増大させられるという予備検討結果を得ている。技術面ではタンパク質の取り扱いや量子化学計算にも習熟し、この過程で複数の共著論文がプレプリントに公開されている。タンパク質の取り扱いについては、複雑な系でのリエントラント相分離をコーラとミルクを用いて安価に再現・評価する実験系を共同開発している。量子化学計算に関しては、有機小分子やフラーレン等のナノ材料の物性計算を通して、各種相互作用を正確に見積もる計算系を確立しつつある。主著論文も複数報投稿準備中である。すなわち、液滴を用いた炭酸同化酵素活性化へ向けた足固めが着実に進んでいる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

膜面上での液滴の挙動の精査・液滴生成消滅制御技術の開発・液滴内酵素のナノテクノロジーによる活性化がおおむね順調に進んでおり、プレプリントの公開や論文投稿等も順調に行われている。タンパク質の取り扱いや量子化学計算などの技術会得も順調であり、結果として複数のプレプリントが公開されるなど国民に還元できる成果として発表されつつある。投稿中の論文の他に、既に続報として出版可能な成果も出ている。これらの成果を用いて複数の財団等から研究費を得ており、自身の研究を加速することにも成功している。

今後の研究の推進方策

今年度前半は前述の1)~3)を深化させると共に、続報を含めた論文投稿を行う。量子化学計算やタンパク質の取り扱いなどの技術面も、共同研究の推進などを含めて慣熟する。これらの技術を基に、今年度後半では炭酸同化酵素RubisCOの液滴ナノテクノロジーを用いた活性化に取り組む。

報告書

(2件)
  • 2022 実績報告書
  • 2021 実績報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2023 2022 2021 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 1件、 オープンアクセス 3件、 査読あり 1件) 学会発表 (5件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Reentrant condensation of a multicomponent complex system of biomolecules induced by polyphosphate2023

    • 著者名/発表者名
      Furuki Tomohiro、Nobeyama Tomohiro、Suetaka Shunji、Matsui Ryokei、Fukuoka Tatsuhiko、Arai Munehito、Shiraki Kentaro
    • 雑誌名

      biorxiv

      巻: -

    • DOI

      10.1101/2023.03.02.530750

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • オープンアクセス
  • [雑誌論文] Field Emission Angular Distribution from Single Molecules2023

    • 著者名/発表者名
      Yamada Yoichi、Tsuruta Ryohei、Yamamoto Yuho、Ono Yutaro、Nobeyama Tomohiro、Sasaki Masahiro、Suresh Rahul、Kuklin Artem V.、?gren HAns
    • 雑誌名

      SSRN

      巻: -

    • DOI

      10.2139/ssrn.4392554

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Regulation of the Liquid-liquid Phase-Separated Droplets of Biomacromolecules by Butterfly-Shaped Gold Nanomaterials2022

    • 著者名/発表者名
      Nobeyama Tomohiro、Takata Koji、Mori Megumi、Murakami Tatsuya、Shiraki Kentaro
    • 雑誌名

      Chemrxiv

      巻: -

    • DOI

      10.26434/chemrxiv-2022-mr4tk

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • オープンアクセス
  • [学会発表] Protein Droplet-oriented Gold Manipulator with Butterfly-like Shape; Precise Synthesis, Mechanical Insights, and Applications2022

    • 著者名/発表者名
      Tomohiro Nobeyama , Koji Takata , Tatsuya Murakami , Kentaro Shiraki
    • 学会等名
      IUMRS-ICYRAM2022
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 黄金の蝶々型粒子が駆動する液滴生成消滅ダイナミクスの制御2022

    • 著者名/発表者名
      延山知弘
    • 学会等名
      第62回生命科学夏の学校
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 黄金の蝶々型ナノデバイスによる液滴生成消滅ダイナミクスの制御2022

    • 著者名/発表者名
      延山 知弘
    • 学会等名
      第62回生物物理若手の会夏の学校
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] Control of protein condensation by butterfly-shaped gold nanodevices2022

    • 著者名/発表者名
      Tomohiro Nobeyama , Koji takata , Tatsuya Murakami , Kentaro Shiraki
    • 学会等名
      第60回日本生物物理学会年会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 脂質膜の相分離を制御するナノテクノロジーの開発2021

    • 著者名/発表者名
      延山知弘, 執行航樹, 中辻博貴, 河村奈緒子, 安藤弘宗, 杉山弘, 村上達也
    • 学会等名
      第61回生物物理若手の会夏の学校
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [備考] Researchmap

    • URL

      https://researchmap.jp/NobeyamaTomohiro

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書

URL: 

公開日: 2021-05-27   更新日: 2024-03-26  

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