| 研究課題/領域番号 |
22KJ1115
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| 補助金の研究課題番号 |
22J22409 (2022)
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 基金 (2023)
補助金 (2022) |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 審査区分 |
小区分22060:土木環境システム関連
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
上原 悠太郎 東京大学, 工学系研究科, 特別研究員(DC1)
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| 研究期間 (年度) |
2023-03-08 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
2024年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2023年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2022年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
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| キーワード | 細菌再増殖 / 増殖基質 / 溶存有機物 / 浄水処理 / 水道水 / 精密質量分析 / ノンターゲット分析 / 緑膿菌 / 微生物再増殖 / 都市河川 / 大腸菌 / LC-MS |
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| 研究開始時の研究の概要 |
大腸菌は糞便汚染の指標細菌として広く用いられているが、環境水中で増殖できることが知られている。また、水道水が配管内で滞留すると残留塩素濃度が低下し微生物再増殖が起きることが水管理の問題となっている。本研究は細菌が増殖時に基質として利用する有機物に着目し、採水した試料中での細菌培養と精密質量分析計によるノンターゲット分析を組み合わせることで、実際の細菌再増殖に利用されたと推定される増殖基質候補の網羅的探索を行う。加えて、環境水や浄水処理後の工程水を質量分析することでスクリーニングされた基質の由来や浄水処理での除去状況を調査し、基質除去による細菌再増殖抑制の可能性を検討する。
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| 研究実績の概要 |
申請時の計画では増殖挙動の観察が容易な大腸菌および都市河川水の組み合わせ対象として基質の特定と基質除去による再増殖抑制の実証実験を行う予定だった。しかし、本研究で提案する概念が最も求められているのは上水道分野であること、大腸菌を用いた実験は昨年度までで一定の成果が得られたことから、緑膿菌と水道水を対象に切り替えて実験を実施した。
滅菌処理を施し残留塩素を揮散させた水道水中で緑膿菌を培養した結果、無機培地内で培養した場合と比較し有意な増殖が確認された。緑膿菌は水道水中の溶存有機物を基質として用いて増殖できることが示された。この時消費された有機炭素量は50～100μgC/Lだった。
培養後試料は固相抽出による有機物抽出後、溶存有機物のノンターゲット分析を行った。緑膿菌を植種した試料としていない試料のマススペクトルを比較し、植種した系で検出強度が有意に小さいピーク成分を基質候補としてスクリーニングした。基質候補に対して、ハイブリッドMS/MS分析による構造推定とコクロマトグラフィーを行った結果、サリチル酸と直鎖ジカルボン酸４種の構造が同定された。ジカルボン酸は緑膿菌が唯一の炭素源として利用可能な物質であることが確認された。各物質の水道水中濃度は約1μg/Lだった。
次に浄水場にて各浄水工程水中の有機物をノンターゲット分析し、浄水処理における基質の消長を評価した。水道水原水から浄水まで全工程水で検出され現行の浄水処理によって完全に除去できていない物質、および配水過程において新たに生成されたと推定された物質で本研究で検出された基質候補の約半分を占めた。また、消毒副生成物として発生した有機物の一部は基質として利用されうることが分かった。
精密質量分析によって細菌増殖基質の同定と由来の推定が網羅的かつ分子レベルで実施できた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
2023年度の研究では、高速液体クロマトグラフ-高分解能精密質量分析計(LC-MS)を用いたノンターゲット分析によって、水道水中に存在する緑膿菌増殖基質の候補を多数スクリーニングし、これらが浄水処理においてどのような消長をとっているか挙動を分析した。
今年度は未知の細菌増殖基質を水道水試料から複数同定したほか、基質候補の多くは水道水原水中に存在し現行の浄水処理によって除去できていない物質、もしくは配水過程において新たに生成された物質であると推定された。来年度に細菌増殖基質の由来をより詳細に特定し、浄水手法の改良および配水過程における水質劣化の低減が提案できれば、本研究の最終的な目標である有機物制御による持続的な細菌増殖抑制実証が達成できると期待される。研究そのものについては順調な進展をみせており、また、学会発表は国内外で複数回行っており十分な外部レビューをもたっているが、査読付き学術論文の受理にまでは至っていないため(2)おおむね順調に進展している。とした。
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| 今後の研究の推進方策 |
本研究の最終的な目標は有機物制御による持続的な細菌増殖抑制が実現可能か検証することである。現在までの研究により精密質量分析を用いた分子レベルでの細菌増殖基質の同定と由来の推定が実施できた。次の段階として、これらの分析結果を元に浄水処理の改善を行い、水道水中に含まれる基質として利用される有機物の存在量削減を目指す。例えば、ある基質が塩素注入処理によって意図せず生成されている場合、用いる消毒剤の種類や添加量を変更することによって基質の生成低減が期待できる。ただし、浄水処理手法の変更によって、水道水質基準を満たさなくなることや有害な消毒副生成物が新たに発生すること、浄水場の設備改良工事に莫大な費用がかかることは避けねばならない。これら条件を満足しつつ、基質の生成を抑制できる浄水処理手法やパラメータの設定を検討する。
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