| 研究課題/領域番号 |
22KJ1490
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| 補助金の研究課題番号 |
21J21849 (2021-2022)
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 基金 (2023)
補助金 (2021-2022) |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 審査区分 |
小区分42030:動物生命科学関連
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| 研究機関 | 東京大学 (2023)
信州大学 (2021-2022) |
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研究代表者 |
岩月(中山) 研祐 東京大学, 医科学研究所, 特別研究員(PD)
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| 研究期間 (年度) |
2023-03-08 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
2023年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2022年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2021年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
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| キーワード | 多能性幹細胞 / 始原生殖細胞様細胞 / ラット / エピゲノム |
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| 研究開始時の研究の概要 |
受精卵から始まる個体発生において、着床前から原腸陥入までのステージは、体を構成する全ての細胞に分化できる多能性細胞がダイナミックにその性質を変化させる時期である。多能性幹細胞は、この各時期の多能性状態を反映しつつ、シャーレ上で無限に増殖可能な幹細胞であり、数に限りのある生体由来の細胞に代わって、初期胚発生で進行する未分化性の変遷やその後の体細胞、生殖細胞への運命決定が起こる分子メカニズムを研究するツールとして有用である。そこで本研究では、ラットモデルを用いて着床前から原腸陥入までの発生ステージに対応する多能性幹細胞を樹立し、その未分化性及び多分化能を評価することで、初期胚発生の理解を試みる。
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| 研究実績の概要 |
当研究ではラットの初期胚発生において、多能性細胞が着床前から原腸陥入 (三胚葉分化の開始) までの時期にどのようにして多能性状態をダイナミックに変化させ、発生が進行するのかを理解するため、多能性幹細胞の培養法やその分化誘導法の確立に取り組んできた。1, 2 年目には、ラットの着床後エピブラストから樹立されるエピプラスト幹細胞 (EpiSC) を均一な未分化性を維持しながら安定に維持できる培養法を確立し、その培養法で維持された EpiSC が原腸陥入前の多能性エピブラストに似た遺伝子発現パターンを示すことが明らかとなった。さらに、EpiSC に着床前の多能性細胞で発現する転写因子 Klf4 を強制発現させることで胚性幹細胞様細胞 (ESCLC) へとリプログラミングできること、EpiSC が BMP 刺激によって、原腸陥入前のエピブラストから分化する始原生殖細胞様の細胞へと誘導できることが明らかとなった。
最終年度では、ラット EpiSC から始原生殖細胞様細胞への分化誘導法の確立・改良を通じて、多能性細胞が始原生殖細胞へと運命決定する分子メカニズムの解明や EpiSC から ESCLC へとリプログラミングする培養条件の検討を通じて、ラット ESC で顕著に見られるエピゲノムの異常な消去の原因究明を目指した研究に取り組んだ。その結果、EpiSC の始原生殖細胞様細胞への誘導では、BMP 刺激に加え、Activin-A の刺激が必須であることが明らかとなった。また、ESCLC におけるエピゲノムの異常な消去は、レポーター株を使用することで消去を抑える阻害剤のスクリーニングを試みたが、長期的に維持が可能な阻害剤の特定には至らなかった。このように ESCLC の培養条件を始め、今後も引き続き検討が必要だが、以上の研究成果はラットの初期胚発生および多能性幹細胞の理解に大きく貢献した。
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