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病原性大腸菌におけるTAシステムの選択的遺伝子発現制御についての解析

研究課題

研究課題/領域番号 22KJ2144
補助金の研究課題番号 22J11931 (2022)
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分基金 (2023)
補助金 (2022)
応募区分国内
審査区分 小区分49050:細菌学関連
研究機関大阪大学

研究代表者

海老原 慎也 (2023)  大阪大学, 免疫学フロンティア研究センター, 特別研究員(PD)

特別研究員 海老原 慎也 (2022)  大阪大学, 免疫学フロンティア研究センター, 特別研究員(PD)
研究期間 (年度) 2023-03-08 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2023年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2022年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
キーワード腸管出血性大腸菌 / Toxin-Antitoxinシステム / 酸化ストレス
研究開始時の研究の概要

Toxin-antitoxin (TA)システムは、菌に広く保存されている遺伝子システムであり、ストレス環境に応答して活性化し細菌自身の増殖を抑制することが知られているが、細菌生理における役割は未だ不明である。我々は腸管出血性大腸菌が保有する新規のTAシステム遺伝子ECs5400-5399に着目し、このシステムは実際の発現レベルでは増殖に影響せず遺伝子発現を制御することを示したが、このシステムが活性化する条件についてはまだ不明であった。そこで、本研究はこのTAシステムが活性化する条件を解明することで、TAシステムの細菌生理における役割について明らかにすることを目的に研究を行う。

研究実績の概要

本研究の目的は、腸管出血性大腸菌(EHEC)において新規に見出されたToxin-Antitoxin (TA)システム遺伝子swpABについて、細菌生理における役割と病原性への影響について調べることである。本年度は主にswpABシステムが活性化する環境条件について明らかにすることを目的に研究を行なった。まず初めに細菌を好気培養し経時的にswpABプロモーター活性を測定したところ、増殖相の後期において顕著に活性が上昇した。この上昇が好気培養による活性酸素種(ROS)の蓄積によるものと予想し、ROSの蓄積を阻害するチオ尿素(TU)を培地中に添加したところ、プロモーター活性の上昇が消失した。さらに、ROSの蓄積を誘導する薬剤であるノルフロキサシン(Nor)を増殖に影響しない濃度で培地中に添加すると、プロモーター活性が顕著に増加し、TUの添加により活性上昇が消失した。これらのことから、本システムはROSの蓄積による酸化ストレスによって活性化されることが示唆された。また、SwpA トキシンの直接的な標的であるtirについて、野生株とswpAB変異株においてNorを添加し酸化ストレスを誘導したところ、野生株ではTirの産生量が低下したのに対しswpAB変異株では産生量が変化しなかった。これらのことから、酸化ストレスに応答してSwpA トキシンが活性化されることが示唆された。前年度の報告によりSwpAは増殖に影響しないレベルで遺伝子発現パターンを変化させることが示唆されていることから、swpABシステムは酸化ストレスに応答し遺伝子発現パターンを改変することで、他の菌と比較して有利な生存をもたらす可能性がある。

報告書

(2件)
  • 2023 実績報告書
  • 2022 実績報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて 2024 2023 2022

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] A novel toxin-antitoxin system swpAB alters gene expression patterns and reduces virulence expression in enterohemorrhagic Escherichia coli.2023

    • 著者名/発表者名
      Ebihara S, Yen H, Tobe T.
    • 雑誌名

      Microbiol Immunol.

      巻: 67 号: 4 ページ: 171-184

    • DOI

      10.1111/1348-0421.13054

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 腸管出血性大腸菌が保有するToxin-Antitoxinシステム swpABは酸化ストレスに応答して活性化される2024

    • 著者名/発表者名
      海老原慎也、彦田明日花、小嶋里奈、戸邉亨
    • 学会等名
      第18回日本ゲノム微生物学会年会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Toxin-Antitoxin system alters gene expression patterns and reduces virulence gene expression in EHEC2023

    • 著者名/発表者名
      海老原慎也、顔宏哲、戸邉亨
    • 学会等名
      第96回日本細菌学会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 腸管出血性大腸菌におけるToxin-antitoxinシステムは病原性遺伝子発現を抑制する2022

    • 著者名/発表者名
      海老原慎也、顔宏哲、戸邉亨
    • 学会等名
      第1回総合微生物学研究会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] Toxin-Antitoxin system in enterohaemorrhagic Escherichia coli is induced by sublethal dose of norfloxacin2022

    • 著者名/発表者名
      海老原慎也、彦田明日花、小嶋里奈、戸邉亨
    • 学会等名
      第75回日本細菌学会関西支部
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書

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公開日: 2022-04-28   更新日: 2024-12-25  

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