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クロロフィル蛍光を用いた微細藻類のアンモニア阻害検知法の研究開発

研究課題

研究課題/領域番号 22KJ3199
補助金の研究課題番号 22J01380 (2022)
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分基金 (2023)
補助金 (2022)
応募区分国内
審査区分 小区分40030:水圏生産科学関連
研究機関国立研究開発法人海洋研究開発機構

研究代表者

岸 正敏  国立研究開発法人海洋研究開発機構, 地球環境部門(地球表層システム研究センター), 特別研究員(PD)

研究期間 (年度) 2023-03-08 – 2025-03-31
研究課題ステータス 交付 (2023年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2024年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2022年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
キーワード微細藻類 / アンモニア / 蛍光 / モニタリング / クロロフィル蛍光誘導期現象 / 資源循環 / 排水 / 廃棄物循環 / 多変量解析
研究開始時の研究の概要

初年度は実験環境の整備と①「光・高温・阻害物質等の多種阻害の判別」を実施する。実験環境整備として、海洋研究開発機構が有しない「パルス変調蛍光測定装置」および「強力LEDライト」を購入する。①では、これらの機材を用いて、選定した藻類の異なる阻害下のクロロフィル蛍光特性を測定する。実験条件は複数の阻害条件 (光強度4条件、温度3条件、NH3濃度 3条件、Zn濃度2条件; 計72条件) と暗順応時間(3条件) を合わせて合計216条件とする。本実験により藻類単独条件でNH3阻害を特異的に表現する蛍光分析を明らかにする。

研究実績の概要

排水に高濃度で含まれるアンモニアは、藻類の良好な栄養源になりうるが、高濃度で増殖を阻害する。本研究ではクロロフィル蛍光による藻体活性モニタリングに基づいたアンモニア供給制御によるアンモニア毒性の回避を目指している。しかし、クロロフィル蛍光で検知できるアンモニア毒性が回復可能な程度かどうか、またアンモニア毒性以外の異なる増殖阻害(e.g., 強光、高温)との区別が可能か、などの懸念が存在する。
そこで2023年度は、(1) 3種藻類のアンモニア毒性からの回復特性評価と、(2)複合阻害条件でのクロロフィル蛍光特性解析の2つを行った。
回復特性評価において、藻類株には、緑藻Chlorella vulgaris SAG 211-11b、緑藻Acutodesmus obliquus SAG 276-3a、およびシアノバクテリア Arthrospira platensis SAG 21.99の3種を用いた。アンモニア濃度を5条件設け、温度25°C、光量子束密度100 μmol photons m-2 s-1で13.5時間暴露させた。その後、遠心分離または自然ろ過により藻体を回収してNH3無添加培地で洗浄後、回収藻体を同培地で培養し、各種蛍光パラメーター、光学密度、pHを測定した。その結果、全3種の藻類において、NH3添加直後とNH3除去直後の数分の間にそれぞれ蛍光パラメーターの急激な変化が見られ、クロロフィル蛍光が迅速にアンモニア毒性状態を反映することが示唆された。増殖速度もほとんどの条件でNH3除去後数時間後に回復が確認されたが、一部の高NH3条件では回復遅延や完全な回復に至らないケースが見られた。これらの結果から、蛍光によるNH3毒性の検知可能域は阻害回復域よりも遥かに低く、蛍光により回復可能域を判定しアンモニア制御を行える可能性が支持された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

実験環境整備に時間がかかり、一部の実験が実施できなかった。一方で、整備後の進捗は順調であり、次年度内の目標達成を見込んでいる。

今後の研究の推進方策

次年度は多種阻害判別の実験継続実施と、多変量解析を用いた判別法の開発、およびNH3供給制御実験を実施する。

報告書

(2件)
  • 2023 実施状況報告書
  • 2022 実績報告書
  • 研究成果

    (15件)

すべて 2023 2022 その他

すべて 国際共同研究 (4件) 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (8件) (うち国際学会 4件)

  • [国際共同研究] University of Valladolid(スペイン)

    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
  • [国際共同研究] Centrum Algatech(チェコ)

    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
  • [国際共同研究] バリャドリード大学(スペイン)

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [国際共同研究] チェコ科学アカデミー藻類技術研究所(チェコ)

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [雑誌論文] A novel process for the production of Chromochloris zofingiensis through dark-induced multi-nuclei formation2023

    • 著者名/発表者名
      Chowdhary Anupreet Kaur、Kishi Masatoshi、Toda Tatsuki
    • 雑誌名

      Algal Research

      巻: 71 ページ: 103053-103053

    • DOI

      10.1016/j.algal.2023.103053

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Free ammonia tolerance of cyanobacteria depends on intracellular pH2023

    • 著者名/発表者名
      Sekine Mutsumi、Yoshida Akari、Kishi Masatoshi、Furuya Ken、Toda Tatsuki
    • 雑誌名

      Biocatalysis and Agricultural Biotechnology

      巻: 47 ページ: 102562-102562

    • DOI

      10.1016/j.bcab.2022.102562

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Energy-efficient algal culture through aeration-less oxygen removal in a gas-permeable bag photobioreactor2023

    • 著者名/発表者名
      Kishi M., Tanaka K., Tagawa M., Akizuki S., Toda T.
    • 雑誌名

      Algal Research

      巻: 69 ページ: 102959-102959

    • DOI

      10.1016/j.algal.2022.102959

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Fast-growing native Limnospira fusiformis isolated from Soda Lakes in Ethiopia2023

    • 著者名/発表者名
      Woldie A, Chowdhary AK, Sekine M, Kishi M, Kurosawa N, Toda T
    • 学会等名
      6th International Post-Graduate Conference on Biotechnology 2023 (IPCB 2023, Singapore)
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Effect of shredding method and compression pressure on the water hyacinth for nutrient and energy recovery by anaerobic digestion2023

    • 著者名/発表者名
      Fujiwara, M, A. Kaneda, N. Mizuno, M. Kishi, S. Sato, T. Toda
    • 学会等名
      9th IWA-ASPIRE Conference and Exhibition 2023 (IWA-ASPIRE 2023, Kaohsiung, Chinese Taipei)
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ホテイアオイの粉砕・圧搾処理後の液分の上向流式嫌気性汚泥床法(UASB)による高速処理2023

    • 著者名/発表者名
      藤原正明, 金田明日香, 岸正敏, 佐藤伸二郎, 戸田龍樹
    • 学会等名
      第58回日本水環境学会年会 (九州大学伊都キャンパス) 2024年3月
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
  • [学会発表] 北西太平洋の亜熱帯-亜寒帯における藻類アンモニア応答の評価2023

    • 著者名/発表者名
      岸正敏, 杉江恒二, 松本和彦, 野口真希, 藤木徹一
    • 学会等名
      第57回日本水環境学会年会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 「みらい」MR22-03航海概要報告 -春季西部北太平洋における東アジア大陸起源物質の分布と生態系への影響-2023

    • 著者名/発表者名
      杉江恒二, 藤木徹一, 木元克典, 松本和彦, 竹谷文一, 脇田昌英, 中野善之, 岸正敏, 喜多村稔, 金谷有剛, 佐々木雄亮, 塩崎拓平, Hongwei Q., 下島公紀, 大井麻由, 刀祢館奈々子, 山口三亜佳, 三野義尚
    • 学会等名
      海と地球のシンポジウム
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] クロロフィル蛍光誘導期現象の多変量解析による藻類性状の解析2022

    • 著者名/発表者名
      岸正敏
    • 学会等名
      日本プランクトン学会・日本ベントス学会合同大会 自由集会「クロロフィル蛍光を用いた藻類研究の最前線II」
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] Prospect of a gas-permeable bag photobioreactor for energy- and cost-efficient algal mass cultivation2022

    • 著者名/発表者名
      Kishi M., Lee S., Nagatsuka K., Toda T.
    • 学会等名
      COSMOS International Conference 2022 (CIC 2022)
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Changes in Cell Growth and Astaxanthin Accumulation in Chromochloris zofingiensis by Combination of Different Nutritional Modes2022

    • 著者名/発表者名
      Chowdhary A.K., Kishi M., Toda T.
    • 学会等名
      COSMOS International Conference 2022 (CIC 2022)
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会

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公開日: 2022-04-28   更新日: 2024-12-25  

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