| 研究課題/領域番号 |
22KK0106
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| 研究種目 |
国際共同研究加速基金(国際共同研究強化(B))
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
中区分46:神経科学およびその関連分野
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
谷本 拓 東北大学, 生命科学研究科, 教授 (70714955)
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| 研究分担者 |
市之瀬 敏晴 東北大学, 学際科学フロンティア研究所, 助教 (20774748)
山方 恒宏 東北大学, 生命科学研究科, 准教授 (50716248)
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| 研究期間 (年度) |
2022-10-07 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
20,150千円 (直接経費: 15,500千円、間接経費: 4,650千円)
2025年度: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2024年度: 7,020千円 (直接経費: 5,400千円、間接経費: 1,620千円)
2023年度: 7,020千円 (直接経費: 5,400千円、間接経費: 1,620千円)
2022年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
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| キーワード | 翻訳制御 / ストレス応答 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
宇宙ステーションなどの極限環境では、超短周期で起こる昼夜のリズムのため、睡眠維持障害型不眠症が顕著に増加する。しかし、極限明暗リズムが及ぼす神経系の機能変容とそのメカニズムついての知見は乏しい。
国際共同研究者であるChang Liu博士は、超短周期の極限明暗条件にショウジョウバエを暴露し、睡眠ストレスと睡眠構造の変化のモデルを新たに確立した。本研究では、超短周期の明暗リズムが神経細胞・グリア細胞でのタンパク翻訳に及ぼす影響を網羅的に解析する。
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| 研究実績の概要 |
本研究では、ショウジョウバエを慢性的な断眠ストレス下に暴露し、細胞種特異的な比較トランスラトーム・トランスクリプトーム解析を行う。リボソームプロファイリングにより翻訳効率が変化するタンパク質群を同定し、睡眠の断片化に伴う生体内の生理学的変化を理解する。
今年度は、微量の標的細胞から翻訳中のmRNAを抽出する技術を確立し、細胞種特異的なリボソームプロファイリングの実施に向けた実験パイプラインの整備を進めた。さらに共同研究者であるChang Liu博士（Shenzhen Institutes of Advanced Technology, Chinese Academy of Sciences）と協働で、睡眠阻害実験のためのセットアップを確立した。この実験系を用いて、断眠ストレスを与えた際のアクティブゾーンにおける内在性シナプスタンパク質の動態を解析した。代表的なアクティブゾーンの構造タンパクであるBruchpilot (Brp)に焦点を当て、SplitGFP 再構成技術を活用した標的細胞特異的な内在性タンパクの蛍光標識法を用いて、異なる神経細胞種間においてBrpの細胞内局在を可視化した。その結果、Brpの空間分布が断眠状態において可塑的に変化することを見出し、短周期の睡眠阻害によるストレスがシナプスタンパクへ及ぼす影響を明らかにした。さらに、共同研究者のLiu博士を日本に招聘し、今後の研究方針と渡航計画について議論を深めた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
今年度の目標をおおむね達成し、着実に研究成果が得られている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今年度確立した少数の細胞群からのリボソームプロファイリング法を用いて、トランスジーン発現細胞から特異的に翻訳中のmRNAを回収し、ストレスの翻訳応答をプロファイルする。並行して断眠ストレスを介在する候補分子を探索し、その産生酵素や受容体の機能を阻害したトランスジェニック系統を用いて、睡眠阻害により誘導されるBrpの細胞内局在の可塑性を検証する。また、シナプスタンパクの可塑的変化が断眠ストレス特異的であるのか、あるいは飢餓など別種の環境ストレスにおいても生じるのかを明らかにするため、各種ストレスがアクティブゾーンの分子構造へ与える作用を同様の実験系を用いて比較検討する。
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