コムギ翻訳系の構成的解析

• 研究課題/領域番号: 23310141
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: システムゲノム科学
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 高井 和幸 愛媛大学, 理工学研究科, 教授 (40260848)
• 研究協力者: 久松 啓伍 ; 冨川 千恵 ; 岸本 達郎 ; 菅野 圭佑 ; 上野 秀道 ; 近藤 真輝 ; 徳丸 達也 ; 野中 拓
• 研究期間 (年度): 2011-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 19,630千円 (直接経費: 15,100千円、間接経費: 4,530千円); 2014年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円); 2013年度: 3,380千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 780千円); 2012年度: 3,380千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 780千円); 2011年度: 9,620千円 (直接経費: 7,400千円、間接経費: 2,220千円)
• キーワード: コムギ / タンパク質合成 / 再構成 / 組換え発現 / タンパク質合成系 / 翻訳 / 翻訳因子 / リボソーム / 合成生物学 / 植物 / 無細胞再構成

研究成果の概要

真核型翻訳反応について，因子を組み立てて系を組み上げるアプローチで理解することに役立てる目的で，コムギ胚芽由来の翻訳因子をひとつひとつ単離精製することを試みた．その結果，リボソーム，翻訳伸長因子2種，翻訳開始因子14種のうち7種，翻訳終結因子2種のうち1種，アミノアシルtRNA合成酵素（ARS）20種のうち4種については，最低限の純度の標品を得ることができた．ARSについては予想外に難しいことがわかった．また，コムギの大規模cDNA解析プロジェクトNBRP-wheatの成果物にeRF3に対応するもののみが含まれないことを確認し，それをコムギ胚芽からクローニングした．

研究成果

• [学会発表] Toward In Vitro Reconstitution of the Protein Synthesis System from Wheat. (2014)
  • 著者名/発表者名: K. Takai
  • 学会等名: 8th International Symposium on Nanomedicine - Fusion of Nanomedicine and Molecular Science of Photosynthesis -
  • 発表場所: 愛媛大学，愛媛県松山市
  • 年月日: 2014-12-05
  • 招待講演
• [学会発表] SfiI認識部位を導入した大腸菌共発現ベクターの試み (2014)
  • 著者名/発表者名: 高井和幸
  • 学会等名: 「細胞を創る」研究会7.0
  • 発表場所: 東京大学，東京都
  • 年月日: 2014-11-13 – 2014-11-14
• [学会発表] 大腸菌を用いたコムギ由来翻訳開始因子eIF2Bの調製の試み (2014)
  • 著者名/発表者名: 上野秀道，高井和幸，冨川千恵
  • 学会等名: 「細胞を創る」研究会7.0
  • 発表場所: 東京大学，東京都
  • 年月日: 2014-11-13 – 2014-11-14
• [学会発表] コムギ由来翻訳開始因子eIF2の調製法の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 野中拓，久松啓伍，冨川千恵，高井和幸
  • 学会等名: 「細胞を創る」研究会6.0
  • 発表場所: 鶴岡
• [学会発表] コムギ由来翻訳開始因子eIF2の調製法の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 野中拓，久松啓伍，冨川千恵，高井和幸
  • 学会等名: 第15回日本RNA学会年会
  • 発表場所: 松山
• [学会発表] コムギ由来タンパク質合成関連因子の一次配列情報 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高井和幸，久松啓伍
  • 学会等名: 「細胞を創る」研究会6.0
  • 発表場所: 東京工業大学すずかけ台キャンパス
• [学会発表] Preparation of eukaryotic translation factors for reconstitution of protein synthesis (2011)
  • 著者名/発表者名: Keigo Hisamatsu, Tomio Ogasawara, Yaeta Endo, Kazuyuki Takai
  • 学会等名: International Symposium on SYNTHESIZING LIFE AND BIOLOGICAL SYSTEMS & The Fourth Annual Meeting of the Japanese Society for Cell Synthesis Research
  • 発表場所: 千里ライフサイエンスセンター(吹田)
• [学会発表] タンパク質合成の再構成に向けた真核生物翻訳因子の調製 (2011)
  • 著者名/発表者名: 久松啓伍, 小笠原富夫, 遠藤弥重太, 高井和幸
  • 学会等名: 第6回無細胞生命科学研究会
  • 発表場所: 兵庫県立大学書写記念会館(姫路)
• [備考] 高井研究室@愛媛大学
  • URL: https://sites.google.com/site/takailabopen/
• [備考] ゆるぎないゆらぎ仮説
  • URL: http://takailab.blog115.fc2.com/
• [備考]
  • URL: https://sites.google.com/site/takailabopen/
• [備考]
  • URL: http://takailab.blog115.fc2.com/