糖タンパク質糖鎖合成障害の実態解明を核とする疾患グライコプロテオミクス研究

• 研究課題/領域番号: 23390081
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 病態医化学
• 研究機関: 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立母子保健総合医療センター(研究所)
• 研究代表者: 和田 芳直 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立母子保健総合医療センター(研究所), その他部局等, 研究所長 (00250340)
• 研究分担者: 田尻 道子 大阪府立母子保健総合医療センター(研究所), 代謝部門, 流動研究員 (70581312) ; 渋川 幸直 大阪府立母子保健総合医療センター(研究所), 代謝部門, 主任研究員 (90393264)
• 研究期間 (年度): 2011-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 19,630千円 (直接経費: 15,100千円、間接経費: 4,530千円); 2014年度: 4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円); 2013年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2012年度: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2011年度: 6,110千円 (直接経費: 4,700千円、間接経費: 1,410千円)
• キーワード: 糖鎖 / 糖タンパク質 / 先天性代謝異常症 / 代謝異常 / 質量分析 / グライコプロテオミクス / 糖タンパク / プロテオーム / 診断

研究成果の概要

N型とO型それぞれの糖タンパク質糖鎖分析を短時間に行える方法を開発して、新しい分子診断ワークフローを完成した。このワークフローは海外からの診断あるいは詳細分析依頼にも対応し、多くの国際共同研究成果共著を得た。
2005年に開始したCDG分子診断支援活動を継続し、2014年3月末までに1,053名を分析を行い、PMM2-CDGを４家系、ALG6-CD, B4GAL1-CDG, MAN1B1-CDGを各１家系、責任遺伝子不明のCDG-Iを２家系、ARCL2を２家系の計11家系を診断した。すなわち、原因不明の発達遅滞の１％がCDGであった。

研究成果

• [雑誌論文] Mutations in COG2 encoding a subunit of the conserved oligomeric golgi complex cause a congenital disorder of glycosylation (2015)
  • 著者名/発表者名: 17.Kodera H, Ando N, Yuasa I, Wada Y, Tsurusaki Y, Nakashima M, Miyake N, Saitoh S, Matsumoto N, Saitsu H
  • 雑誌名: Clin Genet 巻: 87 号: 5 ページ: 455-460
  • DOI: 10.1111/cge.12417
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transferrin variants: Pitfalls in the diagnostics of Congenital disorders of glycosylation (2015)
  • 著者名/発表者名: 18.Zühlsdorf A, Park JH, Wada Y, Rust S, Reunert J, DuChesne I, Grüneberg M, Marquardt T
  • 雑誌名: Clin Biochem 巻: 1-2 号: 1-2 ページ: 11-13
  • DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2014.09.022
  • 査読あり
• [雑誌論文] The novel transferrin E592A variant impairs the diagnostics of congenital disorders of glycosylation (2014)
  • 著者名/発表者名: 16.Park JH, Zühlsdorf A, Wada Y, Roll C, Rust S, Du Chesne I, Grüneberg M, Reunert J, Marquardt T.
  • 雑誌名: Clin Chim Acta 巻: 436C ページ: 135-139
  • DOI: 10.1016/j.cca.2014.05.011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chondroitin sulfate proteoglycan tenascin-R regulates glutamate uptake by adult brain astrocytes (2014)
  • 著者名/発表者名: Okuda H, Tatsumi K, Morita S, Shibukawa Y, Korekane H, Horii-Hayashi N, Wada Y, Taniguchi N, Wanaka A.
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 289 号: 5 ページ: 2620-2631
  • DOI: 10.1074/jbc.m113.504787
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Multiple phenotypes in phosphoglucomutase 1 deficiency (2014)
  • 著者名/発表者名: Tegtmeyer LC, et al.
  • 雑誌名: N Engl J Med 巻: 370 号: 6 ページ: 533-542
  • DOI: 10.1056/nejmoa1206605
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interlaboratory Study on Differential Analysis of Protein Glycosylation by Mass Spectrometry: the ABRF Glycoprotein Research Multi-Institutional Study 2012 (2013)
  • 著者名/発表者名: Leymarie N, et al.
  • 雑誌名: Mol Cell Proteomics 巻: 12 号: 10 ページ: 2935-2951
  • DOI: 10.1074/mcp.m113.030643
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutations in GMPPA Cause a Glycosylation Disorder Characterized by Intellectual Disability and Autonomic Dysfunction (2013)
  • 著者名/発表者名: Koehler K, et al.
  • 雑誌名: Am J Hum Genet 巻: 93 号: 4 ページ: 727-734
  • DOI: 10.1016/j.ajhg.2013.08.002
  • 査読あり
• [雑誌論文] De novo mutations in SLC35A2 encoding a UDP-galactose transporter cause early-onset epileptic encephalopathy (2013)
  • 著者名/発表者名: Kodera H, Nakamura K, Osaka H, Maegaki Y, Haginoya K, Mizumoto S, Kato M, Okamoto N, Iai M, Kondo Y, Nishiyama K, Tsurusaki Y, Nakashima M, Miyake N, Hayasaka K, Sugahara K, Yuasa I, Wada Y, Matsumoto N, Saitsu H.
  • 雑誌名: Hum Mutat 巻: 34 号: 12 ページ: 1708-1714
  • DOI: 10.1002/humu.22446
  • 査読あり
• [雑誌論文] Decreased sialylation of IgA1 O-glycans associated with pneumococcal hemolytic uremic syndrome (2013)
  • 著者名/発表者名: Aoki H, Shiomi M, Ikeda T, Ishii T, Shimizu N, Togawa M, Okamoto N, Kadoya K, Wada Y.
  • 雑誌名: Pediatr Int 巻: 55 号: 6
  • DOI: 10.1111/ped.12166
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppression of heregulin beta signaling by single N-glycan deletion mutant of soluble ErbB3 (2013)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M, Hasegawa Y, Ikeda Y, Wada Y, Tajiri M, Ariki S, Takamiya R, Nishitani C, Araki M, Yamaguchi Y, Taniguchi N, Kuroki Y.
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 288 号: 46 ページ: 32910-32921
  • DOI: 10.1074/jbc.m113.491902
  • 査読あり
• [雑誌論文] Deficiency of N-acetylgalactosamine in O-linked oligosaccharides of IgA is a novel biologic marker for inflammatory bowel diseases. (2012)
  • 著者名/発表者名: InoueT, Miyoshi E, et al.
  • 雑誌名: IBD Journal 巻: 18(9) 号: 9 ページ: 1723-34
  • DOI: 10.1002/ibd.22876
  • 査読あり
• [雑誌論文] Absence of post-phosphoryl modification in dystroglycanopathy mouse models and wild-type tissues expressing a non-laminin binding form of α-dystroglycan (2012)
  • 著者名/発表者名: Kuga A
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 287 号: 12 ページ: 9560-9567
  • DOI: 10.1074/jbc.m111.271767
  • 査読あり
• [雑誌論文] N-Glycans of SREC-I(scavenger receptorexpressed by endothelial cells): Essential role for ligand binding, traffickingand stability (2012)
  • 著者名/発表者名: Sano, M., Korekane, H., Ohtsubo, K., Yamaguchi, Y., Kato, M., Shibukawa, Y., Tajiri, M., Adachi, H., Wada, Y., Asahi, M. and Taniguchi, N
  • 雑誌名: Glycobiology 巻: 22 号: 5 ページ: 714-724
  • DOI: 10.1093/glycob/cws010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Brd2 is required for cell cycle exit and neuronal differentiation through the E2F1 pathway in mouse neuroepithelial cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Mami Tsume, et al.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 425 号: 4 ページ: 762-768
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2012.07.149
  • 査読あり
• [雑誌論文] Label-Free Analysis of O-glycosylation Site-Occupancy Based on the Signal Intensity of Glycopeptide/Peptide Ions (2012)
  • 著者名/発表者名: Wada Y
  • 雑誌名: Mass Spectrometry 巻: 1 号: 2 ページ: A0008-A0008
  • DOI: 10.5702/massspectrometry.A0008
  • NAID: 10031126345
  • ISSN: 2186-5116, 2187-137X
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mass spectrometry of apolipoprotein C-III, a simple analytical method for mucin-type O-glycosylation and its application to an autosomal reces sive cutis laxa type-2(ARCL2) patient (2012)
  • 著者名/発表者名: Wada Y, Kadoya M, Okamoto N
  • 雑誌名: Glycobiology 巻: 22 号: 8 ページ: 1140-1144
  • DOI: 10.1093/glycob/cws086
  • 査読あり
• [雑誌論文] O-glycosylated IgA rheumatoid factor induces IgA deposits and glomerulonephritis (2012)
  • 著者名/発表者名: Otani M, Nakata J, Kihara M, Leroy V, Moll S, Wada Y, Izui S
  • 雑誌名: J Am Soc Nephrol 巻: 23 号: 3 ページ: 438-446
  • DOI: 10.1681/asn.2011070701
  • 査読あり
• [雑誌論文] Infrared matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry for quantification of glycosaminoglycans and gangliosides (2011)
  • 著者名/発表者名: Tajiri M, Wada Y
  • 雑誌名: Int.J.Mass Spectrom. 巻: 305 号: 2-3 ページ: 164-169
  • DOI: 10.1016/j.ijms.2010.10.029
  • 査読あり
• [学会発表] Mass Spectrometric Screening of Congenital Disorders of Glycosylation in Japan (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshinao Wada
  • 学会等名: ASMS 30th Asilomar Conference on Mass Spectrometry, Advances in Glycomics and Glycoproteomics: Methods and Applications
  • 発表場所: Asilomar, CA, USA
  • 年月日: 2014-10-10 – 2014-10-14
• [学会発表] Mass spectrometric screening of congenital disorders of glycosylation (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshinao Wada
  • 学会等名: 5th Asia Oseania Mass Spectrometry Conference & the 33rd Chinese Mass spectrometry Society Annual Conference
  • 発表場所: Beijing, China
  • 年月日: 2014-07-15 – 2014-07-19
  • 招待講演
• [学会発表] 可溶型ErbB3糖鎖欠損変異体とラパチニブのヘレグリンシグナル抑制作用における相乗効果 (2013)
  • 著者名/発表者名: 高橋素子，長谷川喜弘，有木茂，高宮里奈，和田芳直，田尻道子，黒木由夫
  • 学会等名: 第86回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] The More than Sixty-Year History of Mass Spectrometry in Japan (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshinao Wada
  • 学会等名: 61st Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics
  • 発表場所: ミネアポリス(米国)
  • 招待講演
• [学会発表] Ion Mobility Mass Spectrometry of IgG Fc Glycopeptides from Different Subclasses (2013)
  • 著者名/発表者名: Michiko Tajiri, Feifei Zhu, Maissa M. Gaya, Yoshinao Wada, David E. Clemmer
  • 学会等名: 61st Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics
  • 発表場所: ミネアポリス(米国)
• [学会発表] 糖ペプチドのイオンモビリティー質量分析と分子力学法を用いたコンフォメーション探索 (2013)
  • 著者名/発表者名: 田尻道子，竹内孝江，Feifei Zhu，Maissa M. Gaya，本郷やよい，中村健道，廣瀬賢治，David E. Clemmer，和田芳直
  • 学会等名: 第61回質量分析総合討論会
  • 発表場所: つくば
• [学会発表] Ion mobility mass spectrometry and MM conformational search of glycopeptides (2013)
  • 著者名/発表者名: Michiko Tajiri, Takae Takeuchi, Yoshinao Wada
  • 学会等名: 5th JCS International Symposium on Theoretical Chemistry
  • 発表場所: 奈良
• [学会発表] 可溶型ErbB受容体によるヘレグリンシグナル抑制機構 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高橋素子、長谷川喜弘、西谷千明、有木茂、和田芳直、田尻道子、黒木由夫
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2012-12-16
• [学会発表] 細胞融合制御因子カルポニン3の生理的役割の解明 (2012)
  • 著者名/発表者名: 渋川幸直、山崎奈津子、大門江津子、木村-吉田千春、持田京子、松尾勲、和田芳直
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2012-12-15
• [学会発表] GAPDHのTransglutaminase 2依存的脱アミド化によるBeWo細胞の細胞融合 (2012)
  • 著者名/発表者名: 岩井香織、渋川幸直、山崎奈津子、角谷真智子、和田芳直
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2012-12-15
• [学会発表] プロゲステロン刺激によって脱落膜化する子宮内膜細胞株の樹立 (2012)
  • 著者名/発表者名: 中村織江、和田芳直
  • 学会等名: 第27回日本免疫学会総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2012-12-08
• [学会発表] 糖ペプチドのMALDI MSによるO型糖鎖付加率の算定とその応用 (2012)
  • 著者名/発表者名: 和田芳直, 角谷真知子
  • 学会等名: 第37回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2012-10-25
• [学会発表] Electron transfer dissociation of protonated disulfide linked peptides and analogs without S-S bond (2012)
  • 著者名/発表者名: Shigeo Hayakawa, Shinya Matsumoto, Michisato Toyoda, Yasushi Shigeri, Michiko Tajiri, Yoshinao Wada
  • 学会等名: 19^<th> International Mass Spectrometry Conference
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2012-09-20
• [学会発表] Ion mobility mass spectrometry of IgG Fc glycopeptides from different subclasses (2012)
  • 著者名/発表者名: Michiko Tajiri, Yayoi Hongo, Takemichi Nakamura, Kenji Hirose, Yoshinao Wada
  • 学会等名: 19^<th> International Mass Spectrometry Conference
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2012-09-19
• [学会発表] Evaluation of Pt-deposited Porous Alumina Target Plate with MALDI Spiral-TOFMS (2012)
  • 著者名/発表者名: Takafumi Sato, Kanae Teramoto, Yoshihisa Ueda, Tomohiko Tamura, Moriyuki Hamada, Ken-Ichiro Suzuki, Yoshinao Wada, Takashi Yanagishita, Hideki Masuda
  • 学会等名: 19^<th> International Mass Spectrometry Conference
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2012-09-17
• [学会発表] 糖タンパク質糖鎖プロファイルからの疾患解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 和田芳直
  • 学会等名: 第8回臨床プロテオーム研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2012-05-12
• [学会発表] 紫外および赤外レーザーによるマトリックス支援レーザー脱離イオン化MALDIマススペクトルの特徴について (2011)
  • 著者名/発表者名: 和田芳直
  • 学会等名: 日本質量分析学会第58回イオン反応研究会
  • 発表場所: 堺(招待講演)
  • 年月日: 2011-12-03
• [学会発表] O型糖鎖プロファイルの恒常性とその変化要因について (2011)
  • 著者名/発表者名: 和田芳直
  • 学会等名: 第3回臨床メタボロミクス研究会
  • 発表場所: 神戸(招待講演)
  • 年月日: 2011-10-25
• [学会発表] Mass Spectrometry for Clinical Glycoproteomics (2011)
  • 著者名/発表者名: Wada Y
  • 学会等名: The 14th Beijjing Conference and Exhibition on Instrumental Analysis
  • 発表場所: 中国北京(招待講演)
  • 年月日: 2011-10-14
• [学会発表] 糖ペプチドの質量分析がひらく糖鎖生物学 (2011)
  • 著者名/発表者名: 和田芳直
  • 学会等名: バイオ医薬品サミット
  • 発表場所: 品川(招待講演)
  • 年月日: 2011-10-04
• [学会発表] Fc領域IgG糖ペプチドのイオンモビリティー質量分析に見られるサブクラス間相違 (2011)
  • 著者名/発表者名: 田尻道子、廣瀬賢次、竹内孝江、和田芳直
  • 学会等名: 第59回質量分析総合討論会
  • 発表場所: 吹田
  • 年月日: 2011-09-15
• [学会発表] 先天性糖鎖合成不全症の分子診断プログラム(第4報) (2011)
  • 著者名/発表者名: 和田芳直、角谷真知子、岡本伸彦
  • 学会等名: 第36回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 吹田
  • 年月日: 2011-09-15
• [学会発表] Classical label-free quantitation for glycomics and glycoproteomics (2011)
  • 著者名/発表者名: Y.Wada
  • 学会等名: 2011 Annual meeting of the Korean Society for Mass Spectrometry and the 2nd Asian & Oceanic Mass Spectroemtry Conference
  • 発表場所: 釜山(招待講演)
  • 年月日: 2011-08-19
• [学会発表] Congenital disorder of glycosylation type Icの1女児例 (2011)
  • 著者名/発表者名: 市川和志、角谷真知子、和田芳直、岡本伸彦
  • 学会等名: 第34回日本小児遺伝学会学術集会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-08-11
• [学会発表] Fc領域IgG糖ペプチドのイオンモビリティー質量分析にみられるサブクラス間相違 (2011)
  • 著者名/発表者名: 田尻道子、廣瀬賢治、和田芳直
  • 学会等名: 日本プロテオーム学会2011年大会
  • 発表場所: 新潟
  • 年月日: 2011-07-29
• [学会発表] 糖ペプチドのイオンモビリティMS:N型糖鎖とタンパク骨格のアミノ酸依存的相互作用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 田尻道子、廣瀬賢治、和田芳直
  • 学会等名: 第38回BMSコンファレンス
  • 発表場所: 箱根
  • 年月日: 2011-07-11
• [学会発表] それでもイメージングMSに紫外レーザーを使いますか? (2011)
  • 著者名/発表者名: 田尻道子、和田芳直
  • 学会等名: 第38回BMSコンファレンス
  • 発表場所: 箱根
  • 年月日: 2011-07-11
• [学会発表] 糖タンパク質糖鎖合成不全症の実態がMSによって明らかにされつつある (2011)
  • 著者名/発表者名: 和田芳直
  • 学会等名: 第38回BMSコンファレンス
  • 発表場所: 箱根
  • 年月日: 2011-07-11
• [学会発表] Ion mobility MS of glycopeptides from the Fc regions of different IgG subclasses (2011)
  • 著者名/発表者名: Wada Y、Tajiri M、Hirose K
  • 学会等名: 58th Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics
  • 発表場所: デンバー、米国
  • 年月日: 2011-06-07
• [学会発表] Matrix-assisted laser/desorption ionization using a pulsed infrared laser at 6 μm wavelength (2011)
  • 著者名/発表者名: Wada Y、Tajiri M
  • 学会等名: 国際分析科学会議ICAS2011
  • 発表場所: 京都(招待講演)
  • 年月日: 2011-05-24
• [学会発表] 糖鎖合成不全症にみる糖鎖バイオマーカーへの視点 (2011)
  • 著者名/発表者名: 和田芳直
  • 学会等名: 第61回日本電気泳動学会シンポジウム・第7回日本臨床プロテオーム研究会2011連合大会
  • 発表場所: 山口(招待講演)
  • 年月日: 2011-05-10
• [図書] Mass spectrometry of Glycoproteins (2013)
  • 著者名/発表者名: Wada Y
  • 総ページ数: 339
  • 出版者: springer
• [図書] 現代質量分析学:基礎原理から応用研究まで(DOJIN ACADEMIC SERIES) (2013)
  • 著者名/発表者名: 高山光男(編集), 瀧浪欣彦(編集), 和田芳直(編集), 早川滋雄(編集)
  • 総ページ数: 514
  • 出版者: 化学同人
• [図書] 先天代謝異常症diagnosis at a glance (2011)
  • 著者名/発表者名: 和田芳直
  • 総ページ数: 172
  • 出版者: 診断と治療社
• [備考] 研究内容（大阪府立母子保健総合医療センター 研究所・代謝部門）
  • URL: http://www.mch.pref.osaka.jp/research/molecular/content.html
• [備考]
  • URL: http://www.much.pref.osaka.jp/laboratory/metabolism/
• [備考]
  • URL: http://www.mch.pref.osaka.jp/sub_about/news/hp_news_cdg.html