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ウイルスベクターとジンクフィンガーヌクレアーゼを用いた高効率相同組み換え法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 23500491
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 実験動物学
研究機関東京大学

研究代表者

山口 智之  東京大学, 医科学研究所, 助教 (80392158)

研究期間 (年度) 2011 – 2013
研究課題ステータス 完了 (2013年度)
配分額 *注記
5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2012年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2011年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
キーワードゲノム編集技術 / レンチウイルスベクター / CRISPR-Cas9 / ZFN / TALEN / Cas9/CRISPR / 相同組み換え / CRISPR Cas9 / ウイルスベクター
研究概要

近年、ZFN、TALEN、Cas9-CRISPRなどのゲノム編集技術の進歩により相同組み換えによる遺伝子改変動物作製は飛躍的に容易になった。 これらはNucleaseがゲノム上の特定の場所を切断することで細胞のDNA修復機構が働き、さらには相同組換えを誘導することができるという方法である。これらの方法では複数のコンポーネントを同時に発現させることが必要であり、初代培養細胞などの遺伝子導入が難しい細胞では効果は得られにくいという問題がある。そこで本研究では複数コンポーネントをレンチウイルスベクター上に導入し、高効率な相同組み換え法の開発を目指した。

報告書

(4件)
  • 2013 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2012 実施状況報告書
  • 2011 実施状況報告書
  • 研究成果

    (35件)

すべて 2014 2013 2012 2011 その他

すべて 雑誌論文 (24件) (うち査読あり 10件) 学会発表 (7件) (うち招待講演 3件) 図書 (4件)

  • [雑誌論文] Immortalization of erythroblasts by c-MYC and BCL-XL enables large-scale erythrocyte production from human pluripotent stem cells2013

    • 著者名/発表者名
      Hirose S, Takayama N, Nakamura S, Nagasawa K, Ochi K, Hirata S, Yamazaki S, Yamaguchi T, Otsu M, Sano S, Takahashi N, Sawaguchi A, Ito M, Kato T, Nakauchi H, Eto K
    • 雑誌名

      Stem Cell Reports

      巻: 1 ページ: 499-508

    • NAID

      120005350227

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Recurrent mutations in multiple components of the cohesin complex in myeloid neoplasms2013

    • 著者名/発表者名
      Kon A, Shih LY, Minamino M, Sanada M, Shiraishi Y, Nagata Y, Yoshida K, Okuno Y, Bando M, Nakato R, Ishikawa S, Sato-Otsubo A, Nagae G, Nishimoto A, Haferlach C, Nowak D, Sato Y, Alpermann T, Nagasaki M, Shimamura T, Tanaka H, Chiba K, Yamamoto R, Yamaguchi T, Otsu M, Obara N, Sakata-Yanagimoto M, Nakamaki T, Ishiyama K, Nolte F, Hofmann WK, Miyawaki S, Chiba S, Mori H, Nakauchi H, Koeffler HP, Aburatani H, Haferlach T, Shirahige K, Miyano S, Ogawa S
    • 雑誌名

      Nat Genet

      巻: 45 ページ: 1232-1237

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Generation of transgenic mouse line expressing Kusabira Orange throughout body, including erythrocytes, by random segregation of provirus method2013

    • 著者名/発表者名
      Hamanaka S, Ooehara J, Morita Y, Ema H, Takahashi S, Miyawaki A, Otsu M, Yamaguchi T (Corresponding auther), Onodera M, Nakauchi H
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun

      巻: 435 ページ: 586-591

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Generation of Engraftable Hematopoietic Stem Cells From Induced Pluripotent Stem Cells by Way of Teratoma Formation2013

    • 著者名/発表者名
      Suzuki N, Yamazaki S, Yamaguchi T, Okabe M, Masaki H, Takaki S, Otsu M, Nakauchi H
    • 雑誌名

      Mol Ther

      巻: 21 ページ: 1424-1431

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Blastocyst complementation generates exogenic pancreas in vivo in apancreatic cloned pigs2013

    • 著者名/発表者名
      Matsunari H, Nagashima H, Watanabe M, Umeyama K, Nakano K, Nagaya M, Kobayashi T, Yamaguchi T, Sumazaki R, Herzenberg LA, Nakauchi H
    • 雑誌名

      Proc Natl Acad Sci USA

      巻: 110 ページ: 4557-4562

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Immortalization of erythroblasts by c-MYC and BCL-XL enables large-scale erythrocyte production from human pluripotent stem cells.2013

    • 著者名/発表者名
      Hirose S, Takayama N, Nakamura S, Nagasawa K, Ochi K, Hirata S, Yamazaki S, Yamaguchi T, Otsu M, Sano S, Takahashi N, Sawaguchi A, Ito M, Kato T, Nakauchi H, Eto K.
    • 雑誌名

      Stem Cell Reports.

      巻: 1 ページ: 499-508

    • NAID

      120005350227

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Recurrent mutations in multiple components of the cohesin complex in myeloid neoplasms.2013

    • 著者名/発表者名
      Kon A, Shih LY, Minamino M, Sanada M, Yamaguchi T, Otsu M, Obara N, Sakata-Yanagimoto M, Nakamaki T, Ishiyama K, Nolte F, Hofmann WK, Miyawaki S, Chiba S, Mori H, Nakauchi H, Koeffler HP, Aburatani H, Haferlach T, Shirahige K, Miyano S, Ogawa S.
    • 雑誌名

      Nat Genet.

      巻: 45 ページ: 1232-1237

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Generation of transgenic mouse line expressing Kusabira Orange throughout body, including erythrocytes, by random segregation of provirus method.2013

    • 著者名/発表者名
      Hamanaka S, Ooehara J, Morita Y, Ema H, Takahashi S, Miyawaki A, Otsu M, Yamaguchi T, Onodera M, Nakauchi H.
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun.

      巻: 435 ページ: 586-591

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Generation of Engraftable Hematopoietic Stem Cells From Induced Pluripotent Stem Cells by Way of Teratoma Formation.2013

    • 著者名/発表者名
      Suzuki N, Yamazaki S, Yamaguchi T, Okabe M, Masaki H, Takaki S, Otsu M, Nakauchi H.
    • 雑誌名

      Mol Ther.

      巻: 21 ページ: 1424-1431

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Blastocyst complementation generates exogenic pancreas in vivo in apancreatic cloned pigs.2013

    • 著者名/発表者名
      5. Matsunari H, Nagashima H, Watanabe M, Umeyama K, Nakano K, Nagaya M, Kobayashi T, Yamaguchi T, Sumazaki R, Herzenberg LA, Nakauchi H.
    • 雑誌名

      Proc Natl Acad Sci U S A.

      巻: 110 ページ: 4557-4562

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] 326 generation of a double-transgenic pig with pancreas-specific green and liver-specific red fluorescence2012

    • 著者名/発表者名
      Matsunari H, Nakano K, Kanai T, Sakai R, Watanabe M, Umeyama K, Kobayashi T, Yamaguchi T, Shiota A, Nagaya M, Nakauchi H, Nagashima H
    • 雑誌名

      Reprod Fertil Dev

      巻: 25 ページ: 311-311

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Comparison of gene-trapping efficiency between retroviral and lentiviral vectors in mouse embryonic stem cells2012

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi T, Morikawa A & Miyoshi H
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun

      巻: 425 ページ: 297-303

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Development of an All-in-One Inducible Lentiviral Vector for Gene Specific Analysis of Reprogramming2012

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi T (Corresponding auther), Hamanaka S, Kamiya A, Okabe M, Kawarai M, Wakiyama Y, Umino A, Hayama T, Sato H, Lee YS, Kato-Itoh M, Masaki H, Kobayashi T, Yamazaki S & Nakauchi H
    • 雑誌名

      PLoS One

      巻: 7

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Identification of Rat Rosa26 Locus Enables Generation of Knock-in Rat Lines Ubiquitously Expressing tdTomato2012

    • 著者名/発表者名
      Kobayashi T, Kato-Itoh M, Yamaguchi T, Tamura C, Sanbo M, Hirabayashi M, & Nakauchi H
    • 雑誌名

      Stem Cells Dev

      巻: 21 ページ: 2981-2986

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Generation of kidney from pluripotent stem cells via blastocyst complementation2012

    • 著者名/発表者名
      Usui J, Kobayashi T, Yamaguchi T, Knisely AS, Nishinakamura R, & Nakauchi H
    • 雑誌名

      Am J Pathol

      巻: 180 ページ: 2417-2426

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Homeostasis of hematopoietic stem cells regulated by the myeloproliferative disease associated-gene product Lnk/Sh2b3 via Bcl-xL2012

    • 著者名/発表者名
      Suzuki N, Yamazaki S, Ema H, Yamaguchi T, Nakauchi H, & Takaki S
    • 雑誌名

      Exp Hematol

      巻: 40 ページ: 166-174

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Development of an All-in-One Inducible Lentiviral Vector for Gene Specific Analysis of Reprogramming.2012

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi T, Hamanaka S, Umino A, Hayama T, Sato H, Lee YS, Kato-Itoh M, Masaki H, Kobayashi T, Yamazaki S & Nakauchi H.
    • 雑誌名

      PLoS One.

      巻: 7

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Homeostasis of hematopoietic stem cells regulated by the myeloproliferative disease associated-gene product Lnk/Sh2b3 via Bcl-xL.2012

    • 著者名/発表者名
      Suzuki N, Yamazaki S, Ema H, Yamaguchi T, Nakauchi H, Takaki S.
    • 雑誌名

      Exp Hematol.

      巻: Feb;40(2) ページ: 166-74

    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Nonmyelinating schwann cells maintain hematopoietic stem cell hibernation in the bone marrow niche2011

    • 著者名/発表者名
      Yamazaki S, Ema H, Karlsson G, Yamaguchi T, Miyoshi H, Shioda S, Taketo M.M, Karlsson S, Iwama A, & Nakauchi H
    • 雑誌名

      Cell

      巻: 147 ページ: 1146-1158

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Frequent pathway mutations of splicing machinery in myelodysplasia2011

    • 著者名/発表者名
      Yoshida K, Sanada M, Shiraishi Y, Nowak D, Nagata Y, Yamamoto R, Sato Y, Sato-Otsubo A, Kon A, Nagasaki M, Chalkidis G, Suzuki Y, Shiosaka M, Kawahata R, Yamaguchi T, Otsu M, Obara N, Sakata-Yanagimoto M, Ishiyama K, Mori H, Nolte F, Hofmann WK, Miyawaki S, Sugano S, Haferlach C, Koeffler HP, Shih LY, Haferlach T, Chiba S, Nakauchi H, Miyano S, & Ogawa S
    • 雑誌名

      Nature

      巻: 478 ページ: 64-69

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Generation of germline-competent rat induced pluripotent stem cells2011

    • 著者名/発表者名
      Hamanaka S, Yamaguchi T (Corresponding auther), Kobayashi T, Kato-Ito, M, Yamazaki S, Sato H, Umino A, Wakiyama Y, Arai M, Sanbo M, Hirabayashi M, & Nakauchi H
    • 雑誌名

      PLoS One

      巻: 6

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Nonmyelinating Schwann cells maintain hematopoietic stem cell hibernation in the bone marrow niche.2011

    • 著者名/発表者名
      Yamazaki S, Ema H, Karlsson G, Yamaguchi T, Miyoshi H, Shioda S, Taketo MM, Karlsson S, Iwama A, Nakauchi H.
    • 雑誌名

      Cell

      巻: Nov 23;147(5) ページ: 1146-58

    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Frequent pathway mutations of splicing machinery in myelodysplasia.2011

    • 著者名/発表者名
      Yoshida K, Sanada M, Yamaguchi T, Nakauchi H, Miyano S, Ogawa S.
    • 雑誌名

      Nature

      巻: Sep 11;478(7367) ページ: 64-9

    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Generation of germline-competent rat induced pluripotent stem cells.2011

    • 著者名/発表者名
      Hamanaka S, Yamaguchi T, Kobayashi T, Kato-Itoh M, Yamazaki S, Sato H, Umino A, Wakiyama Y, Arai M, Sanbo M, Hirabayashi M, Nakauchi H.
    • 雑誌名

      PLoS One.

      巻: 6(7)

    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 異種動物体内での臓器構築2014

    • 著者名/発表者名
      山口智之
    • 学会等名
      再生医療学会
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      2014-03-05
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] リプログラマブルラットを用いたin vivo リプログラミングの解析2014

    • 著者名/発表者名
      山口智之
    • 学会等名
      学友会セミナー
    • 発表場所
      東京大学医科学研究所
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 異種動物体内での臓器構築2014

    • 著者名/発表者名
      山口智之
    • 学会等名
      第13回日本再生医療学会
    • 発表場所
      京都国際会議場
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 異種動物体内を利用した多能性幹細胞からの臓器2013

    • 著者名/発表者名
      山口智之
    • 学会等名
      組織再生法動物学会総会
    • 発表場所
      岡山
    • 年月日
      2013-09-26
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 異種動物体内を利用した多能性 幹細胞からの臓器、組織再生法2013

    • 著者名/発表者名
      山口智之
    • 学会等名
      第84回日本動物学会
    • 発表場所
      岡山大学
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] DVELOPMENT OF ALL-IN-ONE INDUCIBLE LENTIVIRAL VECTOR FOR GENE SPECIFIC ANALYSIS OF REPROGRAMMING2012

    • 著者名/発表者名
      Tomoyuki Yamaguchi, Sanae Hamanaka, Tomonari Hayama, Hideyuki Sato, Hideki Masaki, Toshihiro Kobayashi, Satoshi Yamazaki, Hiromitsu Nakauchi
    • 学会等名
      ISSCR 10th Annual Meeting
    • 発表場所
      横浜
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] DVELOPMENT OF ALL-IN-ONE INDUCIBLE LENTIVIRAL VECTOR FOR GENE SPECIFIC ANALYSIS OF REPROGRAMMING2011

    • 著者名/発表者名
      山口智之
    • 学会等名
      国際幹細胞学会(ISSCR)
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2011-06-14
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [図書] 異種動物個体内での臓器再生2014

    • 著者名/発表者名
      山口智之, 中内啓光
    • 出版者
      最新医学
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [図書] 動物利用ヒト臓器再生2014

    • 著者名/発表者名
      山口智之, 中内啓光
    • 出版者
      医学のあゆみ
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [図書] iPS細胞研究の現状と生殖細胞研究との関連2011

    • 著者名/発表者名
      葉山智工, 山口智之, 中内啓光
    • 出版者
      Horm Front Gynecol
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [図書] The generation and maintenance of rat induced pluripotent stem cells

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi T, Hamanaka S, Nakauchi H
    • 出版者
      Methods in Stem Cells and Tissue Repair(in press)
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書

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公開日: 2011-08-05   更新日: 2019-07-29  

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