核酸－タンパク質複合体構造を基盤としたＬＩＮＥの転移プロセスの解明

• 研究課題/領域番号: 23570139
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 真板 宣夫 徳島大学, 疾患酵素学研究センター, 准教授 (00404046)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2012年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2011年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: Ｘ線結晶構造解析 / レトロトランスポゾン / 結晶構造解析

研究概要

LINEの機能を構造生物学的アプローチにより解明するため，結晶構造解析を目的とする．ORF2pの精製可能で安定なコンストラクトの再考を行ったが，これまでのSart1-ORF2p全長よりも発現量および安定性が改善されるものは見いだせなかった．また，大腸菌を用いた場合，コドン頻度による発現タンパクの不安定化が考慮される為，より天然の環境に近い昆虫細胞を用いた発現系を試行した．Sf9を用いて Sart1全長を発現させたところSart1-ORF1pの発現は確認できたが，ORF2pは殆ど見られず，またORF1pも可溶画分に回収されなかった．

研究成果

• [雑誌論文] Structural basis for simultaneous recognition of an O-glycan and its attached peptide of mucin family by immune receptor PILRα. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kuroki K, Wang J, Ose T, Yamaguchi M, Tabata S, Maita N, Nakamura S, Kajikawa M, Kogure A, Satoh T, Arase H, Maenaka K.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A. 巻: 111(24) 号: 24 ページ: 8877-8882
  • DOI: 10.1073/pnas.1324105111
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Structural and clinical implications of amino acid substitutions in α-L-iduronidase: Insight into the basis of mucopolysaccharidosis type I (2014)
  • 著者名/発表者名: Seiji Saito, Kazuki Ohno, Nobuo Maita, Hitoshi Sakuraba
  • 雑誌名: Molecular Genetics and Metabolism 巻: 111 号: 2 ページ: 107-112
  • DOI: 10.1016/j.ymgme.2013.10.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Observation of the controlled assembly of preclick components in the in situ click chemistry generation of a chitinase inhibitor (2013)
  • 著者名/発表者名: Hirose T, Maita N, Taniguchi H, Sharpless KB, Omura S, Sunazuka T
  • 雑誌名: Proc.Natl.Acad.Sci. USA. 巻: 110 号: 40 ページ: 15892-15897
  • DOI: 10.1073/pnas.1315049110
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human α-L-iduronidase uses its own N-glycan as a substrate-binding and catalytic module (2013)
  • 著者名/発表者名: Maita N, Tsukimura T, Taniguchi T, Saito S, Ohno K, Taniguchi H, Sakuraba H
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 巻: 110 号: 36 ページ: 14628-14633
  • DOI: 10.1073/pnas.1306939110
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystallographic and NMR evidence for flexibility in oligosaccharyltransferases and its catalytic significance (2013)
  • 著者名/発表者名: James Nyirenda, et al.
  • 雑誌名: Structure 巻: 21 号: 1 ページ: 32-41
  • DOI: 10.1016/j.str.2012.10.011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystallization, X-ray diffraction analysis and SIRAS phasing of human α-L-iduronidase (2012)
  • 著者名/発表者名: Maita N, Taniguchi H, and Sakuraba H
  • 雑誌名: Acta Crystallographica 巻: Section F 68(Pt 11) 号: 11 ページ: 1363-1366
  • DOI: 10.1107/s1744309112040432
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystallization strategy for the glycoprotein-receptor complex between measles virus hemagglutinin and its cellular receptor SLAM (2012)
  • 著者名/発表者名: Hashiguchi T, Ose T, Kubota M, Maita N, Kamishikiryo J, Maenaka K, Yanagi Y.
  • 雑誌名: Prot Pept Lett 巻: 19 号: 4 ページ: 468-473
  • DOI: 10.2174/092986612799789314
  • NAID: 120006373252
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystallographic snapshots of Tom20-mitochondrial presequence interactions with disulfide-stabilized peptides (2011)
  • 著者名/発表者名: Saitoh T, Igura M, Miyazaki Y, Ose T, Maita N, Kohda D.
  • 雑誌名: Biochemistry 巻: 50 号: 24 ページ: 5487-5496
  • DOI: 10.1021/bi200470x
  • 査読あり
• [学会発表] A novel function of the N-glycan revealed by the crystal structure of α-L-iduronidase (2014)
  • 著者名/発表者名: Nobuo Maita
  • 学会等名: 第９回研究所ネットワーク国際シンポジウム
  • 発表場所: 大阪大学銀杏会館（大阪府）
• [学会発表] In situ click chemistry誘導型キチナーゼ阻害剤をリードとする高活性誘導体の創製 (2013)
  • 著者名/発表者名: 廣瀬友靖, 他
  • 学会等名: 日本薬学会第133年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県）
• [学会発表] マクロライド骨格をテンプレートとした新規キチナーゼ阻害剤の創製 (2013)
  • 著者名/発表者名: 菅原章公, 他
  • 学会等名: 日本薬学会第133年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県）
• [学会発表] ヒトα-L-イズロニダーゼの結晶構造解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 真板宣夫, 月村考宏, 大野一樹, 谷口寿章, 櫻庭均
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡国際会議場(福岡県)
  • 年月日: 2012-12-12
• [学会発表] ヒトα-L-イズロニダーゼの結晶構造解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 真板宣夫, 他
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡国際会議場（福岡県）
• [学会発表] Crystal structure of T-H protein complex of the glycine cleavage system (2011)
  • 著者名/発表者名: Okamura-Ikeda K, Hosaka H, Maita N, Fujiwara K, Yoshizawa AC, Nakagawa A, Taniguchi H.
  • 学会等名: XXII Congress and General Assembly of the International Union of Crystallography
  • 発表場所: Palacio Municipal de Congresos de Madrid (Madrid, Spain)
  • 年月日: 2011-08-25
• [学会発表] Crystal structure of humanα-L- iduronidase (2011)
  • 著者名/発表者名: Maita N, Taniguchi H, Sakuraba H.
  • 学会等名: XXII Congress and General Assembly of the International Union of Crystallography
  • 発表場所: Palacio Municipal de Congresos de Madrid (Madrid, Spain)
  • 年月日: 2011-08-24
• [学会発表] Crystal structure of Cbl-b TKB domain in complex with Cblin (Cbl-b inhibitor) (2011)
  • 著者名/発表者名: Ueji T, Shirakata A, KondohS, Nagano K, Maita A, Maita N, Okumura Y, Nikawa T.
  • 学会等名: XXII Congress and General Assembly of the International Union of Crystallography
  • 発表場所: Palacio Municipal de Congresos de Madrid (Madrid, Spain)
  • 年月日: 2011-08-24
• [学会発表] Crystal structure of human alpha-L-iduronidase (2011)
  • 著者名/発表者名: Nobuo Maita et al.
  • 学会等名: XXII Congress and General Assembly of the International Union of Crystallography
  • 発表場所: Madrid, Spain
• [備考]
  • URL: http://pub2.db.tokushima-u.ac.jp/ERD/person/166156/profile-ja.html