多機能性プロテオグリカン分子創出のための糖鎖工学基盤技術の開発

• 研究課題/領域番号: 23570157
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 弘前大学
• 研究代表者: 柿崎 育子 弘前大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (80302024)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2013年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2012年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2011年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 糖鎖 / 糖鎖工学 / プロテオグリカン

研究概要

プロテオグリカンの糖鎖組み換え技術への応用を目指し、ヒアルロニダーゼ（ウシ精巣由来）とセルラーゼ（A. nigar由来）の加水分解反応と糖転移反応について検討した。プロテオグリカンの他、プロテオグリカンの糖鎖とコアペプチドとの橋渡し構造をもつオリゴ糖や脱硫酸化糖鎖を調製し、市販の糖鎖とともに反応基質として用いた。ヒアルロニダーゼで低分子化されるが、糖転移反応のドナー基質としては働かない可能性のある糖鎖構造が新たに示唆された。プロテオグリカンの糖鎖に対するセルラーゼの加水分解反応の至適条件を明らかにしたが、糖転移反応を検出することはできなかった。

研究成果

• [雑誌論文] One set system for the synthesis and purification of glycosaminoglycan oligosaccharides reconstructed using a hyaluronidase-immobilized column. (2014)
  • 著者名/発表者名: Suto, S., Kakizaki, I., Nakamura, T., and Endo, M.
  • 雑誌名: Biopolymers 巻: 101(3) 号: 3 ページ: 189-196
  • DOI: 10.1002/bip.22300
  • 査読あり
• [雑誌論文] Custom synthesis of hyaluronan/chondroitin sulfate hybrid oligosaccharides : for future medical applications, in The 13^<th> Meeting of Hirosaki International Forum of Medical Science"Innovation in Transplant and Regenerative Medicine" (2013)
  • 著者名/発表者名: Kakizaki, I., Suto, S., Tatara, Y., and Endo, M.
  • 雑誌名: Hirosaki Med. J. 巻: 64(Suppl) (edited by Oyama, C., et al)
  • URL: http://repository.ul.hirosaki-u.ac.jp/dspace/handle/10129/4866
• [雑誌論文] Hyaluronan-chondroitin hybrid oligosaccharides as new life science research tools. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kakizaki, I., Suto, S., Tatara, Y., Nakamura, T., and Endo, M.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 巻: 423 号: 2 ページ: 344-349
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2012.05.127
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interaction of Listeria monocytogenes autolysin amidase with glycosaminoglycans promotes listerial adhesion to mouse hepatocytes (2012)
  • 著者名/発表者名: Asano, K., Kakizaki, I., and Nakane, A.
  • 雑誌名: Biochimie 巻: 94(6) 号: 6 ページ: 1291-1299
  • DOI: 10.1016/j.biochi.2012.02.026
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anti-inflammatory effect of proteo-glycan and progesterone on human uterine cervical fibroblasts (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukuyama A, Tanaka K, Kasai K, Nakamura T, Mizunuma H.
  • 雑誌名: Life Sci 巻: 90 号: 13-14 ページ: 484-488
  • DOI: 10.1016/j.lfs.2011.12.024
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis of neoproteoglycans using the transglycosylation reaction as a reverse reaction of endo-glycosidases (2012)
  • 著者名/発表者名: Endo, M., and Kakizaki, I.
  • 雑誌名: Proc. Jpn. Acad. Ser. B Phys. Biol. Sci. 巻: 88(7) ページ: 327-344
  • NAID: 130001924753
  • URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3422686/.Review
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis of neoproteoglycans using the transglycosylation reaction as a reverse reaction of endo-glycosidases (2012)
  • 著者名/発表者名: Endo, M., and Kakizaki, I.
  • 雑誌名: Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｊａｐａｎ Ａｃａｄｅｍｙ． Ｓｅｒ． Ｂ： Ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ 巻: 88 号: 7 ページ: 327-344
  • DOI: 10.2183/pjab.88.327
  • NAID: 130001924753
  • ISSN: 0386-2208, 1349-2896
  • 査読あり
• [学会発表] 酵素を用いたグリコサミノグリカン糖鎖の構造解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 石岡陽菜,柿崎育子,多田羅洋太,須藤晋一郎,遠藤正彦
  • 学会等名: 第86回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2013-09-11
• [学会発表] Enzymatic synthesis of urinary trypsin inhibitor having an O-linked hyaluronan chain (2013)
  • 著者名/発表者名: Kakizaki, I., Takahashi, R., Yanagisawa, M., Yoshida, T., and Takagaki, K.
  • 学会等名: 9^<th>International Conference on Hyaluronan (Hyaluronan 2013)
  • 発表場所: Oklahoma city, OK, USA
• [学会発表] Enzymatic synthesis of urinary trypsin inhibitor having an O-linked hyaluronan chain (2013)
  • 著者名/発表者名: Kakizaki, I., Takahashi, R., Yanagisawa, M., Yoshida, T., and Takagaki, K.
  • 学会等名: 9th International Conference on Hyaluronan (Hyaluronan 2013)
  • 発表場所: Oklahoma city, OK, USA
• [学会発表] ヒアルロニダーゼ固定化酵素を利用した人工オリゴ糖の合成と精製システム (2012)
  • 著者名/発表者名: 須藤晋一郎,柿崎育子,多田羅洋太,中村敏也,遠藤正彦
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 2012-12-15
• [学会発表] 日本応用糖質科学会平成23年度大会(第60回)大会特別シンポジウム【応用糖質科学研究の新時代を拓く】 (2011)
  • 著者名/発表者名: 柿崎育子
  • 学会等名: 機能解析モデルとしての糖鎖改変プロテオグリカン
  • 発表場所: 札幌市
  • 年月日: 2011-09-29
• [学会発表] サケ鼻軟骨由来プロテオグリカンの糖鎖分析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 柿崎育子,峯田貴,佐々木愛,多田羅洋太,牧野英司,遠藤正彦
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2011-09-23
• [学会発表] 人工ハイブリッドヒアルロナンとヒアルロナン結合タンパク質の結合 (2011)
  • 著者名/発表者名: 須藤晋一郎,柿崎育子,多田羅洋太,中村敏也,遠藤正彦
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2011-09-23
• [学会発表] 機能解析モデルとしての糖鎖改変プロテオグリカン (2011)
  • 著者名/発表者名: 柿崎育子
  • 学会等名: 日本応用糖質科学会平成23年度大会（第60回）
  • 発表場所: 北海道大学学術交流会館（札幌市）
• [学会発表] サケ鼻軟骨由来プロテオグリカンの糖鎖分析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 柿崎育子、峯田貴、佐々木愛、多田羅洋太、牧野英司、遠藤正彦
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都市）
• [図書] サケ鼻軟骨由来のプロテオグリカン『マリンバイオテクノロジーの新潮流』 (2011)
  • 著者名/発表者名: 加藤陽治, 柿崎育子
  • 出版者: シーエムシー出版刊
• [図書] マリンバイオテクノロジーの新潮流 (2011)
  • 著者名/発表者名: 加藤陽治, 柿崎育子
  • 出版者: シーエムシー出版刊
• [備考]
  • URL: http://www.med.hirosaki-u.ac.jp/~bioche1/
• [備考]
  • URL: http://www.med.hirosaki-u.ac.jp/outline/dept2.html#b16
• [備考]
  • URL: http://www.med.hirosaki-u.ac.jp/~bioche1/