ＤＮＡ複製フォークでの分子集合と複製ヘリカーゼの役割の解明

• 研究課題/領域番号: 23570204
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 分子生物学
• 研究機関: 茨城大学
• 研究代表者: 石見 幸男 茨城大学, 理学部, 教授 (80159772)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円); 2013年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2011年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: MCMヘリカーゼ / DNA複製フォーク / タンパク質相互作用 / DNA複製 / タンパク質 / 酵素 / ゲノム / DNAヘリカーゼ / MCMタンパク質

研究概要

MCM2-7のDNAヘリカーゼ機能によって牽引されるDNA複製フォークの進行は、様々なMCM相互作用因子の働きによって制御される。それらの因子とMCM2-7各タンパク質の相互作用を明らかにした。CMG複合体のCDC45はMCM2-7のすべてに結合する特徴を示した。同様な特徴を、MCM2-7の働きを抑制すると考えられるMCM-BPも示した。このような強い結合性がMCM複合体の構造改変を通じた機能制御に重要であると考えられる。他の相互作用因子の多くは，DNAヘリカーゼ活性発揮に重要なMCM6のATP結合部位に結合性を示した。これらはMCM6の機能改変を通じてMCM機能制御に関わると考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Interaction of human minichromosome maintenance protein-binding protein with minichromosome maintenance 2-7 (2014)
  • 著者名/発表者名: Kusunoki, S. and Ishimi, Y.
  • 雑誌名: F EBS J. 巻: 281 ページ: 1057-1067
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ human minichromosome maintenance protein-binding protein with minichromosome maintenance 2-7 (2014)
  • 著者名/発表者名: Kusunoki, S. and Ishimi, Y.
  • 雑誌名: FEBS J. 巻: 281 号: 4 ページ: 1057-1067
  • DOI: 10.1111/febs.12668
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of DNA binding of MCM2-7 complex by phosphorylation with cyclin-dependent kinases (2013)
  • 著者名/発表者名: Moritani, M. and Ishimi, Y.
  • 雑誌名: J. Biochem. 巻: 154 ページ: 363-372
  • NAID: 40019817570
  • 査読あり
• [雑誌論文] Protein interaction and cellular localization of human CDC45 (2013)
  • 著者名/発表者名: Takaya, J., Kusunoki, S. and Ishimi, Y.
  • 雑誌名: J. Biochem. 巻: 153 ページ: 381-388
  • NAID: 40019622745
  • 査読あり
• [雑誌論文] Translocation and stability of replicative DNA helicases upon encountering DNA-protein cross-links (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakano, T., Miyamoto-Matsubara, M., Shoulkamy, M.I., Salem, A.M., Pack, S.P., Ishimi, Y. and Ide, H.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 巻: 288 ページ: 4649-4658
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of an MCM4 mutation that causes tumours in mouse on human MCM4/6/7 complex formation (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, E., Ohara, R. and Ishimi, Y.
  • 雑誌名: J. Biochem. 巻: 152 ページ: 191-198
  • NAID: 10031166128
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interaction of heliquinomycin with single-stranded DNA inhibits MCM4/6/7 helicase (2012)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, T., Chino, M., Tsurimoto, T., Nozaki, N. and Ishimi, Y.
  • 雑誌名: J. Biochem. 巻: 151 ページ: 129-137
  • NAID: 10031166051
  • 査読あり
• [雑誌論文] Binding of human MCM-BP with MCM2-7 proteins
  • 著者名/発表者名: Kon, R., Kusunoki, S., Nozaki, N. and Ishimi, Y.
  • 雑誌名: In DNA replication-Current advances 巻: (In Tech) ページ: 545-564
• [学会発表] MCM-BPとMCM2-7の相互作用 (2013)
  • 著者名/発表者名: 楠俊輔, 石見幸男
  • 学会等名: 日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2013-12-04
• [学会発表] CDK2/サイクリンAによるMCM2-7複合体のDNA結合阻害 (2013)
  • 著者名/発表者名: 石見幸男, 守谷真梨子
  • 学会等名: 日本生化学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-09-12
• [学会発表] CDK2/サイクリンAによるMCM2-7複合体のDNA結合阻害 (2013)
  • 著者名/発表者名: 石見幸男, 守谷真梨子
  • 学会等名: 日本生化学会関東支部例会
  • 発表場所: 山梨
  • 年月日: 2013-06-15
• [学会発表] ヒトCDC45のタンパク質相互作用と細胞内局在 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高屋潤一郎, 野崎直仁, 石見幸男
  • 学会等名: 日本分子生物学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2012-12-13
• [学会発表] ヘリキノマイシンと一本鎖DNAとの相互作用によるMCM4/6/7ヘリカーゼの阻害 (2011)
  • 著者名/発表者名: 杉山隆史, 千野信, 釣本俊樹, 野崎直仁, 石見幸男
  • 学会等名: 日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-12-15
• [学会発表] Interaction of heliquinomycin with single-stranded DNA inhibits MCM4/6/7 helicase (2011)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, T., Chino, M., Tsurimoto, T., Nozaki, N. and Ishimi, Y.
  • 学会等名: 第３４回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] CDK2/サイクリンAによるMCM2-7複合体のDNA結合阻害
  • 著者名/発表者名: 石見幸男、守谷真梨子
  • 学会等名: 日本生化学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] MCM-BPとMCM2-7の相互作用
  • 著者名/発表者名: 楠俊輔、石見幸男
  • 学会等名: 日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Protein interaction and cellular localization of human CDC45
  • 著者名/発表者名: Takaya, J ., Nozaki, N. and Ishimi, Y.
  • 学会等名: 第３５回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
• [図書] Binding of human MCM-BP with MCM2-7 proteins. in DNA replication-current advances (2011)
  • 著者名/発表者名: Kon, R., Kusunoki, S., Nozaki, N. and Ishimi, Y.
  • 出版者: In Tech.
• [備考]
  • URL: http://idna.sci.ibaraki.ac.jp/