デング熱・出血熱における次世代ワクチン開発戦略

• 研究課題/領域番号: 23580422
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用獣医学
• 研究機関: 大阪大学 (2012-2013); 京都大学 (2011)
• 研究代表者: 小林 剛 大阪大学, 微生物病研究所, 特任准教授 (90324847)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2013年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2012年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2011年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: デングウイルス / ワクチン / デング熱 / サル

研究概要

デングウイルス（DV）の新規DNAワクチン開発を目指して、DNA-based感染性cDNAクローンを構築し、培養細胞に導入した結果、導入24時間後で高力価のウイルス産生が認められた。さらに、DNA-based感染性cDNAクローンをもとに構造蛋白質領域をレポーター遺伝子に置換したレプリコンを作製した。
より効率の高いリバースジェネティクス(RG)系の開発を目的に宿主相同組換え機構を利用したDV-1型の新規RG系の開発を行った。さらに、この系を応用し、DV-2型の構造蛋白質領域を含むキメラウイルスの作製にも成功した。
これらの系の確立は新規DNAワクチン開発において、極めて有用なツールと考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Imported case of acute respiratory tract infection associated with a member of species Nelson Bay orthoreovirus (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamanaka A., Iwakiri A., Yoshikawa T., Sakai K., Harpal S., Himeji D., Kikuchi I., Ueda1 A., Yamamoto S., Miura M., Shioyama Y., Kawano K., Nagaishi T., Saito M., Minomo M., Iwamoto N., Hidaka Y., Sohma H., Kobayashi T., Kanai Y., Kawagishi T., Nagata N., Fukushi S., Mizutani T., Tani H., Taniguchi S., Fukuma A., Shimojima M., Kurane I., Kageyama T., Odagiri T., Saijo M., and Morikawa S.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9
  • 査読あり
• [雑誌論文] A plasmid-based reverse genetics system for mammalian orthoreoviruses driven by a plasmid-encoded T7 RNA polymerase (2014)
  • 著者名/発表者名: Komoto S., Kawagishi T., Kobayashi T., Ikizler M., Iskarpatyoti J., Dermody T. S., and Taniguchi K.
  • 雑誌名: J . Virol. Methods 巻: 196 ページ: 36-39
  • 査読あり
• [雑誌論文] A plasmid-based reverse genetics system for mammalian orthoreoviruses driven by a plasmid-encoded T7 RNA polymerase (2014)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Komoto
  • 雑誌名: Journal of Virological Methods 巻: 196 ページ: 36-39
  • DOI: 10.1016/j.jviromet.2013.10.023
  • 査読あり
• [雑誌論文] Imported case of acute respiratory tract infection associated with a member of species nelson bay orthoreovirus (2014)
  • 著者名/発表者名: Atsushi Yamanaka
  • 雑誌名: PLoS One 巻: ９ 号: 3 ページ: e92777-e92777
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0092777
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Nonstructural Proteinσ1s Mediates Reovirus-Induced Cell Cycle Arrest and Apoptosis (2013)
  • 著者名/発表者名: Boehme K. W., Hammer K., Tollefson W. C., Konopka-Anstadt J. L., Kobayashi T., and Dermody T. S.
  • 雑誌名: J . Virol 巻: 87 ページ: 12967-12979
  • 査読あり
• [雑誌論文] Natural infection of cynomolgus monkeys with dengue virus occurs in epidemic cycles in the Philippines (2013)
  • 著者名/発表者名: Kato F., Ishida Y., Kawagishi T., Kobayashi T., Hishiki T., Miura T., and Igarashi T.
  • 雑誌名: J . Gen. Virol 巻: 94 ページ: 2202-2207
  • 査読あり
• [雑誌論文] Construction and characterization of an infectious molecular clone of Koala retrovirus (2013)
  • 著者名/発表者名: Shojima T., Hoshino S., Abe M., Yasuda J., Shogen H., Kobayashi T., and Miyazawa T.
  • 雑誌名: J . Virol 巻: 87 ページ: 5081-5088
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of a replication-competent chimeric simian-human immunodeficiency virus carrying env from subtype C clinical isolate through intracellular homologous recombination (2013)
  • 著者名/発表者名: Fujita Y, Otsuki H., Watanabe Y., Yasui M., Kobayashi T., Miura T., and Igarashi T.
  • 雑誌名: Virology 巻: 436 ページ: 100-111
  • NAID: 120005434974
  • 査読あり
• [雑誌論文] Natural infection of cynomolgus monkeys with dengue virus occurs in epidemic cycles in the Philippines (2013)
  • 著者名/発表者名: Fumihiro Kato
  • 雑誌名: Journal of General Virology 巻: 94 号: 10 ページ: 2202-2207
  • DOI: 10.1099/vir.0.055343-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nonstructural protein σ1s mediates reovirus-induced cell cycle arrest and apoptosis (2013)
  • 著者名/発表者名: Karl W. Boehme
  • 雑誌名: Journal of Virology 巻: 87 号: 23 ページ: 12967-12979
  • DOI: 10.1128/jvi.02080-13
  • 査読あり
• [雑誌論文] Construction and characterization of an infectious molecular clone of koala retrovirus (2013)
  • 著者名/発表者名: Takayuki Shojima
  • 雑誌名: Journal of Virology 巻: 87 号: 9 ページ: 5081-5088
  • DOI: 10.1128/jvi.01584-12
  • 査読あり
• [雑誌論文] Binding of transcription factor activating protein 2γon the 5'-proximal promoter region of human porcine endogenous retrovirus subgroup A receptor 2/GPR172B (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakaya Y, Shimode S., Kobayashi T., Imakawa K., and Miyazawa T.
  • 雑誌名: Xenotransplantation 巻: 19 ページ: 177-185
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sequence comparison of three infectious molecular clones of RD-114 virus (2012)
  • 著者名/発表者名: Shimode S, Yoshikawa R., Hoshino S., Nakaya Y., Sakaguchi S., Kobayashi T., and Miyazawa T.
  • 雑誌名: Virus Genes 巻: 45 ページ: 393-397
  • 査読あり
• [雑誌論文] Canine ASCT1 and ASCT2 are functional receptors for RD-114 virus in dogs (2012)
  • 著者名/発表者名: Yoshikawa R, Yasuda J., Kobayashi T., and Miyazawa T.
  • 雑誌名: J . Gen. Virol 巻: 93 ページ: 603-607
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification and characterization of feline UBE1L gene (2012)
  • 著者名/発表者名: Shimode S, Miyazawa T., Kobayashi T., Sato H., and Tanabe T.
  • 雑誌名: J . Vet. Med. Sci 巻: 74 ページ: 235-239
  • NAID: 130001033063
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lymphatic tissues harbor viral reservoirs that cause rebound of plasma viremia in SIV-infected macaques upon cessation of combined antiretroviral therapy (2012)
  • 著者名/発表者名: Horiike M., Iwami S., Sato A., Watanabe Y., Yasui M., Kobayashi T., Miura T., and Igarashi T.
  • 雑誌名: Virology 巻: 423 ページ: 107-118
  • 査読あり
• [雑誌論文] Binding of transcription factor activating protein 2 γ on the 5′-proximal promoter region of human porcine endogenous retrovirus subgroup A receptor 2/GPR172B (2012)
  • 著者名/発表者名: Yuki Nakaya
  • 雑誌名: Xenotransplantation 巻: 19 号: 3 ページ: 177-185
  • DOI: 10.1111/j.1399-3089.2012.00701.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lymph nodes harbor viral reservoirs that cause rebound of plasma viremia in SIV-infected macaques upon cessation of combined antiretroviral therapy (2012)
  • 著者名/発表者名: Mariko Horiike
  • 雑誌名: Virology 巻: 423 ページ: 107-118
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification and characterization of feline UBE1L gene (2012)
  • 著者名/発表者名: Sayumi Shimode
  • 雑誌名: Journal of Veterinary Medical Science 巻: 74 ページ: 235-239
  • 査読あり
• [雑誌論文] Canine ASCT1 and ASCT2 are functional receptors for RD-114 virus in dogs (2012)
  • 著者名/発表者名: Rokusuke Yoshikawa
  • 雑誌名: Journal of General Virology 巻: 93 ページ: 603-607
  • 査読あり
• [雑誌論文] The reovirusσ1s protein is a determinant of hematogenous but not neural viral dissemination in mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Boehme K. W., Frierson J. M., Konopka J. L., Kobayashi T., and Dermody T. S.
  • 雑誌名: J . Virol 巻: 85 ページ: 11781-11790
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reverse genetics for mammalian reovirus (2011)
  • 著者名/発表者名: Boehme K. W., Ikizler M., Kobayashi T., and Dermody T. S.
  • 雑誌名: Methods 巻: 55 ページ: 109-113
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystal structure of reovirus attachment protein sigma1 in complex with sialylated oligosacchrides (2011)
  • 著者名/発表者名: Reiter D. M., Frierson J. M., Halvorson E. E., Kobayashi T., Dermody T. S., and Stehle T.
  • 雑誌名: PLoS Pathogen 巻: 7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystal structure of reovirus attachment protein σ1 in complex with sialylated oligosaccharides (2011)
  • 著者名/発表者名: Dirk M. Reiter
  • 雑誌名: Plos Pathogens 巻: 7
  • 査読あり
• [雑誌論文] The reovirus sigma1s protein is a determinant of hematogenous but not neural virus dissemination in mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Karl W. Boehme
  • 雑誌名: Journal of Virology 巻: 85 ページ: 11781-11790
  • 査読あり
• [学会発表] 分泌型ルシフェラーゼ遺伝子を有するデングウイルス1型レプリコンの構築 (2013)
  • 著者名/発表者名: 加藤文博, 他
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] フィリピンカニクイザルにおけるデングウイルス自然感染 (2013)
  • 著者名/発表者名: 石田祐樹, 他
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] フィリピンカニクイザルにおけるデングウイルス自然感染 (2013)
  • 著者名/発表者名: 石田祐樹
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] 分泌型ルシフェラーゼ遺伝子を有するデングウイルス1型レプリコンの構築 (2013)
  • 著者名/発表者名: 加藤文博
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] コアラレトロウイルス内在化機序の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 星野重樹, 他
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] ウシ内在性レトロウイルス-K1の獲得によるウシ科動物の進化 (2012)
  • 著者名/発表者名: 仲屋友喜, 他
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] シベリア型ダニ媒介性脳炎ウイルスIR99-2f7株の感染性cDNAクローンの構築 (2012)
  • 著者名/発表者名: 川岸崇裕, 他
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 抗デングウイルス活性を有する化合物の探索および作用機序の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 加藤文博, 他
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 中和感受性を増強する薬剤による抗HIV-1治療戦略に向けた新規SHIV/アカゲザルモデルの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大附寛幸, 他
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 中和感受性を増強する薬剤による抗 HIV-1 治療戦略に向けた新規 SHIV/アカゲザル評価モデ (2012)
  • 著者名/発表者名: 大附 寛幸
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] フラビウイルスにおける宿主DNA修復機構を用いた新規リバースジェネティクス系の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 日向亮輔, 他
  • 学会等名: 第18回トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-11-11
• [学会発表] ダニ媒介性脳炎ウイルスIR99株の感染性cDNAクローンの構築 (2011)
  • 著者名/発表者名: 川岸崇裕, 他
  • 学会等名: 第18回トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-11-11
• [学会発表] 抗デングウイルス活性を有する薬剤の探索 (2011)
  • 著者名/発表者名: 加藤文博, 他
  • 学会等名: 第18回トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-11-11
• [学会発表] 中和抵抗性のサル/ヒト免疫不全ウイルスの作製とin vitroにおける立体構造変化誘導剤による中和感受性増強効果の評価 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大附寛幸, 他
  • 学会等名: 第25回日本エイズ学会学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] ウシ内在性レトロウイルスK1エンベロープタンパクの開裂に重要な領域の探索 (2011)
  • 著者名/発表者名: 仲屋友喜, 他
  • 学会等名: 第152回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 新規相同組換え技術による組換えダニ媒介性脳炎ウイルスの構築 (2011)
  • 著者名/発表者名: 川岸崇裕, 他
  • 学会等名: 第152回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 中和抵抗性のサル/ヒト免疫不全ウイルスの作製とin vitro における立体構造変化誘導剤による中和感受性増強効果の評価 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大附寛幸
  • 学会等名: 第25回日本エイズ学会学術集会
  • 発表場所: 東京
• [備考]
  • URL: http://www.biken.osaka-u.ac.jp/lab/viral-replication/