宿主変異株を用いたＣ型肝炎ウイルスライフサイクルに関与する宿主因子の研究

• 研究課題/領域番号: 23590104
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 深澤 征義 国立感染症研究所, その他部局等, 室長 (20291130)
• 研究期間 (年度): 2011-04-28 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2015年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円); 2014年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2013年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2012年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2011年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
• キーワード: HCV / cell muitants / C型肝炎ウイルス

研究成果の概要

C型肝炎ウイルス（HCV）のライフサイクルに関わる宿主分子については、いまだ未知の部分が多い。そこで本研究では、HCV感染に耐性を示す宿主変異株の分離を通じて、HCV感染・産生に重要な宿主因子を検索・同定し、HCVライフサイクルに関わる宿主分子メカニズムを解析することを目的とした。その結果、新たに複数の宿主因子が、HCVライフサイクルに関わることが明らかとなった。様々樹立された宿主変異株の解析から、特に、タイトジャンクションタンパク質のoccludinが、HCVのセルフリー感染および細胞―細胞間感染に必須であり、有用な創薬標的になりうると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Occludin-Knockout Human Hepatic Huh7.5.1-8-Derived Cells Are Completely Resistant to Hepatitis C Virus Infection (2016)
  • 著者名/発表者名: Yoshitaka Shirasago, Yoshimi Shimizu, Isei Tanida, Tetsuro Suzuki, Ryosuke Suzuki, Kazuo Sugiyama, Takaji Wakita, Kentaro Hanada, Kiyohito Yagi, Masuo Kondoh, and Masayoshi Fukasawa
  • 雑誌名: Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ＆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ 巻: 39 号: 5 ページ: 839-848
  • DOI: 10.1248/bpb.b15-01023
  • NAID: 130005149248
  • ISSN: 0918-6158, 1347-5215
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Monoclonal antibodies against extracellular domains of claudin-1 block hepatitis C virus infection in a mouse model (2015)
  • 著者名/発表者名: Masayoshi Fukasawa, Shotaro Nagase, Yoshitaka Shirasago, Manami Iida, Mayo Yamashita, Kohki Endo, Kiyohito Yagi, Tetsuro Suzuki, Takaji Wakita, Kentaro Hanada, Hiroki Kuniyasu, Masuo Kondoh
  • 雑誌名: J Virol 巻: 89 号: 9 ページ: 4866-4879
  • DOI: 10.1128/jvi.03676-14
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Isolation and Characterization of an Huh.7.5.1-Derived Cell Clone Highly Permissive to Hepatitis C Virus (2015)
  • 著者名/発表者名: Shirasago Y, Sekizuka T, Saito K, Suzuki T, Wakita T, Hanada K, Kuroda M, Abe R, Fukasawa M.
  • 雑誌名: Japanese Journal of Infectious Diseases 巻: 68 号: 2 ページ: 81-88
  • DOI: 10.7883/yoken.JJID.2014.231
  • NAID: 130004716751
  • ISSN: 1344-6304, 1884-2836
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Targeting cellular squalene synthase, an enzyme essential for cholesterol biosynthesis is a potential antiviral strategy against hepatitis C virus (2015)
  • 著者名/発表者名: Kyoko Saito, Yoshitaka Shirasago, Tetsuro Suzuki, Hideki Aizaki, Kentaro Hanada, Takaji Wakita, Masahiro Nishijima, Masayoshi Fukasawa
  • 雑誌名: J. Virol. 巻: 89 号: 4 ページ: 2220-2232
  • DOI: 10.1128/jvi.03385-14
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Retinoids and rexinoids inhibit hepatitis C virus independently of retinoid receptor signaling. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yuko Murakami, Masayoshi Fukasawa, Yukihiro Kaneko, Tetsuro Suzuki, Takaji Wakita, Hidesuke Fukazawa
  • 雑誌名: Microbes and Infection 巻: 16 ページ: 114-122
  • 査読あり
• [雑誌論文] A class II phosphoinositide 3-kinase plays an indispensable role in hepatitis C virus replication (2013)
  • 著者名/発表者名: Maehama T, Fukasawa M, Date T, Wakita T, Hanada K.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 巻: 440 ページ: 150-156
  • 査読あり
• [雑誌論文] Selective estrogen receptor modulators inhibit hepatitis C virus infection at multiple steps of the virus lifecycle (2013)
  • 著者名/発表者名: Y. Murakami, M. Fukasawa, Y. Kaneko, T. Suzuki, T. Wakita, and H. Fukazawa
  • 雑誌名: Microbes and Infection 巻: 15 ページ: 45-55
  • 査読あり
• [学会発表] Establishment and characterization of occludin knock-out human hepatic Huh7.5.1 cells (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshitaka Shirasago, Yoshimi Shimizu, Isei Tanida, Tetsuro Suzuki, Takaji Wakita, Kentaro Hanada, Kiyohito Yagi, Masuo Kondoh, and Masayoshi Fukasawa
  • 学会等名: The 22th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: France
  • 年月日: 2015-10-09
  • 国際学会
• [学会発表] ヒト肝臓由来培養細胞株からのOccludinノックアウト細胞株の樹立と本細胞株を用いたHCV感染の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 白砂圭崇、清水芳実、谷田以誠、鈴木哲朗、脇田隆字、花田賢太郎、近藤昌夫、八木清仁、深澤征義
  • 学会等名: 第22回肝細胞研究会
  • 発表場所: 米子
  • 年月日: 2015-06-04
• [学会発表] HCVに対して高感染感受性を有するHuh7.5.1細胞亜株の樹立と性状解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 白砂 圭崇、関塚剛史、齊藤恭子、鈴木哲朗、脇田隆字、花田賢太郎、黒田誠、安部良、深澤征義
  • 学会等名: 第62回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-10 – 2014-11-12
• [学会発表] Development of claudin-1-specific ligand (2013)
  • 著者名/発表者名: Shotaro Nagase, Mayo Yamashita, Manami Iida, Akihiro Watari, Masuo Kondoh, Masayoshi Fukasawa, Kiyohito Yagi
  • 学会等名: Experimental Biology 2013
  • 発表場所: Boston, USA
• [学会発表] 上皮細胞を標的とした創薬基盤研究第１報～claudin-1特異性抗体の創製～ (2013)
  • 著者名/発表者名: 長瀬翔太郎、山下真代、飯田愛未、渡利彰浩、近藤昌夫、深澤征義、多田稔、石井明子、八木清仁
  • 学会等名: 第29回日本DDS学会学術集会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 上皮細胞を標的とした創薬基盤研究第２報～claudin-1抗体のC型肝炎治療への応用～ (2013)
  • 著者名/発表者名: 飯田愛未、長瀬翔太郎、山下真代、近藤昌夫、八木清仁、國安弘基、深澤征義
  • 学会等名: 第29回日本DDS学会学術集会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Claudin-1-specific monoclonal antibodies and their inhibition of hepatitis C virus infection (2013)
  • 著者名/発表者名: Shotaro Nagase, Mayo Yamashita, Manami Iida, Akihiro Watari, Kiyohito Yagi, Masayoshi Fukasawa, Masuo Kondoh
  • 学会等名: 40th Annual Meeting & Exposition of the Controlled Release Society
  • 発表場所: Honolulu, USA
• [学会発表] Claudin 1抗体の樹立と本抗体によるC型肝炎ウイルス感染阻害 (2013)
  • 著者名/発表者名: 深澤征義、白砂圭崇、長瀬翔太郎、近藤昌夫、八木清仁、安部 良、花田賢太郎
  • 学会等名: 第86回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] C型肝炎ウイルスへの感染感受性を欠損した宿主肝細胞変異株の分離と性状解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 白砂圭崇、鈴木哲朗、脇田隆字、花田賢太郎、安部良、深澤征義
  • 学会等名: 第86回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Inhibition of hepatitis C virus infection by mouse anti-claudin 1 monoclonal antibodies (2013)
  • 著者名/発表者名: Masayoshi Fukasawa, Shotaro Nagase, Mayo Yamashita, Manami Iida, Yoshitaka Shirasago, Akihiro Watari, Tetsuro Suzuki, Takaji Wakita, Kiyohito Yagi, Masuo Kondoh
  • 学会等名: The 20th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Melbourne, Australia
• [学会発表] Development of claudin-1 monoclonal antibodies and their pharmaceutical activities (2013)
  • 著者名/発表者名: Mayo Yamashita, Shotaro Nagase, Manami Iida, Yoshitaka Shirasago, Masayoshi Fukasawa, Masuo Kondoh, Minoru Tada, Akiko Ishii, Akihiro Watari, Kiyohito Yagi
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第28回年会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 宿主Claudin 1―ウイルス相互作用を標的としたC型肝炎ウイルス感染阻害 (2013)
  • 著者名/発表者名: 深澤征義、近藤昌夫、長瀬翔太郎、白砂圭崇、飯田愛未、山下真代、鈴木哲朗、脇田隆字、八木清仁、安部 良、花田賢太郎
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Huh7.5.1細胞由来C型肝炎ウイルス非感染感受性変異株の分離と性状解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 白砂圭崇、鈴木哲朗、脇田隆字、花田賢太郎、安部良、深澤征義
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] In vitro and in vivo inhibition of hepatitis C virus infection by mouse anti-human claudin 1 monoclonal antibodies (2013)
  • 著者名/発表者名: Masayoshi Fukasawa, Shotaro Nagase, Mayo Yamashita, Kentaro Hanada, Akihiro Watari, Kiyohito Yagi, Masuo Kondoh
  • 学会等名: The 2013 ASCB Annual Meeting
  • 発表場所: New Orleans, USA
• [学会発表] Claudin 1を標的としたC型肝炎ウイルス感染阻害 (2013)
  • 著者名/発表者名: 深澤征義
  • 学会等名: 日本薬学会第１３３年会
  • 発表場所: 横浜
  • 招待講演
• [学会発表] Claudinを標的とした創薬基盤技術の開発第１報～claudin-1特異的binderの創製～ (2013)
  • 著者名/発表者名: 長瀬翔太郎、山下真代、飯田愛未、渡利彰浩、近藤昌夫、深澤征義、八木清仁
  • 学会等名: 日本薬学会第１３３年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] 高感染能を有する2a型C型肝炎ウイルスJFH-1由来変異株の性状解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 白砂圭崇、齊藤 恭子 、村上 裕子、 深澤 秀輔 、鈴木 哲朗、脇田 隆字、花田 賢太郎 、千葉 丈、安部 良、深澤 征義
  • 学会等名: 日本薬学会第１３３年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Isolation and characterization of a mutant hepatitis C virus adapted to mouse CD81 (2012)
  • 著者名/発表者名: Masayoshi Fukasawa, Ryo Anai, Yoshitaka Shirasago, Kyoko Saito, Yuko Murakami, Hidesuke Fukazawa, Tetsuro Suzuki, Takaji Wakita, Jo Chiba, Kentaro Hanada
  • 学会等名: The 19th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Italy
• [学会発表] 高感染能を有するHCV JFH-1適応変異株の性状解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 白砂圭崇、齋藤恭子、村上 裕子、深澤 秀輔、 鈴木 哲朗、 脇田 隆字、花田 賢太郎、 千葉 丈、安部 良、深澤 征義
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 適応変異を有する高感染性HCV株の分離 (2011)
  • 著者名/発表者名: 深澤征義、白砂圭崇、齋藤恭子、村上裕子、深澤秀輔、鈴木哲朗、鈴木亮介、脇田隆字、千葉丈
  • 学会等名: 第18回HCVおよび関連ウイルスに関する国際会議
  • 発表場所: Seattle, USA
• [産業財産権] 抗体、フラグメント及び抗HCV治療剤 (2013)
  • 発明者名: 近藤昌夫、深澤征義、石井明子、多田稔、八木清仁、渡利彰浩
  • 権利者名: 大阪大学･ヒューマンサイエンス振興財団
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2013-11-08
  • 外国
• [産業財産権] 抗体、フラグメント、分子及び抗HCV治療剤 (2013)
  • 発明者名: 近藤昌夫、深澤征義、石井明子、多田稔、八木清仁、渡利彰浩
  • 権利者名: 大阪大学･ヒューマンサイエンス振興財団
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2013-02-28
• [産業財産権] 培養細胞、及び、細胞構築方法 (2012)
  • 発明者名: 深澤征義、花田賢太郎
  • 権利者名: ヒューマンサイエンス振興財団
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2012-07-10